导读:本文包含了粘附功能论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,血小板,蛋白,蜂毒,弧菌,半胱氨酸,聚乙烯醇。
粘附功能论文文献综述
周金生[1]（2019）在《光诱导-可逆加成断裂链转移聚合在聚乙烯醇水凝胶上接枝聚合物构建抗生物粘附功能表面及性能研究》一文中研究指出聚乙烯醇(PVA)水凝胶是常用的生物材料其性能优异,但是在植入人体后仍然会产生生物粘附问题。本文将新型绿色的、可工业化应用的光诱导-可逆加成断裂链转移(PET-RAFT)聚合应用在水凝胶表面修饰,成功构建了季铵盐壳聚糖、两性离子和温度刺激响应叁种功能性表面,提高了水凝胶的抗生物粘附性能,并扩大了应用范围、降低了使用风险。本文主要研究内容如下:(1)根据陈以昀和Boyer课题组的研究成果,推断PVA水凝胶上的羟基与接枝单体的双键发生PET-RAFT聚合而形成醚键。ATR-FTIR和XPS验证了这一说法。反应因素结果表明:CPADB和光催化剂在合适的浓度下可形成稳定的自由基浓度;光催化剂的催化效率随着光吸收强度的提高而提高;接枝率随单体浓度的提高而提高;无氧环境下的反应效率比有氧的高;接枝反应前期缓慢,中期逐步提高,而后期趋于稳定;反应温度可提高反应速率;氯铝酞菁(AlPc)体系可透过遮挡物进行反应,但反应效率较低。(2)采用PET-RAFT聚合和开环反应两步法成功在PVA水凝胶上接枝甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和2-羟丙基叁甲基氯化铵壳聚糖(HACC)。接枝后,水凝胶热力学性能降低,亲水性和力学性能变化较大,光学透过率降低。PVA-g-pGMA和PVA-g-p(GMA-HACC)水凝胶细胞毒性分别为0级和1级。水凝胶接枝GMA引入的环氧基团提高了生物粘附性能(蛋白吸附性能提高50.78%,细胞粘附性能提高23.08%-42.58%)。而PVA-g-p(GMA-HACC)水凝胶由于空间排斥效应和表面水化效应,抗蛋白吸附性能提高39.59%,抗细胞粘附性能提高44.50%-54.52%。(3)采用PET-RAFT聚合一步法在有氧环境将MEDSAH两性离子接枝至PVA水凝胶上。接枝后,水凝胶热力学性能和力学性能降低,亲水性提高(接触角14.6°),光学透过率>88.8%。PVA-g-pMEDSAH水凝胶细胞毒性为1级。基于表面水化效应和空间排斥效应,水凝胶的抗蛋白吸附性能提高59.53%,抗细胞粘附性能提高71.82%-75.86%。(4)采用荧光黄体系在有氧环境下成功接枝NIPAAm温度刺激响应聚合物至PVA水凝胶上。接枝后,水凝胶的热力学性能和力学性能变化较小,亲水性提高且具有温敏特性(25℃时接触角4.3°,37℃时接触角37.4°),光学透过率>92.2%。PVA-g-pNIPAAm水凝胶细胞毒性为1级。水凝胶的抗蛋白吸附性能提高且具有温敏特性(25℃时提高56.09%,37℃时提高42.75%),抗细胞粘附性能提高37.29%-46.65%,其主要原因是空间排斥效应。(5)采用AlPc体系在有氧环境下成功接枝CBMA两性离子至PVA水凝胶上。接枝后,水凝胶的热力学性能和力学性能降低,亲水性提高(接触角16.8°),但AlPc残留影响水凝胶光学性能。PVA-g-pCBMA水凝胶细胞毒性为1级。基于表面水化效应和空间排斥效应,抗蛋白吸附性能提高64.62%,抗细胞粘附性能提高71.24%-77.70%。(本文来源于《浙江大学》期刊2019-06-10）
徐倩[2]（2019）在《rAlb-34k2重组蛋白粘附细菌、细胞的功能初探》一文中研究指出目的:探讨白纹伊蚊雌蚊特异性唾液重组蛋白34k2(rAlb-34k2)对多种细菌粘附效应的影响,以及与DENV-2的多种靶细胞粘附效应的功能初探。方法:(1)利用免疫印迹法检测大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌与rAlb-34k2蛋白共孵育后的粘附效应;利用分光光度法检测rAlb-34k2蛋白对16h内大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的OD_(600)值的变化。(2)利用间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白对DENV-2早期感染BHK-21细胞的影响;利用免疫印迹、间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白与BHK-21、U87、Raw264.7、HaCat细胞的粘附效应以及抗体阻断的作用。