导读:本文包含了胞内表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:受体,干细胞,保加利亚,丙酮酸,肽酶,转染,细胞。
胞内表达论文文献综述
吴东,南刚,李佳悦,刘芬玲,崔洪勇[1]（2019）在《人CD147胞内结构域蛋白的表达与纯化》一文中研究指出目的构建人CD147胞内结构域(CD147 intracellular domain,CD147ICD)融合蛋白质粒,表达、提取、纯化CD147ICD蛋白并进行蛋白质互作分析。方法将CD147ICD的c DNA片段插入pET-32a(+)质粒载体后,转化大肠杆菌Origami B(DE3)感受态细胞,大量培养后用异丙基硫代-β-d-半乳糖苷诱导蛋白表达,超声破碎法裂解细胞,采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化TrxA-His_6-CD147ICD融合蛋白,经凝血酶酶切、超滤后获得CD147ICD蛋白。结果 CD147ICD融合蛋白质粒经测序比对后表明构建成功;采用Ni-Sepharose FF预装柱纯化的TrxA-His_6-CD147ICD融合蛋白纯度和浓度均较高,经凝血酶酶切、超滤后获得的CD147ICD蛋白纯度在95%以上,蛋白浓度为0. 74 mg/m L。结论纯化出了高纯度的、具有生物学活性的CD147ICD蛋白,为CD147ICD互作分子的鉴定及结构解析奠定了基础。(本文来源于《转化医学杂志》期刊2019年06期）
姚心韵,高晓敏,邹晓英,岳林[2]（2019）在《胞内转运对根尖牙乳头干细胞表面CXC趋化因子受体4表达的影响》一文中研究指出目的:探讨胞内转运途径受到抑制后,根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)表面CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)表达的变化,为了解SCAP迁移机制提供实验依据。方法:采用免疫荧光共染色方法和原位邻近连接技术(proximity ligation assay,PLA)检测SCAP胞内CXCR4与细胞胞内转运相关细胞器标记蛋白的共定位,检测指标包括早期胞内体标记蛋白Rab5、循环胞内体标记蛋白Rab11A、溶酶体标记蛋白Lamp1。分别采用80μmol/L的内吞抑制剂Blebbistatin、80μmol/L的内吞抑制剂Dyanasore对SCAP进行预处理1 h,流式细胞分析方法检测表面阳性表达CXCR4的SCAP所占百分比,使用单因素方差分析进行统计学分析。结果:免疫荧光共染色结果显示,CXCR4在SCAP胞内的表达位置与早期胞内体标记物Rab5、循环胞内体标记物Rab11A的表达位置重合,小部分与溶酶体标记物Lamp1的表达位置重合。PLA结果显示,CXCR4在SCAP胞内与Rab5、Rab11A、Lamp1均存在共定位。阴性对照组SCAP CXCR4阳性表达的细胞为0. 13%±0. 10%,经Blebbistatin、Dynasore抑制内吞后,表面CXCR4阳性表达的SCAP显着增多,分别为13. 34%±1. 31%、4. 03%±0. 92%,差异有统计学意义(F=161. 762,P <0. 001),且Blebbistatin组多于Dynasore组,差异有统计学意义(P <0. 001)。结论:采用内吞抑制剂抑制CXCR4的胞内转运途径,可使表面表达CXCR4的SCAP增多,提升了SCAP迁移的潜能。(本文来源于《北京大学学报(医学版)》期刊2019年05期）
张建国[3]（2019）在《丙酮酸氧化酶在大肠杆菌中的胞内表达及分泌表达的研究》一文中研究指出丙酮酸氧化酶(POD)是一种十分重要的试剂用酶。来自野生型菌株如绿色气球菌、植物乳杆菌等的丙酮酸氧化酶产量很低,为120 U/L。本论文以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,通过基因工程的手段将绿色气球菌的丙酮酸氧化酶基因在大肠杆菌中进行表达,以提高丙酮酸氧化酶的产量。首先,将POD基因插入到(本文来源于《第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集》期刊2019-08-08）
药欣荣,高巍,张金霞,常明昌,黄晨阳[4]（2019）在《高温胁迫下糙皮侧耳胞内钙离子对热激蛋白基因表达的调控》一文中研究指出以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)菌株CCMSSC00389为材料,研究高温胁迫(40℃、120 min)下钙离子的响应及其对热激蛋白的调控。在高温胁迫条件下,在培养基中添加胞内钙离子螯合剂、胞外钙离子螯合剂、钙调蛋白抑制剂、质膜钙通道抑制剂、叁磷酸肌醇受体拮抗剂,利用钙离子特异性荧光探针检测菌丝体胞内钙离子含量,采用荧光定量PCR检测热激蛋白的基因表达量。结果表明,高温胁迫促进胞内钙离子浓度升高,增加Hsp60、Grp78、Hsp90、Hsp104等4种热激蛋白的基因表达量;培养基中添加钙离子螯合剂或抑制剂会降低胞内钙离子浓度,抑制这些热激蛋白的基因表达。研究结果表明高温胁迫会诱导糙皮侧耳胞内钙离子浓度升高,参与信号转导,从而调控热激蛋白的表达来缓解高温胁迫引起的伤害。(本文来源于《食用菌学报》期刊2019年02期）
