导读:本文包含了串联体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,抗原,层析,天蚕,疫苗,蛋白质,蛋白。
串联体论文文献综述
周津,王代芳,钟碧萍[1]（2019）在《串联体结合血糖仪的便携式传感器检测cfDNA》一文中研究指出目的:建立一种基于DNA串联体和血糖仪的便携式传感器用于检测肿瘤标志物cfDNA。方法:利用DNA串联体的信号放大机制及磁珠的分离与富集作用,以血糖仪为检测器,建立一种检测肿瘤标志物cfDNA的便携式传感器。结果:在1～316fM范围内呈良好的线性关系,检测限为1fM。结论:该传感器便携可行、灵敏度高、重复性好,为肿瘤标志物的筛查提供了新的方法。(本文来源于《生物化工》期刊2019年03期）
冯利利,杜夜星,张强,李娇娇,夏海锋[2]（2018）在《链球菌蛋白G免疫球蛋白结合域C3区串联体的表达、筛选与初步应用》一文中研究指出筛选并制备高效结合抗体的重组蛋白G亲和层析介质。以链球菌蛋白G C3区为结构单元,拼接形成3、4、5、6个重复C3片段的串联体,分别克隆至PET21,并在E.coli BL21(DE3)中表达。经Ni~(2+)纯化的重组蛋白分别偶联至Purose 4 Fast Flow制备亲和层析介质,比较介质的吸附情况,发现重组四串体对h IgG的吸附量最高,其静态饱和吸附量为66.79 mg×mL~(-1),动态吸附载量为35 mg×mL~(-1)介质,优于同类型商品介质。利用该介质分离纯化小鼠腹水和人血清中的IgG,纯度在95%左右,回收率不低于80%。(本文来源于《高校化学工程学报》期刊2018年04期）
林松峰[3]（2017）在《GLP-1串联体体外表达与大鼠小肠原代上皮细胞的分离培养研究》一文中研究指出糖尿病(Diabetes)是一种终身性代谢性疾病,其发病原因众多,常表现为慢性高血糖。2013年,国际糖尿病联合会(Internatinal Diabetes Federation(IDF))公布,全球罹患糖尿病的患者达到了惊人的3.83亿。尽快糖尿病本身没有很大的危害,但是长期的血糖增高会损伤大血管、微血管,进而威胁到脑、心、周围神经、肾、眼睛等的正常功能,而且随之而来的并发症也会极大影响人类的健康。糖尿病的发病机制复杂,当前现有的治疗手段尚达不到治愈的效果,随着糖尿病患者数量的日益增多,对于它们的研究已经成为当前医学领域的热点。由哺乳动物肠道L细胞分泌的胰高血糖素样肽(glucagon-like peptide-1,GLP-1)是一种多肽类激素,该多肽由31个氨基酸组成。由于它可以促进胰岛素在高血糖状态下的分泌,所以GLP-1在2型糖尿病的治疗中备受关注。但是机体内存在的二肽基肽酶(DPPⅣ)能够使GLP-1迅速降解,这极大地限制了GLP-1的生理功能。为了提升GLP-1在体内的生理功能,需要对GLP-1的结构进行优化或者提高GLP-1在体内的表达产量,从而抵抗DPP-IV的降解。本研究通过构建GLP-1串联重复多聚体来提高GLP-1在体外的表达产量,从而使其能够更长时间地抵抗DPPⅣ的降解作用,最终提升GLP-1在体内的生理功能。在本研究中,我们分别构建了p ET-22b-GLP4,GLP8,GLP12和GLP16的表达载体,在大肠杆菌BL21(D3)中转化后利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果显示,GLP4的表达量最高,GLP8次之,而GLP12和GLP16几乎不表达。除了基因本身的结构和表达系统的效率外,诱导温度、诱导时间以及诱导剂浓度对GLP-1多聚体的表达量都有影响,通过实验我们发现,GLP-1串联体的表达量在26℃,诱导剂IPTG浓度为0.6m M时最高,并且GLP-1多聚体体外表达的最佳诱导时间为8小时。