结果:(1)rAlb-34k2对多种细菌粘附效应的初探:①rAlb-34k2蛋白可与大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌粘附,而不能与乙型溶血性链球菌粘附;②不同浓度rAlb-34k2蛋白(137 ng/μL、112 ng/μL)干预大肠杆菌后24h内细菌的OD_(600)值分别波动在0.063~0.294和0.097~0.349之间,与PBS对照组相比,平均抑制率分别为68.7%,66.4%(n=5),且与Ca~(2+)的存在无关。而在Ca~(2+)依赖下相应浓度的rAlb-CTL2蛋白具有促进大肠杆菌OD_(600)升高的效应,平均促进率分别为30.4%,50.3%(n=5)。③以PBS、BSA为对照,rAlb-34k2蛋白(终浓度为48 ng/μL)作用于金黄色葡萄球菌后16 h内细菌的OD_(600)值波动在0.064~1.504之间,与PBS对照组相比,平均促进率为136%,提示该蛋白具有可能一定的促金黄色葡萄球菌生长的可能(OD_(600))。(2)rAlb-34k2对DENV-2多种靶细胞粘附作用的初探:① rAlb-34k2蛋白干扰后,DENV-2感染BHK-21细胞24h内的感染比值分别为:rAlb-34k2蛋白组为0.54±0.029;热灭活rAlb-34k2蛋白组为0.40±0.023;DENV-2对照组为0.44±0.03。在蛋白水平表明rAlb-34k2蛋白在早期能促进DENV-2感染BHK-21细胞(n=13,P<0.001);②免疫印迹法显示不同浓度的rAlb-34k2蛋白对BHK-21细胞有明显的粘附效应,且该效应不被抗rAlb-34k2特异性抗血清预处理后所阻断;进一步通过免疫印迹和免疫荧光法证实rAlb-34k2蛋白还可识别U87、Raw264.7及HaCat等细胞。结论:白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白可通过粘附多种细菌;同时该蛋白也可与DENV-2的多种靶细胞结合。(本文来源于《贵州医科大学》期刊2019-05-31）
孙玉静[3]（2019）在《粘附类G蛋白偶联受体GPR64的功能与信号转导研究》一文中研究指出粘附类G蛋白偶联受体(Adhesion GPCRs)是仅在最近才被研究关注较多的一类GPCR结构。由于粘附类G蛋白偶联受体具有复杂的结构,其在生物体内的功能研究较少。此外,大多数粘附类G蛋白偶联受体仍是孤儿受体,没有明确已知的的配体,所以,粘附类G蛋白偶联受体的功能、信号转导研究和配体发现具有重要的意义。目前,据有关文献报道数据统计,全球范围内大约15%的夫妇受到不孕症的困扰,其中男性因素占50%以上,男性不育越来越成为大家关注的问题。粘附类GPR64(又称Adgrg2或HE6)主要在附睾组织表达,对男性生育起着重要的功能,这一重要功能引起了我们对这种受体的极大兴趣,因为它是男性生育能力提高或男性避孕的潜在目标。在小鼠的研究中GPR64可以导致睾丸积水,导致精子在输出小管中积聚,但是具体诱因却不清楚。最近,人类已知的内源性GPR64突变是人类阻塞性无精子症的原因之一,但是其信号转导途径并不清楚。此外,目前GPR64是孤儿受体,没有配体,目前已知的仅有Stachel序列衍生的激动肽,但是其活性并不是太好,不能为其功能研究提供有效的工具。因此,本文主要探究GPR64在生殖系统中的功能、信号转导、激动肽配体优化以及其与GPR64受体的结合模式。一、研究目的1:GPR64是否在生殖系统中发挥重要的功能。2:GPR64是通过那些下游目标蛋白调节输出小管水分重吸收功能。3:与人类疾病相关的已知GPR64内源性突变K990E对于下游G蛋白调控的影响。4:GPR64已知的Stachel序列衍生的激动肽配体优化以及该配体与GPR64受体结合模式研究。二、主要方法论文采用实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测31个粘附类GPCRs(adhesion GPCRs)在附睾中的表达情况;应用实时定量PCR(Real-time PCR)技术检测输出小管与GPR64-promoter腺病毒标记输出小管单细胞中与水分调节相关的重要离子通道及Gs、Gq蛋白的表达情况;选用普通PCR、cDNA测序技术在基因层面检测GPR64移码突变敲除鼠构建是否成功;采用western blot等实验方法验证GPR64在附睾和HEK-293细胞系中的表达情况;应用HE染色技术检测WT鼠与GPR64-/Y敲除鼠在附睾和输出小管中精子淤积情况;使用GPR64-promoter腺病毒标记输出小管单细胞用于后期实验;用各种离子通道的抑制剂,研究在输出小管中水分重新收中重要的离子通道;利用免疫荧光染色技术检测了 