K亚群禽白血病病毒多克隆检测抗体的制备和特性分析

论文摘要

为制备识别K亚群禽白血病病毒（ALV-K）兔源多克隆抗体,将含ALV-Kgp85基因的表达质粒在大肠杆菌体内进行诱导表达,获得含his标签的大小为55KD的重组蛋白;将纯化后的表达蛋白免疫接种5只青年兔,三次加强免疫后检测收获血清抗体,ELISA检测血清抗体效价;对血清抗体进行纯化并检测抗体亚型,Western-blot和IFA检测抗体对ALV-Kgp85蛋白和病毒识别特性。结果表明,获得的抗体效价达到8×107,抗体亚型为IgG2b,该抗体能够特异性识别ALV-Kgp85蛋白和DF1细胞中的ALVK病毒,可以用于IFA临床检测,为K亚群禽白血病的快速检测奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 重组gp85蛋白在大肠杆菌中的表达
•     1.2.2 蛋白电泳
•     1.2.3 蛋白纯化
•     1.2.4 多克隆抗体制备
•     1.2.5 血清抗体纯化
•     1.2.6 抗体亚群鉴定
•     1.2.7 多克隆抗体的识别检测
• 2 结果
•   2.1 gp85蛋白的诱导表达
•   2.2 表达产物Western blotting鉴定
•   2.3 多克隆抗体的效价检测
•   2.4 多克隆抗体的纯化及纯化的效价检测
•   2.5 多克隆抗体的亚型检测
•   2.6 多克隆抗体的识别检测
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王呈呈,冉英,肖雅之,李涵,胡卫国,邱建华,李宏梅,郭慧君

关键词: 亚群禽白血病病毒,基因,间接免疫荧光试验,多克隆抗体

来源: 山东畜牧兽医 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 山东农业大学动物科技学院,山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室

基金: 国家林业局中央本级专项（2130211）,国家重点研发专项（2016YFD0500803）,国家大学生创新性实验计划立项项目（201810434022）,山东省“双一流”奖补资金

分类号: S852.65

页码: 1-4

总页数: 4

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