在上述获得的优化条件之下,我们最终确定了该串连体在体外原核表达系统中的最适合拷贝数为4。近期研究表明,小肠也同样具有分泌胰岛素的功能,而且在发育过程中,小肠上皮细胞和胰岛内分泌细胞具有共同的起源,这就暗示我们,处在发育阶段的小肠上皮细胞具有诱导分化成胰岛素分泌细胞的潜能。为了深入研究小肠上皮细胞与胰岛素分泌之间的相关性,本研究第二部分分离了原代培养的大鼠胚胎期小肠上皮细胞。通过对细胞的形态学进行观察,我们发现培养过程中的细胞符合上皮细胞的形态学特征。而且,对培养的细胞进行免疫荧光染色后发现,培养的细胞表达角蛋白8(小肠上皮细胞表达标志物),进一步确定了细胞的来源。基于这些研究,为了方便未来对小肠上皮细胞的改造,我们进一步构建了hr GFP慢病毒载体,并成功感染大鼠小肠上皮细胞。结论:本研究成功地对GLP-1多聚体进行了体外的诱导表达,确定了GLP-1串联体的最佳表达条件以及最适合的拷贝数,为GLP-1多聚体的体内研究打下了坚实的基础。同时,大鼠胚胎期小肠上皮细胞培养体系的建立,为下一阶段的功能学以及作用机制的研究提供了可能。(本文来源于《天津医科大学》期刊2017-05-01）
方艳秋,魏海峰,李丹,米旭光,芦小单[4]（2017）在《CEA迷你基因串联体疫苗免疫小鼠脾细胞对CEA阳性肿瘤细胞的杀伤作用及疫苗的安全性评价》一文中研究指出目的:观察CEA迷你基因串联体疫苗pcD NA-triC EA625-667免疫小鼠脾细胞对肿瘤细胞特异性杀伤作用并对疫苗免疫小鼠后的安全性进行评估。方法:BALB/c小鼠随机分为空白载体组(pcD NA3.0)、单倍体疫苗实验组(pcD NACEA625-667)、串联体疫苗实验组(pcD NA-triC EA625-667),肌肉注射法免疫动物,每隔10 d免疫1次,共免疫4次,记录免疫小鼠的体重变化、存活情况以及检测血清ALT、肌酐水平。以疫苗免疫小鼠的脾细胞为效应细胞,以LDH释放法检测其对CEA阳性的小鼠肝癌细胞株(H22-CEA+)、胃癌细胞株(MFC-CEA+)、结肠癌细胞株(CT26-CEA+)以及CEA阴性小鼠肝癌细胞株(H22-CEA-)的特异性CTL的杀伤活性。结果:两种疫苗对CEA阳性的肝癌、胃癌及结肠癌细胞均具有较强的杀伤活性,与PcDNA3.0空载体组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。而对CEA阴性肿瘤细胞(H22-CEA-)则几乎无影响。迷你串联体基因疫苗pcD NA-triC EA+625-667对肝癌细胞H22-CEA及胃癌细胞MFC-CEA+的杀伤活性强于单倍体基因疫苗pcD NA-CEA625-667(P<0.05)。疫苗免疫对小鼠的存活状态、体重变化及肝肾功能指标均无影响。结论:CEA迷你基因疫苗安全有效,能够诱导肿瘤特异性CTL产生,且叁倍体串联体疫苗免疫效果优于单倍体疫苗。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2017年02期）
方艳秋,魏海峰,李丹,米旭光,刘磊[5]（2017）在《CEA迷你基因串联体疫苗的体内抗肿瘤活性观察》一文中研究指出目的:观察已构建的含有CEA_(625-667)基因单倍体疫苗pc DNA-CEA_(625-667)及叁串联体的DNA疫苗pc DNA-triCEA_(625-667)对荷瘤小鼠体内肿瘤的抑制情况及小鼠存活时间的改变。方法:建立小鼠肝细胞癌实验动物模型,应用单倍体疫苗pc DNA-CEA_(625-667)及叁串联体DNA疫苗pc DNA-tri CEA_(625-667)免疫小鼠,以生理盐水为对照组,观察各实验组小鼠皮下肿瘤生长情况,记录皮下肿瘤生长曲线,观察疫苗对荷瘤小鼠肿瘤生长速度的影响以及疫苗对荷瘤小鼠生存时间的影响。