GPR64、CFTR、Gs、Gq在附睾或者输出小管中表达位置;采用氯离子MQAE探针检测了WT鼠与GPR64-/Y敲除鼠输出小管结扎后细胞内Cl-浓度;应用氢离子BCECF-AM探针检测了WT鼠与GPR64-/Y敲除鼠输出小管结扎后细胞内pH值;采用膜片钳方式记录GPR64-promoter腺病毒标记输出小管单细胞及其HEK-293细胞重组系统中全细胞电流;使用Quick change的方法构建了GPR64已知的人类内源性疾病突变质粒K990E及其他GPR64相关的突变质粒;采用GloSensor cAMP技术在HEK-293细胞中检测GPR64对于Gs信号通路激活情况;采用NFAT-Luciferase双荧光素酶检测系统检测在HEK-293细胞中GPR64对于Gq信号通路激活情况;利用膜受体ELISA方法检测GPR64不同突变体的表达情况;使用丙氨酸扫描技术检测GPR64激动肽关键的氨基酸位点;应用改良的Bret方法检测GPR64不同突变体对其Stachel序列衍生的优化激动肽[FITC]V13FMe结合情况。叁、主要结果1.在正常情况下和脂多糖(LPS)诱导附睾炎症情况下GPR64均表达较高通过Real-time PCR技术分析了31个adhesion GPCRs在附睾中的表达情况,发现大部分adhesion GPCRs在附睾中大量表达,其中,我们发现表达较高的3种adhesion GPCRs包括CD87、CELSR1和GPR64;同时在LPS造模诱导附睾炎症情况下,上述3种表达较高的adhesion GPCRs中只有GPR64大量表达。根据本文研究结果和已知的GPR64功能相关文献总结共同说明GPR64生殖系统中具有重要功能。2.GPR64移码突变敲除鼠的构建是成功的采用CRISPR-cas9技术在GPR64第1个外显子区域删去2bp后加入10bp核苷酸,导致移码突变。GPR64的翻译在信号肽区域停止,并且所有剪接变体均适合。通过普通的PCR及基因组DNA测序在基因层面共同验证了GPR64移码突变敲除鼠的构建是成功的,但基因水平有时并不代表蛋白水平的变化。我们后面检测了GPR64敲除鼠蛋白表达情况,GPR64在细胞膜表达,通过分离附睾头部膜蛋白检测在敲除鼠和WT鼠中的GPR64表达情况,最终验证GPR64敲除鼠的构建是成功的。3.GPR64敲除鼠生育能力降低并伴随输出小管精子淤积通过统计WT与GPR64-/Y敲除鼠胚胎数目,结果表明GPR64敲除后生育能力降低;通过统计WT与GPR64-/Y敲除鼠附睾尾部精子数目检测和附睾HE染色并进行精子面积统计发现GPR64-/Y敲除鼠在附睾中的精子数目减少;通过WT与GPR64-/Y敲除鼠输出小管的HE染色并统计精子面积发现GPR64-/Y敲除鼠精子在输出小管大量淤积。4.GPR64敲除后影响睾丸水分重吸收功能通过检测WT与GPR64-/Y敲除鼠正常情况下睾丸的重量发现GPR64-Y睾丸的重量明显比WT的重,预示GPR64可能在水分重新收中起到重要的功能,另外我们通过附睾头部结扎实验,发现附睾头部结扎后导致GPR64-Y睾丸水分增加明显,共同说明了GPR64在睾丸水分重吸收中起到重要的功能。5.GPR64敲除鼠并未影响附睾发育,但影响输出小管水分重吸收功能由于GPR64在附睾头部表达,我们猜测是否GPR64敲除鼠的附睾发育受到影响从而影响水分重吸收,结果表明GPR64敲除后并未影响附睾的发育。另外由于睾丸中80%水分经由输出小管重新吸收,我们分离输出小管,测定正常情况下输出小管宽度,结果其宽度并未发生变化,GPR64并未影响正常情况下输出小管宽度。我们参照文献,采用输出小管两端结扎的方式,观察不同结扎时间点输出小管宽度的变化。结果表明:随着结扎时间的延长GPR64敲除鼠输出小管鼓胀明显,表明GPR64在输出小管水分重吸收中起到重要的功能。6.GPR64敲除鼠输出小管水分重吸收功能障碍可能与CFTR离子通道调控相关我们选取了输出小管重要的离子调节通道例如CFTR(囊性纤维性变转移酶传导调节蛋白)、Anoctamin-1(ANO1)、钠-氢反向转运蛋白1(NHE1)、钠-氢反向转运蛋白3(NHE3)、碳酸酐酶ⅡI(CAⅡ)、腺瘤下调蛋白(DRA)、溶质载体家族26成员9(SLC26A9)、氯离子通道配件1(CLCA1)等,通过Real-time PCR筛选了输出小管及GPR64-promoter标记的细胞相对表达较高的离子通道CFTR、ANO1、NHE1、DRA、NKCC、SLC26a9、CAⅡ,对正常输出小管结扎后采用上述通道的抑制剂,观察输出小管在各个抑制剂作用下不同时间点的鼓胀情况,结果表明:采用CFTR抑制剂CFTRinh-172可以模拟GPR64敲除鼠的表型,说明GPR64敲除鼠输出小管水分重吸收功能障碍可能与CFTR离子通道调控相关。