临澧县血防医院湖南临澧415200
【摘要】目的：研究住院肺炎患儿的偏肺病毒及不同亚型呼吸道合胞病毒的感染情况。方法：选取我院60例儿科肺炎患儿进行研究，提取RNA后，通过RT-PCR法测定hMPV基因和RSV基因，分析检测结果。结果：hMPV阳性检出率为8.33%，RSV阳性检出率为45%，RSV明显高于hMPV（P＜0.05）；两种检测指标检出结果下，患者一般资料对比则无统计学差异（P＞0.05）。结论：hMPV与RSV都是住院肺炎患儿的主要致病病原，同时两种病毒感染后的临床症状类似。
【关键词】肺炎患儿；偏肺病毒；呼吸道合胞病毒；感染
急性呼吸道感染是常见的发病及致死疾病之一，绝大多数的呼吸道感染都由病毒造成，相对而言较为常见的呼吸道病毒主要有呼吸道合胞病毒及流感病毒、副流感病毒等[1]。虽然呼吸道疾病的临床表现比较易于分辨，但真正导致呼吸道感染的病菌类型却并不容易识别。我市获得性肺炎的研究案例中，作出微生物诊断的仅有一半左右。为研究住院肺炎患儿偏肺病毒及呼吸道合胞病毒的感染情况，选取我院2016年10月-2017年10月期间的60例患儿进行研究，具体如下。
1.资料与方法
1.1一般资料
选取我院60例儿科呼吸病房的住院肺炎患儿作为研究对象，时间从2016年10月至2017年10月。所选研究对象中，男性33例，女性27例；年龄6个月-2岁；平均年龄（1.27±0.15）岁。患儿的主要表现为咳嗽以及发热，经X线观察发现其肺部有点状病灶。于患儿入院后采集其咽拭子标本，将其保存在中性略偏酸性（pH=7.5）的平衡盐中，取出标本后立即开展RNA提取工作并采用RT-PCR法检测相关数据
1.2方法
提取RNA：对标本的具体操作遵循RNA提取试剂盒的使用说明，当RNA沉淀时加入DEPC水，然后将处理后的标本置于-20℃温度下备用。
RT-PCR法检测hMPV基因：在94℃下持续1分钟、54℃下持续1分钟、72℃下持续1分钟，此过程循环进行40次。取5mL的PCR反应液在2%浓度的琼脂糖凝胶下进行电泳，hMPV呈阳性的PCR反应产物大小预计为450bp。
RT-PCR法检测RSV基因：在94℃下持续1分钟、45℃下持续1分钟、72℃下持续1分钟，此过程循环进行30次。取5mL的PCR反应液将其置于浓度2%的琼脂糖凝胶中，采取电泳处理，预计RSV表现为阳性的PCR反应物大小根据A、B型的不同分别为277bp和863bp。
2.结果
2.1hMPV检测结果
在咽拭子标本中将RNA提取，通过hMPV的特异性引物实行RT-PCR，在电泳过后，呈阳性标本可以观察到450bp的片断扩增产物。在所有标本中，阳性患儿5例，占比8.33%，其中男性儿童2例，女性儿童3例，均表现出咳嗽症状，通过肺部X线透视可以发现片状阴影。
2.2RSV检测结果
在咽拭子标本中将RNA提取，通过RSV的特异性引物实行RT-PCR，在电泳过后，呈阳性标本可以观察到277bp的片断扩增产物。在所有标本中，A型阳性患儿11例，占比18.33%；B型阳性患儿16例，占比26.67%。RSV感染主要有咳嗽、发热以及喘憋等症状，在经肺部X线片透视观察后发现有点状的阴影物。A型对比B型，x2=1.1947，P=0.2744，对比差异无统计学意义（P＞0.05）。
2.3hMPV对比RSV结果
RSV感染率为45%（27例），hMPV感染率为8.33%（5例），两者对比x2=20.6250，P=0.0000，对比差异具有统计学意义（P＜0.05）。RSV和hMPV肺炎患儿在发病年龄、性别等方面对比则均不具有统计学差异（P＞0.05）。
3.讨论
在儿童所有下呼吸道感染情况中，病原体主要为RSV，一般都会表现为毛细支气管炎以及病毒性肺炎症状。RSV易于大范围传播，导致儿童感染鼻炎或感冒等上呼吸道疾病；同时RSV传染性很强，容易导致医院内部的交叉感染情况出现，流行季主要集中在冬春两季[2]。RSV的主要传播方式为空气传播或接触传播，病毒会首先感染患者鼻咽上皮细胞，然后向下呼吸道扩散，最终影响支气管和细支气管。RSV能够导致儿童出现严重呼吸道疾病，临床特点主要表现在咳嗽、发热、喘憋等方面，严重时会导致患儿因心力衰竭而死亡。
hMPV由荷兰学者首先发现，并将其纳入到单分子负链RNA目中，是肺病毒亚科，偏肺病毒属。这一病毒和呼吸道疾病之间存在密切关系，具体症状能够经上呼吸道感染导致严重的支气管或肺炎[3]。对于hMPV的认识相对较晚，而造成这一结果的主要原因在于难以在常用细胞系中将其分类出来，并且生长周期较长，对细胞导致的病变效果不是十分明显。自发现以来，hMPV已经在很多地区从呼吸道患者的采集标本中被分离，这说明hMPV已经在世界很多地方流行。hMPV感染在全年均会出现，流行季主要集中在冬春两季。在临床症状上，hMPV与RSV情况类似，通常会造成患儿肺炎或支气管炎。
本次研究显示，hMPV呈阳性5例，占比8.33%；RSV呈阳性27例，占比45%，其中A型阳性率18.33%，B型阳性率26.67%，对比差异不显著（P＞0.05）。两者对比，RSV阳性检出率显著高于hMPV，对比差异显著并具有统计学意义（P＜0.05）；两者对比，一般资料及病情方面差异不显著（P＞0.05）。
由于hMPV的发现，为后来的毛细支气管炎病因学研究提出了良好的补充作用，从而有助于逐渐降低毛细支气管炎患儿的“病因不明”比例。通过本次研究发现，RSV与hMPV同样都是导致住院肺炎患儿发病的重要因素，并且RSV于hMPV感染后，患儿的临床表现并没有表现出明显区别，所导致的的不良结果也类似。
参考文献：
[1]安娜，陈曦，刘运双，等.儿童非典型呼吸道病原体感染与维生素D水平的相关研究[J].重庆医学，2017，（20）：2788-2790.
[2]周晓华，赵原，林广裕，等.潮汕地区呼吸道感染患儿腺病毒流行情况及临床分析[J].国际呼吸杂志，2017，（10）：745-751.
[3]周武斌，韩正一.黄石市儿童急性下呼吸道人鼻病毒感染流行病学特点及相关危险因素分析[J].中国医学前沿杂志（电子版），2017，（8）：70-73.