结果:与生理盐水对照组相比,两种疫苗均能明显抑制CEA阳性荷瘤小鼠的肿瘤体积以及生长速度(P<0.01),其中,pc DNA-tri CEA_(625-667)疫苗组的抑制作用明显优于pc DNA-CEA_(625-667)疫苗组(P<0.01),而二者均不能抑制CEA阴性荷瘤小鼠的肿瘤生长。pc DNACEA_(625-667)疫苗组平均生存时间为(48.50±6.73)d,与生理盐水对照组(39.00±6.64)d相比有显着差异(P<0.01);pc DNA-triCEA_(625-667)疫苗组生存时间(48.50±6.73)d明显高于生理盐水对照组和pc DNA-CEA_(625-667)疫苗组(P<0.01)。两组疫苗均不能延长CEA阴性荷瘤小鼠的生存时间。结论:无论是单倍体还是叁串联体的DNA疫苗,均能够明显抑制CEA阳性荷瘤小鼠的肿瘤生长速度(P<0.01)及明显延长其生存时间(P<0.01),而对CEA阴性荷瘤小鼠则无治疗作用。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2017年01期）
刘秀明,李晓璇,王晶晶,杜淑环,姚娜[6]（2016）在《天蚕素B串联体在紫花苜蓿中的表达》一文中研究指出根据植物偏好性密码子进行改造获得了天蚕素B基因,又通过同尾酶连接获得2个和3个天蚕素B基因的串联体,分别构建植物表达载体,并采用农杆菌介导的方法转化紫花苜蓿。对转基因植物进行分子生物学检测,结果表明CB、CB2、CB3叁个基因成功整合到了苜蓿基因组中,转基因植物总蛋白活性检测表明转CB、CB2、CB3基因的蛋白均有一定的抑菌活性,但串联CB3基因的抑菌活性最强。(本文来源于《中国草地学报》期刊2016年06期）
侯丽英[7]（2015）在《β-乳球蛋白抗原表位谱的解析及关键抗原表位串联体的重组表达与鉴定》一文中研究指出目的:血清特异性IgE是诊断食物过敏的重要手段,标准化已知抗原是研制体外特异性IgE诊断试剂的重要前提,制备食物致敏组分的抗原表位重组蛋白是解决抗原标准化的重要措施。本研究以牛奶中最重要的过敏原“β-乳球蛋白”为例,从分析其抗原表位入手,分析重要抗原表位与患者血清sIgE的反应频率,从而筛选出其关键抗原表位并构建关键抗原表位重组体,尝试采用抗原表位重组体替代天然蛋白的可能性。方法:(1)β-乳球蛋白关键抗原表位筛选及其血清异质性分析:首先在NCBI数据库查得牛奶β-乳球蛋白的氨基酸序列(162个氨基酸),用末端重迭的方法合成β-乳球蛋白的多肽,然后用斑点印迹的方法,以20例牛奶过敏患者血清中的特异性IgE作为一抗,观察多肽与牛奶过敏患者的反应频率有无差异及不同个体间所识别的多肽有无差异。(2)β-乳球蛋白关键抗原表位串联重组体的构建及其初步应用研究:将反应频率最高的3个多肽进行串联表达,相邻两个多肽之间用一个甘氨酸做接头,首先用DNAStar生物信息学软件对3个表位的6种组合方式进行预测,选出最佳组合方式;委托上海生工生物有限公司合成关键抗原表位串联体的DNA序列,并与pET-42a(+)质粒载体进行连接,将构建好的质粒转化到BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导剂进行诱导表达,最后利用镍柱纯化出单一组分的关键抗原表位串联体重组蛋白,最后采用western-blot、斑点印迹方法和活性氧传递均相发光免疫测定技术鉴定重组蛋白的免疫学活性。结果:(1)患者血清中sIgE所识别抗原表位的异质性分析:在20例牛奶过敏患者血清的斑点印迹结果中有一部分血清所识别的多肽相同,如1号、5号、6号、11号牛奶过敏患者血清所识别的表位均为1号多肽,有一部分牛奶过敏患者血清所识别的表位均不完全相同。