7.GPR64敲除后影响CFTR离子通道功能为了研究GPR64敲除鼠输出小管水分重吸收功能障碍是否与CFTR离子通道调控相关,首先我们采用免疫荧光技术证实GPR64与CFTR表达位置相同,均表达在输出小管非纤毛细胞,我们测定了 WT鼠与GPR64-/Y敲除鼠输出小管结扎48h后的氯离子浓度和pH值,发现GPR64-/Y敲除鼠氯离子浓度较高和pH值较高,氯离子和氢离子稳态失衡;通过全细胞电流实验进一步证实,GPR64-/Y敲除鼠影响CFTR调控的氯离子电流,但是GPR64敲除后并未影响CFTR的表达。总之,GPR64敲除会影响CFTR离子通道的功能,但是并未影响其表达。8.GPR64调控CFTR的功能与下游Gq蛋白相关,并且β-arrestin1在GPR64与CFTR复合物的形成中起着重要的作用本论文通过检测了下游G蛋白在输出小管中的表达情况,发现Gq与GPR64表达在相同的细胞,即非纤毛细胞;并进一步通过验证Gq+/-敲除鼠输出小管结扎48h后其细胞中氯离子和氢离子浓度,发现Gq蛋白在敲除后细胞氯离子浓度和pH值偏高,间接反应Gq蛋白影响CFTR功能(我们在elife文章中验证了Gq+/-敲除鼠的电流,并且在正常GPR64-promoter标记的原代细胞采用Gs和Gq的抑制剂均证实Gq蛋白在介导GPR64调控CFTR的功能中起着重要的作用(该部分工作我均有参与,前面合作者张道来毕业论文已用该部分数据,所以该部分数据未在毕业论文中体现);后期实验通过检测证β-arrestin1-/-和β-arrestin2-/-敲除鼠输出小管结扎48h后组织细胞中氯离子和氢离子浓度,发现β-arrestin1敲除鼠氯离子和pH值偏高,β-arrestin1蛋白影响CFTR的功能。(同时我们在elife文章中通过体内输出小管和体外293细胞系系统,采用CO-IP实验验证了GPR64与CFTR蛋白可以形成复合物,并且β-arrestin1在复合物形成中起着促进作用,免疫荧光的结果证实β-arrestin1敲除后,影响CFTR与GPR64的共定位(该部分工作我均有参与,前面合作者张毕业论文已用该部分数据,所以该部分数据未在毕业论文中体现)。9.HEK-293细胞系证实GPR64可以组成性激活Gs、Gq通路信号在HEK-293细胞中采用GloSensor cAMP检测技术检测到GPR64FL与GPR64beta可以组成性激活内源性cAMP水平,表明GPR64可以组成性激活Gs信号通路;在HEK-293细胞中采用NFAT-Luciferase双荧光素酶的报告系统检测到GPR64FL与GPR64beta可以激活NFAT的转录水平,表明GPR64可以组成性激活Gq信号通路。10.GPR64已知与人类生殖相关的疾病突变K990E可以降低Gs与Gq通路信号通过Quick change构建了GPR64与人类生殖疾病相关的GPR64FL-K990E、GPR64Beta-K990E突变质粒。采用GloSensor cAMP技术在HEK-293细胞中检测GPR64FL-K990E突变对于Gs信号通路影响,研究结果表明K990E突变可以降低GPR64的组成性激活内源性cAMP水平,降低Gs通路信号;在HEK-293细胞中采用NFAT-Luciferase双荧光素酶检测系统检测NFAT转录水平,表明GPR64FL-K990E可以降低GPR64的组成性激活NFAT转录水平,降低Gq通路信号。11.GPR64已知与人类生殖相关的疾病突变K990E导致GPR64调控CFTR通道电流降低在HEK-293细胞重组系统,采用全细胞膜片钳技术检测GPR64FL-K990E突变对CFTR电流的调控能力,结果表明GPR64FL-K990E突变对于CFTR电流的调节能力降低,CFTR电流下降。1 2.GPR64已知的Stachel序列衍生的多肽P15第1、3位对其活性较为关键通常用丙氨酸扫描技术将第一个到最后一个氨基酸依次突变为丙氨酸。通过实验发现,peptide p15的关键氨基酸为红色标记的TSFGILLDLSRTSLP,这些氨基酸的突变能够完全破坏peptide的激活GPR64的cAMP的作用。并且通过peptide p15两端氨基酸截短,发现两端的氨基酸对于p15的活力至关重要,并通过序列比对第1位,第3、5、6、7位是Adhesion GPCR中的较保守的氨基酸,采用不同氨基酸突变和非天然氨基酸修饰,结果表明第1位T变为输水氨基酸V和第3位F变为非天然氨基酸Phe(4Me)活性较好。13.GPR64已知的Stachel序列衍生的优化短肽V13FMe与p15相比对于GS、Gq、β-arrestin1、β-arrestin2信号转导增强GPR64已知的Stache1序列衍生的激动肽优化短肽V13FMe与p15相比对GPR64的激活效果更好,并使GPR64产生的Gs、Gq、、β-arrestin1和β-arrestin2信号通路激活更强,激活Gs信号通路半激活浓度约为471.5nmol/L,P15的半激活浓度约为81.4μmol/L,V13FMe半激活浓度是P15的172倍。