4种硝基呋喃代谢物复合荧光免疫层析试纸条的制备

论文摘要

为建立一种基于量子点荧光免疫层析技术快速检测4种硝基呋喃类代谢物的方法,采用N-羟基琥珀酰亚胺（N-hydroxysuccinimide,NHS）、1-乙基-3-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（1-ethyl-3-（3-dimethylaminopropyl）carbodiimide hydrochloride,EDC）法合成4种硝基呋喃类代谢物的人工抗原,并融合制备对应的单克隆抗体,通过EDC-NHS一步法将量子点微球（quantum dot submicrobeads,QBs）分别与3-氨基-2-恶唑烷酮（3-amino-2-oxazolidinone,AOZ）、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮（5-morpholine-methyl-3-amino-2-oxazolidinone,AMOZ）、1-氨基-2-乙内酰（1-aminohydantoin,AHD）和氨基脲（semicarbazid,SEM）偶联,得到相应的QBs探针,在此基础上制备复合荧光免疫层析试纸条。结果表明:AOZ、AHD、SEM和AMOZ的检出限分别为0.4、0.4、0.5、0.5 μg/L;通过加标回收实验对批内和批间的重复性和准确度进行评价,得出该试纸条的批内检测回收率为80%～110%,批内变异系数在15%以内,批间回收率为80%～100%,批间变异系数在15%以内;且AOZ、AHD、SEM和AMOZ之间的交叉反应率小于0.1%,说明成功将荧光免疫层析技术和多元检测技术相结合,应用于同时检测4种硝基呋喃类代谢物,且试纸条的灵敏度和准确性高、特异性好。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 免疫抗原的制备
•     1.3.2 量子点荧光微球（quantum?dot?submicrobeads,QBs）标记抗体
•     1.3.3 QBs标记抗体偶联物的表征
•     1.3.4 偶联pH值的优化
•     1.3.5 饱和标记量的优化
•     1.3.6 试纸条的组成
•     1.3.7 样品预处理
•     1.3.8 试纸条性能测试
•       1.3.8. 1 标准曲线的制作及检测限测定
•       1.3.8. 2 准确度和精密度实验
•       1.3.8. 3 特异性实验
•       1.3.8. 4 与LC-MS/MS法的对比实验
•   1.4 数据处理
• 2 结果与分析
•   2.1 人工合成抗原的紫外扫描鉴定结果
•   2.2 偶联pH值的确定
•   2.3 饱和标记量的确定
•   2.4 荧光免疫层析试纸条的性能测试
•     2.4.1 标准曲线的建立
•     2.4.2 准确度及精密度
•     2.4.3 特异性
•     2.4.4 与LC-MS/MS法的比较结果
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 郭会灿

关键词: 硝基呋喃代谢物,荧光免疫层析,免疫抗原,量子点微球

来源: 肉类研究 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 轻工业手工业

单位: 石家庄职业技术学院食品与药品工程学院

分类号: TS251.7

页码: 29-35

总页数: 7

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