根据多肽反应频率的不同,筛选出β-乳球蛋白最主要表位的氨基酸序列为AA76-95、AA1-20、AA106-125,主要表位的氨基酸序列为AA91-110、AA61-81、AA121-140,次要表位的氨基酸序列为AA 46-65、AA 31-50、AA 151-162。(2)β-乳球蛋白关键抗原表位串联体重组蛋白的表达及鉴定:通过DNAStar软件对理论上6种组合方式进行了分析,得到最佳组合方式,成功构建了大肠杆菌原核表达载体,IPTG诱导表达后,获得大小为36kDa左右的融合蛋白,并纯化得到单一组分的36kDa大小的重组蛋白,并经免疫印迹法、斑点印迹法鉴定其免疫活性,并利用重组蛋白作为检测抗原建立了一种活性氧传递均相发光免疫测定技术来检测血清sIgE。结论:本研究对牛奶主要过敏原β-乳球蛋白的抗原表位进行了解析,不同牛奶过敏患者血清所识别的抗原表位具有异质性。成功表达了β-乳球蛋白关键抗原表位串联体重组蛋白,并鉴定了关键抗原串联体重组蛋白具有良好的免疫学活性,在检测牛奶过敏疾病中有可能代替天然抗原,为新一代诊断试剂的制备奠定基础。(本文来源于《天津医科大学》期刊2015-05-01）
张养军,李佳斌,钱小红[8]（2015）在《一种高酶量酶促~(18)O标记定量肽段串联体蛋白质结合液-质联用的目标蛋白质组绝对定量新方法》一文中研究指出随着高分辨率、高灵敏度和高扫描速度质谱的出现以及超高压毛细管液相色谱、亚2微米填料和超长毛细管色谱柱(大于50 cm长度)的使用,蛋白质组分析的周期从数天缩短到12小时以内,从而使蛋白质组学技术真正进入实际应用阶段[1]。基于蛋白酶切肽段的蛋白质组鉴定(Bottom-up)策略是目前蛋白质组规模化鉴定与定量的常用方法。在其中的酶切过程中,酶与底物质量比范围一般为1:20-1:100,组成复杂蛋白组样品常常需要24小时才能达到完全酶切[2]。这种长的酶切时间限制了蛋白质组的研究周期,不利于蛋白质组学方法的实际应用。如果减少酶切时间,样品没有达(本文来源于《第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第一分册）》期刊2015-04-19）
董林,王艳萍,沈志强,柳增善[9]（2014）在《猪圆环病毒2型多表位串联体诱导表达及其免疫活性》一文中研究指出为了获得体外诱导表达的具有良好免疫原性的PCV2多表位串联体。本试验筛选PCV2主要抗原表位,顺序组成多表位串联体,人工合成其cDNA序列,通过BamHⅠ和SalⅠ定向克隆至原核表达载体pEGX-4T-1多克隆位点,转化BL21感受态细胞,筛选阳性克隆,进行IPTG诱导表达。使用SDS-PAGE对目的基因表达情况进行分析,提取与纯化融合蛋白多肽,Western blot鉴定表达多表位串联蛋白免疫活性。融合蛋白多肽免疫BALB/c小鼠,ELISA测定其抗体,评价其免疫原性。结果显示,成功构建了含7个PCV2抗原表位串联体的表达重组质粒pEGX-4T-1-ep,SDS-PAGE分析显示,融合蛋白多肽在大肠杆菌中获得了有效表达,其分子量约35ku,主要以可溶性形式存在。Western blot结果显示,提取与纯化融合蛋白多肽与PCV2阳性血清具有良好的反应原性。ELISA检测结果显示,纯化的融合蛋白多肽可有效刺激机体产生PCV2特异性抗体,具有良好的免疫原性。结果表明,构建的PCV2多表位串联体表达重组体具有良好的体外表达特性,表达蛋白具有良好的免疫原性。该研究为PCV2表位筛选,功能鉴定及多表位疫苗研究奠定了一定基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2014年11期）