同时与P15相比可以产生激活Gq、、β-arrestin1、β-arrestin2信号通路的现象,同时激活Gq的半激活浓度EC50约为214.5μmol/L,激活β-arrestin1信号通路的半激活浓度EC50约为20μmol/L,激活β-arrestin2信号通路的半激活浓度EC50约为30μmol/L。14.GPR64突变体W757A、1758A、V768A、F824A、F826A对GPR64已知的Stachel序列衍生的优化短肽V13FMe亲和力显着降低采用不同浓度(10-10、10-9、10-8、10-7、10-6、2×10-6、5×10-6、10-5mol/L)的异硫氰酸荧光素(FITC)标记的GPR64激活多肽V13FMe,采用改良Bret实验方法,研究其对GPR64不同突变体的结合能力,通过对其EC50结果分析表明其突变体W757A、I758A、V768A、F824A,F826A突变后,与其结合能力完全丧失,说明这五个氨基酸位点与GPR64结合[FITC]V13FMe短肽密切相关。15.GPR64不同突变体对于激活多肽V13FMe结合能力,影响下游cAMP水平采用GloSensor cAMP技术在HEK-293细胞中检测GPR64不同突变体对于下游Gs信号通路影响。结果表明:与WT(GPR64△-GPS-beta)相比,不同GPR64突变体对V13FMe结合能力下降,导致其下游cAMP激活水平降低,例如W757A、I758A、N759A、V762A、V768A、W824A、F826A。但是 V13FMe对于S760A、F772A、F828A、V836A、I844A、F845A结合能力没有发生明显变化,但是其cAMP水平降低,可能是结合下游Gs蛋白能力发生变化导致的。四、主要结论:1.GPR64在附睾组织和附睾炎症诱导下表达水平较高。2.GPR64移码突变敲除鼠构建是成功的。3.GPR64敲除后生育能力降低并伴随附睾精子数目降低而精子主要在输出小管淤积的现象。4.GPR64敲除后影响睾丸和输出小管水分重吸收功能。5.GPR64主要通过调控CFTR离子通道影响输出小管水分重吸收功能。6.GPR64主要通过调控Gq蛋白影响CFTR离子通道对输出小管水分重吸收功能。7.β-arrestin1蛋白在GPR64和CFTR复合物形成中起着重要作用。8.已知的GPR64与人类生殖相关的疾病突变K990E影响Gs与Gq信号通路。9.已知的GPR64与人类生殖相关的疾病突变K990E影响CFTR电流。10.GPR64已知的Stachel序列衍生的激动肽P15第1、3位对其提供其活性较为关键。11.GPR64已知的Stachel序列衍生的短肽V13FMe与p15相比对于GS、Gq、β-arrestin1、β-arrestin2信号转导增强。12.GPR64突变体W757A、1758A、V768A、F824A、F826A后对于GPR64激活多肽[FITC]V13FMe结合能力消失。13.GPR64不同突变体对于激活多肽V13FMe结合能力影响影响下游cAMP水平变化。(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-24）
姚昭,吴淑琴,刘阳红,李小平[4]（2019）在《不同形态硒对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移功能的影响》一文中研究指出目的探讨L-硒甲基硒代半胱氨酸(L-SeMSC)和亚硒酸钠(SS)对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移能力的影响。方法采用MTT法、划痕实验、粘附实验分别检测不同形态硒对Lovo细胞增殖、迁移、粘附能力的影响;采用Western blot检测CDC37、MMP2和MMP9蛋白的表达。结果两种硒具有抑制Lovo细胞增殖作用,且随着药物浓度的增加,抑制作用增强,相同浓度下,L-SeMSC对细胞抑制作用更强(P<0.05)。两种硒均能缩短Lovo细胞的迁移距离、降低细胞粘附率,与SS相比,在中(0.1 mg/L)、高(0.2 mg/L)浓度组,L-SeMSC的抑制Lovo细胞迁移和粘附的能力更强。不同浓度L-SeMSC均能抑制CDC37和MMP2的表达,且具有浓度依赖性;高浓度(0.2 mg/L)SS能抑制CDC37、MMP2和MMP9的表达,但作用弱于相同浓度L-SeMSC。结论 L-SeMSC和SS均能通过降低CDC37、MMP2和MMP9的表达抑制结肠癌Lovo细胞的粘附和迁移能力,相同浓度L-SeMSC作用强于SS。(本文来源于《卫生研究》期刊2019年02期）
