E18胚胎大鼠皮层区离体神经元培养

E18胚胎大鼠皮层区离体神经元培养

论文摘要

神经元细胞体外培养,尤其来自中枢神经系统内的细胞,是研究神经退行性疾病发病机制、神经再生过程以及基因工程小鼠模型等重要的实验手段。E18胚胎大鼠皮层神经元体外培养技术,主要包括前期圆玻片处理、皮层分离、细胞消化、铺种以及更换培养基等。结果发现,该研究神经元细胞生长良好,可维持生长至少20天。在神经元形态方面,树突具有较多分支,轴突在不同细胞间形成连接。通过免疫染色和共聚焦显微镜成像,该研究可观察到树突棘结构。此外,对培养的神经元进行转染实验发现,转染后细胞状态良好,转染效率在10%左右。综上,神经元体外培养技术方法可以较好地培养神经元并能维持神经元正常发育生长。体外培养的神经元细胞可用于免疫组化、基因编辑以及实时成像研究。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试剂与设备
  •     1.1.1 盖玻片处理试剂
  •     1.1.2 培养准备
  •     1.1.3 免疫染色及转染实验
  •     1.1.4 仪器设备
  •     1.1.5 试剂配制
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 处理圆玻片(coverslips)
  •     1.2.2 铺板
  •     1.2.3 解剖
  •     1.2.4 处理细胞、铺种细胞
  •     1.2.5 细胞换液及后续培养
  •     1.2.6 细胞转染实验
  •     1.2.7 细胞免疫染色
  • 2 结果
  •   2.1 神经元细胞生长状态
  •   2.2 神经元细胞转染情况
  •   2.3 神经元细胞免疫染色实验
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王金鹏,张勇

    关键词: 神经元,细胞培养,皮层,大鼠胚胎

    来源: 中国细胞生物学学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 北京大学基础医学院神经生物学系北京大学神经科学研究所教育部神经科学重点实验室国家卫生健康委员会神经科学重点实验室

    基金: 国家自然科学基金(批准号:31771125)资助的课题~~

    分类号: Q813.11

    页码: 1772-1778

    总页数: 7

    文件大小: 2159K

    下载量: 104

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