范俊,丁月娣,杨润琳,李文新[10]（2014）在《融合蛋白Somatostatin-HSA不同串联体形式的表达及活性分析》一文中研究指出目的:构建人生长抑素(somatostatin,SST)不同串联体形式与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,比较其在毕氏酵母中的表达情况以及生物活性高低。方法:PCR法扩增获得SST14和SST28的二联体和叁联体基因,酶切连接形成与HSA的融和基因,并克隆到酵母表达载体pPIC9K中,电击转化毕氏酵母GS115进行高效表达。结果:4种融和蛋白在毕氏酵母中表达水平各不相同,其中(SST28)2-HSA的表达量最高,为200mg/L;(SST14)3-HSA的表达量最低,仅50mg/L;(SST14)2-HSA和(SST28)3-HSA产量居中。药效学分析发现与天然SST-14标准品相比,(SST14)2-HSA药效最佳且具有长效性。结论:融合蛋白(SST14)2-HSA有望弥补SST单体自身半衰期过短的不足,打开SST长效药物发展的新篇章。(本文来源于《生物技术》期刊2014年04期）
串联体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
筛选并制备高效结合抗体的重组蛋白G亲和层析介质。以链球菌蛋白G C3区为结构单元,拼接形成3、4、5、6个重复C3片段的串联体,分别克隆至PET21,并在E.coli BL21(DE3)中表达。经Ni~(2+)纯化的重组蛋白分别偶联至Purose 4 Fast Flow制备亲和层析介质,比较介质的吸附情况,发现重组四串体对h IgG的吸附量最高,其静态饱和吸附量为66.79 mg×mL~(-1),动态吸附载量为35 mg×mL~(-1)介质,优于同类型商品介质。利用该介质分离纯化小鼠腹水和人血清中的IgG,纯度在95%左右,回收率不低于80%。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
串联体论文参考文献
[1].周津,王代芳,钟碧萍.串联体结合血糖仪的便携式传感器检测cfDNA[J].生物化工.2019
[2].冯利利,杜夜星,张强,李娇娇,夏海锋.链球菌蛋白G免疫球蛋白结合域C3区串联体的表达、筛选与初步应用[J].高校化学工程学报.2018
[3].林松峰.GLP-1串联体体外表达与大鼠小肠原代上皮细胞的分离培养研究[D].天津医科大学.2017
[4].方艳秋,魏海峰,李丹,米旭光,芦小单.CEA迷你基因串联体疫苗免疫小鼠脾细胞对CEA阳性肿瘤细胞的杀伤作用及疫苗的安全性评价[J].中国免疫学杂志.2017
[5].方艳秋,魏海峰,李丹,米旭光,刘磊.CEA迷你基因串联体疫苗的体内抗肿瘤活性观察[J].中国免疫学杂志.2017
[6].刘秀明,李晓璇,王晶晶,杜淑环,姚娜.天蚕素B串联体在紫花苜蓿中的表达[J].中国草地学报.2016
[7].侯丽英.β-乳球蛋白抗原表位谱的解析及关键抗原表位串联体的重组表达与鉴定[D].天津医科大学.2015
[8].张养军,李佳斌,钱小红.一种高酶量酶促~(18)O标记定量肽段串联体蛋白质结合液-质联用的目标蛋白质组绝对定量新方法[C].第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会论文集（第一分册）.2015
[9].董林,王艳萍,沈志强,柳增善.猪圆环病毒2型多表位串联体诱导表达及其免疫活性[J].中国兽医学报.2014
[10].范俊,丁月娣,杨润琳,李文新.融合蛋白Somatostatin-HSA不同串联体形式的表达及活性分析[J].生物技术.2014
论文知识图
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