洪席超,文静,于世德,王阳[5]（2019）在《两种镁合金浸提液对血管内皮细胞粘附功能的影响》一文中研究指出目的:研究AM50和WE43铸造镁合金的浸提液对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endoth elial cells,H UVECs)粘附率的影响。方法:选用完全培养基浸泡铸态AM50和WE43均48h,并配制成10%、50%和100%的浸提液,处理H UVECs 24和48 h后用MTT、qPCR法和免疫荧光法检测细胞粘附情况。结果:不同浓度的浸提液分别处理HUVECs 24或48 h后,MTT检测结果显示,与对照组相比,实验组细胞粘附率无明显差异。qPCR结果证实高浓度的镁合金浸提液显着下调细胞内粘附相关基因的表达。免疫荧光结果同样显示,高浓度的镁合金浸提液处理细胞后,细胞粘附形态会发生改变,如细胞形态变小、变圆,细胞骨架结构模糊。结论:铸态AM50和WE43的浸提液不会对内皮细胞的粘附率产生明显影响,但高浓度的浸提液会影响细胞的粘附功能。(本文来源于《口腔颌面修复学杂志》期刊2019年02期）
王奕超,张卫卫[6]（2019）在《灿烂弧菌粘附相关因子VsA的表达及功能研究》一文中研究指出为了探究灿烂弧菌中Zn~(2+)转运系统的细胞周质组分Vs A的表达与功能,本实验采用PCR克隆vsA基因,实时荧光定量测定vsA基因的表达,利用抗体封闭实验研究Vs A蛋白的功能。生物信息学分析表明Vs A具有结合和转运Zn~(2+)的结构基础。实时荧光定量结果表明,vsA的表达受Zn~(2+)调控,且具有浓度依赖性,0.01 mmol/L的Zn~(2+)可使vsA的表达量下调至对照组的0.5倍,而添加等摩尔量的Cu~(2+)、Fe3+、Mg~(2+)和Ca~(2+)对vsA的表达无明显影响。而0.1μmol/L Zn~(2+)则会诱导vsA的表达。此外,在大肠杆菌Escherichia coli BL21 (DE3)中进行了Vs A的重组表达,制备了Vs A的小鼠多克隆抗体。利用抗体封闭Vs A蛋白可导致灿烂弧菌在Zn~(2+)限制条件下的生长受抑制,以及过氧化氢的能力和粘附效率的降低。本研究获得了灿烂弧菌的vsA基因,其表达受Zn~(2+)浓度调控,Vs A蛋白在灿烂弧菌生长、抗氧化以及粘附宿主细胞过程中发挥作用。(本文来源于《海洋通报》期刊2019年01期）
姜彧滕,赵宇,朱小东,刘玉秋,郭银凤[7]（2018）在《自噬体调控对巨噬细胞粘附与迁移功能的影响》一文中研究指出目的:本研究通过调节巨噬细胞自噬体生成探究其对巨噬细胞黏附及迁移功能的影响,以降低糖尿病肾病(DN)巨噬细胞浸润。方法:体内实验,12w末处死SD正常大鼠和DN组大鼠,病理染色观察肾脏病理改变,检测肾组织巨噬细胞标志物及自噬相关标志物表达。体外实验,检测正常与高糖(HG)组条件下,RAW 264.7巨噬细胞自噬体数量变化,自噬相关标志物LC3和Beclin-1、自噬体清除指标P62的表达,以及巨噬细胞粘附和迁移数量。分别加用自噬体生成激活剂雷帕霉素(RAPA),自噬体生成抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),观察其对巨噬细胞自噬标记物表达及其粘附和迁移功能的影响,电镜观察巨噬细胞自噬体数量的变化。结果:体内实验,DN大鼠肾损伤严重,肾组织巨噬细胞标志物CD68表达增加,LC3表达减少,P62表达增加(P<0.05)。体外实验,电镜观察发现HG组自噬体数量减少,Western与免疫荧光显示自噬相关蛋白LC3和Beclin-1表达降低,P62表达升高(P<0.05);3-MA组自噬体数量减少,Western与免疫荧光显示LC3和Beclin-1表达降低(P<0.05);HG组和3-MA组巨噬细胞粘附和迁移数量增多(P<0.05);电镜观察RAPA增加巨噬细胞自噬体数量,Western与免疫荧光显示RAPA提高了被HG抑制的巨噬细胞自噬水平(P<0.05),减少HG诱导的巨噬细胞黏附和迁移数量(P<0.05)。结论:HG抑制自噬水平,促进巨噬细胞黏附迁移;激活自噬体生成能提高自噬水平,减轻巨噬细胞粘附和迁移;减少自噬体生成可降低自噬水平,促进巨噬细胞粘附和迁移。(本文来源于《巴楚医学》期刊2018年03期）
