脊髓趋化因子受体2介导大鼠骨癌痛维持的机制研究

论文摘要

目的·研究脊髓趋化因子受体2（chemokine C-C motif receptor 2,CCR2）介导大鼠骨癌痛（bone cancer pain,BCP）维持的机制。方法·选取54只SD大鼠为研究对象,将其分为BCP组、假手术组、BCP+INCB3344（CCR2特异性阻断剂）组和BCP+溶剂对照组。向BCP组大鼠胫骨骨髓腔内注入Walker256乳腺癌细胞,建立骨癌痛模型;假手术组则注射等量的生理盐水。BCP+INCB3344组是在BCP模型建立第14日后,向大鼠鞘内注射INCB3344;BCP+溶剂对照组则注射等量的溶剂。通过检测BCP组大鼠和假手术组大鼠的机械痛阈值来判断鉴定BCP模型是否成功。采用蛋白质印迹检测假手术组和BCP组大鼠脊髓后角CCR2表达情况。通过机械痛行为的测试,观察鞘内给予INCB3344对BCP模型大鼠机械痛阈的影响。通过全细胞膜片钳记录观察BCP组、BCP+INCB3344组和BCP+溶剂对照组大鼠脊髓胶状质层（substantia gelatinosa,SG）神经元自发兴奋性突触后电流（spontaneous excitatory postsynaptic currents,sEPSCs）、α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸（α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazole-propionicacid,AMPA）电流和N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartic acid,NMDA）电流间的差异。结果·与假手术组相比,术后14 d时BCP组大鼠的机械痛阈下降且术侧脊髓后角CCR2的表达增加（P=0.000,P=0.009）,而鞘内注射INCB3344 4 h时可显著升高BCP大鼠的机械痛阈（P=0.002）。BCP组大鼠SG神经元sEPSCs的频率和幅度、AMPA电流和NMDA电流幅度均高于假手术组（均P=0.000）,而鞘内给予INCB3344可显著抑制BCP大鼠的上述指标（均P<0.05）;此外,胞外给予INCB3344也可显著抑制BCP大鼠SG神经元s EPSCs的频率（P=0.001）和幅度（P=0.020）。结论·脊髓后角的CCR2可通过增强AMPA和NMDA受体功能来介导BCP大鼠脊髓后角兴奋性突触传递效能的增强,该作用可能是BCP维持的重要机制。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 细胞、实验动物及分组
•     1.1.2主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 大鼠BCP模型的建立及组别处理
•     1.2.2 模型建立成功的标准
•     1.2.3 机械痛阈的测定
•     1.2.4 BCP大鼠鞘内置管术
•     1.2.5 CCR2蛋白的检测
•     1.2.6 脊髓切片的制备
•     1.2.7 脊髓切片全细胞膜片钳记录
•   1.3 统计学方法
• 2 结果
•   2.1 模型建立后BCP组和假手术组大鼠机械痛阈的比较
•   2.2 BCP组大鼠与假手术组大鼠脊髓后角CCR2表达的差异及INCB3344对BCP大鼠机械痛阈的影响
•   2.3 鞘内给予INCB3344对BCP大鼠脊髓SG神经元sEPSCs的影响
•   2.4 胞外给予INCB3344对BCP组大鼠脊髓SG神经元sEPSCs的影响
•   2.5 鞘内给予INCB3344对BCP大鼠脊髓SG神经元AMPA和NMDA电流的影响
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王丽娅,高坡,周晔

关键词: 趋化因子受体,骨癌痛,脊髓,自发兴奋性突触后电流,胶状质层

来源: 上海交通大学学报(医学版) 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 外科学,肿瘤学

单位: 上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院产科上海市胚胎源性疾病重点实验室上海市临床重点专科(建设项目)-“强主体”妇产科,上海交通大学医学院附属仁济医院麻醉科

基金: 国家自然科学基金青年科学基金项目(81800748),中国博士后科学基金(2017M610257)~~

分类号: R738.1

页码: 1261-1267

总页数: 7

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