仲文[5]（2019）在《靶向CDK4胞内抗体对乳腺癌细胞中NPM1的表达及其活性的影响》一文中研究指出乳腺癌几乎是所有国家女性最常见的癌症,已经成为中国女性中发病率最高的癌症。研究表明,CDK4和Cyclin D1在大约50%的乳腺癌细胞中存在过表达,与乳腺癌的发生发展及预后密切相关,抑制CDK4的活性将有助于乳腺癌的治疗,因此高效特异的靶向CDK4的乳腺癌治疗策略及机制的深入研究具有重要的科学意义。本课题组前期研究中,成功制备了核定位型抗CDK4胞内抗体NLS-AK3,通过体内外研究表明,NLS-AK3能在癌细胞中特异性结合内源的CDK4蛋白,并具有良好的抑瘤效应。通过差异蛋白质组学分析发现,MDA-MB-231叁阴性乳腺癌细胞中抗CDK4胞内抗体NLS-AK3的表达,显着下调NPM1蛋白水平。核仁磷酸蛋白(nucleophosmin,NPM1)是一种多功能蛋白,在多种肿瘤中均存在过度表达,促进癌细胞的增殖和转移。研究发现,NPM1可以直接结合Rb、FOXM1、NF-κB/p65、STAT3、c-myc等Cyclin D1/CDK4直接下游靶点,影响这些蛋白功能及其参与的细胞活动,促进肿瘤细胞的增殖和转移。为了确定核定位型抗CDK4胞内抗体NLS-AK3对叁阴性乳腺癌细胞中NPM1表达及其相互作用因子的影响,本研究开展了Western blot、实时荧光定量PCR、GST pull down、免疫共沉淀等一系列实验分析,取得如下结果:(1)Western blot和Q-PCR结果表明,在MDA-MB-231细胞中胞内抗体NLS-AK3不仅下调NPM1蛋白水平,而且抑制NPM1的m RNA表达。(2)通过Gene MANIA网站预测CDK4与NPM1可能存在相互作用,之后通过间接免疫荧光实验,GST pull downa分析他们之间的联系。间接免疫荧光实验结果表明CDK4与NPM1在叁阴性乳腺癌细胞的细胞核中共定位。利用亲和层析纯化法纯化GST-NPM1和GST蛋白,通过GST-NPM1对MDA-MB-231细胞核蛋白进行GST pull down分析,结果表明,NPM1与MDA-MB-231细胞中CDK4、Rb、磷酸化Rb、NF-κB/p65存在相互作用。(3)Western blot结果表明,MDA-MB-231细胞中NLS-AK3的表达,不影响Rb总蛋白水平,但降低磷酸化Rb水平,下调细胞核内NF-κB/p65水平。免疫共沉淀实验结果表明,在MDA-MB-231细胞核中胞内抗体NLS-AK3抑制NPM1与CDK4、Rb、磷酸化Rb、NF-κB/p65之间的相互作用。(4)通过Q-PCR检测了NLS-AK3对NF-κB/p65下游基因转录的影响。发现胞内抗体NLS-AK3下调E2F、CCNE1、CDK2、Cyclin A、CDC2、PCNA、c-myc,Bcl-2的m RNA水平,上调Bad的m RNA水平。上述研究结果表明,NLS-AK3可能通过抑制NPM1表达,抑制NPM1与CDK4、磷酸化Rb及NF-κB/p65相互作用,抑制叁阴性乳腺癌细胞增殖。本研究为阐释抗CDK4胞内抗体抑制乳腺癌细胞增殖的分子机制提供了实验依据。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-05-01）
廖军义,杜婷婷,黄伟,何通川,徐伟[6]（2019）在《重组腺病毒过表达Notch1受体胞内结合域(NICD1)外源性激活Notch信号通路》一文中研究指出目的:构建Notch1受体胞内结合域(Notch1 intracellular domain,NICD1)的重组腺病毒AdNICD1,探讨外源性过表达AdNICD1对Notch信号通路激活的影响。方法:利用高保真PCR(high fidelity PCR,Hi-Fi PCR)扩增NICD1编码区,并通过Gibson Assembly方法将其克隆至腺病毒载体中,经过菌落PCR、测序鉴定后,在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,再次通过质粒PCR鉴定,然后运用PacⅠ酶切线性化后用重组腺病毒载体转染过表达pTP基因的人胚肾293细胞(human embryo kidney 293 cell line,HEK293)中进行包装,收取病毒后使用过表达pTP基因的HEK293细胞扩增重组腺病毒AdNICD1。