姜彧滕,赵宇,朱小东,刘玉秋,郭银凤[8]（2018）在《调控自噬流对巨噬细胞粘附与迁移功能的影响》一文中研究指出目的巨噬细胞浸润是包括糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)在内的多种慢性肾脏疾病的重要组织病理特征。本研究通过调控巨噬细胞(RAW264.7)自噬流各阶段,探究其对巨噬细胞黏附迁移功能的影响。方法体内实验,建立糖尿病肾病大鼠模型,于12周末分别处死正常大鼠、DN组大鼠,病理染色观察肾脏病理改变,检测肾组织巨噬细胞标志物及自噬相关标志物表达。体外实验,检测正常与高糖(30 m M)条件下,巨噬细胞自噬体数量变化,LC3、Beclin-1(自噬相关标志物)、P62(自噬体清除指标)的表达,以及巨噬细胞粘附迁移数量。分别加用自噬溶酶体降解抑制剂氯喹(CQ)、自噬体生成激活剂雷帕霉素(RAPA),观察其对巨噬细胞自噬标记物表达及其粘附迁移功能的影响,电镜观察巨噬细胞自噬体数量与自噬溶酶体形态的变化。结果体内实验,DN大鼠肾脏损伤明显,肾小球体积增大,基底膜增厚,系膜基质增多,肾组织CD68(巨噬细胞标志物)、P62表达增加(t=3.35、t=16.27,P<0.05),LC3表达减少(t=51.12,P<0.05);体外实验,在高糖组,电镜观察发现自噬体数量较正常组减少,Western印迹与免疫荧光显示自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达降低,P62表达升高(t=27.02,t=45.56、t=32.71,P<0.05),巨噬细胞粘附和迁移数量增多(t=6.87、t=8.76,P<0.05)。用CQ处理后,电镜观察发现巨噬细胞自噬体溶酶体降解受到抑制,Western印迹与免疫荧光显示自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达降低,P62表达升高(t=14.64、t=12.45、t=8.57,P<0.05);CQ进一步促进高糖诱导的巨噬细胞黏附迁移数量增多(t=4.37、t=7.27,P<0.05);RAPA增加巨噬细胞自噬体数量,Western与免疫荧光显示RAPA提高了被高糖抑制的巨噬细胞自噬水平,[LC3、Beclin-1表达升高,P62表达降低(t=9.37、t=11.53,t=8.73;P<0.05)],减少高糖诱导的巨噬细胞黏附、迁移数量增多(t=4.16、t=5.74,P<0.05)。结论高糖抑制自噬水平,促进巨噬细胞黏附迁移;抑制自噬溶酶体降解可降低自噬水平、促进巨噬细胞粘附迁移;激活自噬体生成能提高自噬水平,减轻巨噬细胞粘附迁移。(本文来源于《中华肾病研究电子杂志》期刊2018年04期）
夏蒙蒙,申雪沂,牛长敏,夏静,孙红亚[9]（2018）在《MicroRNA参与调控睾丸支持细胞的增殖与粘附功能》一文中研究指出精子发生过程需要生精细胞及睾丸体细胞的共同参与,这两种细胞也决定着睾丸的发育及雄性生育力。支持细胞是生精小管中唯一的体细胞,在正常精子发生过程中发挥重要的作用。支持细胞增殖与粘附功能的异常将导致精子发生异常,进而引发雄性不育。近年来研究发现,micro RNA(mi RNA)可调控支持细胞的增殖与粘附功能,其表达水平在激素、内分泌干扰素和营养状况等多种因素作用下发生特异性变化。本文总结了与睾丸支持细胞增殖与粘附功能相关的mi RNA及其作用机制,以期发现并鉴定更多与支持细胞相关的mi RNA,进而为探索与支持细胞相关不育症的病因提供理论依据。(本文来源于《遗传》期刊2018年09期）
胡园,翟宝祺,陶磊,赵海荣,张成桂[10]（2018）在《蜜蜂蜂毒皮下注射对家兔血小板聚集和粘附功能的影响》一文中研究指出目的:考察蜜蜂蜂毒(Bee Venom,BV)经皮下注射对正常家兔血小板聚集性和粘附性的影响。方法:正常家兔连续皮下注射给药5 d,末次给药后1.5 h心脏取血,二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP)、胶原(Collagen,COL)诱导家兔血小板聚集,采用比浊法检测血小板聚集率,并使用血小板聚集仪测定富血小板血浆(Platelet rich plasma,PRP)OD值、计算粘附率。结果:BV对血小板聚集率的影响实验结果显示,与生理盐水组比较,BV 0.18、0.36、0.72mg/kg·BW剂量组,均可对ADP诱导的血小板聚集产生抑制作用,其聚集率分别为47.70±3.18、43.10±13.21、29.80±14.30,差异具有统计学意义(P<0.05),其抑制率分别为26.54%、36.62%、51.11%,且呈量效依赖关系;BV 0.36、0.72 mg/kg·BW剂量组,可对COL诱导的血小板聚集产生抑制作用,其聚集率分别为47.62±14.65、28.72±13.34(P<0.05),抑制率分别为29.28%、62.90%。血小板粘附实验显示,在COL诱导下,BV中、高剂量组均能降低COL诱导的血小板聚集率(P<0.05);粘附抑制率分别为43.94%、49.36%。结论:BV对ADP、COL诱导的家兔血小板聚集有一定的抑制作用,亦可以抑制血小板在胶原表面的粘附。(本文来源于《中国民族民间医药》期刊2018年13期）
粘附功能论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨白纹伊蚊雌蚊特异性唾液重组蛋白34k2(rAlb-34k2)对多种细菌粘附效应的影响,以及与DENV-2的多种靶细胞粘附效应的功能初探。方法:(1)利用免疫印迹法检测大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、乙型溶血性链球菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌与rAlb-34k2蛋白共孵育后的粘附效应;利用分光光度法检测rAlb-34k2蛋白对16h内大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的OD_(600)值的变化。(2)利用间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白对DENV-2早期感染BHK-21细胞的影响;利用免疫印迹、间接免疫荧光法检测rAlb-34k2蛋白与BHK-21、U87、Raw264.7、HaCat细胞的粘附效应以及抗体阻断的作用。结果:(1)rAlb-34k2对多种细菌粘附效应的初探:①rAlb-34k2蛋白可与大肠杆菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌粘附,而不能与乙型溶血性链球菌粘附;②不同浓度rAlb-34k2蛋白(137 ng/μL、112 ng/μL)干预大肠杆菌后24h内细菌的OD_(600)值分别波动在0.063~0.294和0.097~0.349之间,与PBS对照组相比,平均抑制率分别为68.7%,66.4%(n=5),且与Ca~(2+)的存在无关。而在Ca~(2+)依赖下相应浓度的rAlb-CTL2蛋白具有促进大肠杆菌OD_(600)升高的效应,平均促进率分别为30.4%,50.3%(n=5)。③以PBS、BSA为对照,rAlb-34k2蛋白(终浓度为48 ng/μL)作用于金黄色葡萄球菌后16 h内细菌的OD_(600)值波动在0.064~1.504之间,与PBS对照组相比,平均促进率为136%,提示该蛋白具有可能一定的促金黄色葡萄球菌生长的可能(OD_(600))。(2)rAlb-34k2对DENV-2多种靶细胞粘附作用的初探:① rAlb-34k2蛋白干扰后,DENV-2感染BHK-21细胞24h内的感染比值分别为:rAlb-34k2蛋白组为0.54±0.029;热灭活rAlb-34k2蛋白组为0.40±0.023;DENV-2对照组为0.44±0.03。在蛋白水平表明rAlb-34k2蛋白在早期能促进DENV-2感染BHK-21细胞(n=13,P<0.001);②免疫印迹法显示不同浓度的rAlb-34k2蛋白对BHK-21细胞有明显的粘附效应,且该效应不被抗rAlb-34k2特异性抗血清预处理后所阻断;进一步通过免疫印迹和免疫荧光法证实rAlb-34k2蛋白还可识别U87、Raw264.7及HaCat等细胞。结论:白纹伊蚊唾液rAlb-34k2蛋白可通过粘附多种细菌;同时该蛋白也可与DENV-2的多种靶细胞结合。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
粘附功能论文参考文献
[1].周金生.光诱导-可逆加成断裂链转移聚合在聚乙烯醇水凝胶上接枝聚合物构建抗生物粘附功能表面及性能研究[D].浙江大学.2019
[2].徐倩.rAlb-34k2重组蛋白粘附细菌、细胞的功能初探[D].贵州医科大学.2019
[3].孙玉静.粘附类G蛋白偶联受体GPR64的功能与信号转导研究[D].山东大学.2019
[4].姚昭,吴淑琴,刘阳红,李小平.不同形态硒对结肠癌Lovo细胞粘附及迁移功能的影响[J].卫生研究.2019
[5].洪席超,文静,于世德,王阳.两种镁合金浸提液对血管内皮细胞粘附功能的影响[J].口腔颌面修复学杂志.2019
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[7].姜彧滕,赵宇,朱小东,刘玉秋,郭银凤.自噬体调控对巨噬细胞粘附与迁移功能的影响[J].巴楚医学.2018
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