运用AdNICD1感染脂肪来源的间充质干细胞(immortalized multipotent adipose-derived mesenchymal stem cells,iMAD),检测病毒感染效率;通过Q-PCR检测NICD1和Notch下游基因表达情况;利用Westernblot检测NICD1在蛋白水平的表达情况。结果:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒并有效感染iMAD;利用AdNICD1可明显增加NICD1在基因和蛋白水平的表达,并激活Notch信号下游基因的表达。结论:成功构建过表达NICD1的重组腺病毒,并有效激活Notch信号通路。(本文来源于《南京医科大学学报(自然科学版)》期刊2019年03期）
李建勋,肖斌,孙朝晖,王露霞,陈丽丹[7]（2019）在《代谢型谷氨酸受体4胞内段的原核表达及纯化》一文中研究指出目的原核表达代谢型谷氨酸受体4胞内段(metabolic glutamate receptor 4 intracellular,GRM4 intracellular,GRM4 intra),并用Ni柱进行纯化。方法采用PAS(PCR-based accurate synthesis)法合成GRM4 intra基因序列,将目的片段和质粒p Czn1双酶切后,经连接,构建重组质粒pCzn1-GRM4 intra;将重组质粒转化至Rosseta菌株,IPTG诱导GRM4 intra蛋白的表达,表达的蛋白利用Ni柱亲和层析法纯化。结果经测序和双酶切鉴定证明质粒pCzn1-GRM4 intra构建正确;在IPTG诱导下,质粒能够在Rosseta菌株中高效表达,表达的蛋白相对分子质量约18 400,主要以可溶性性形式存在,纯度> 90%。结论成功获得了原核表达的GRM4 intra蛋白,为利用体外pull down方法鉴定GRM4的相互作用蛋白提供了参考。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年02期）
赵悦含,姜梦婷,高达,刘飞,杜鹏[8]（2019）在《氮缺乏对保加利亚乳杆菌胞内肽酶基因表达的影响》一文中研究指出试验选取保加利亚乳杆菌作为研究对象,探讨氮缺乏对保加利亚乳杆菌蛋白水解体系中关键蛋白酶基因表达的影响。试验采用qRT-PCR技术分析7株保加利亚乳杆菌中pepC、pepF、pepQ、pepX、pepT胞内关键肽酶基因在氮缺乏培养条件下的基因表达情况。研究结果表明,氮缺乏培养条件下,pepF基因表达量比MRS液体培养条件下显着上调(P<0.05),平均上调3.2倍,而pepX和pepC基因表达水平呈显着下调趋势(P<0.05);氮缺乏培养条件下,菌株LB08006、LB08007和LB08015中pepT和pepQ基因表达量上调,而在菌株LB08012、L08014、LB08016和LB08017中pepT和pepQ基因表达量则是下调的。可见,氮缺乏显着影响保加利亚乳杆菌胞内肽酶基因表达,且在不同菌株间表现出不同的表达量。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2019年01期）
龙晏,邱申彩,李淑慧,舍玉秀,王娜[9]（2019）在《过表达Notch1的胞内段基因对人牙周膜干细胞增殖能力影响》一文中研究指出目的:探讨过表达Notch1的胞内段(Notch1intracellular domain,NICD)基因对人牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)增殖能力的影响。方法:构建含NICD基因过表达的逆转录病毒颗粒,并将其转染至牙周膜干细胞,构建过表达NICD的细胞株PDLSCs/NICD,转染48h后观察细胞一般状态。PDLSCs/NICD为实验组,以PDLSCs/wt为正常细胞组和PDLSCs/vector空病毒转染组作为对照,通过实时定量聚合酶链锁反应(quantitative Real-time-Polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blot检测NICD mRNA及其蛋白的表达;细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞的增殖情况;Transwell实验检测细胞的迁移能力。结果:Western blot和qRT-PCR结果显示,与PDLSCs/wt组和PDLSCs/vector组比较,PDLSCs/NICD组的NICD蛋白表达水平及其mRNA表达水平均明显升高(P<0.05);CCK-8结果提示,与PDLSCs/vector组比较,PDLSCs/NICD组细胞增殖速度加快,Transwell实验结果显示,PDLSCs/NICD组的细胞迁移(40.20±1.74)明显高于PDLSCs/vector组(21.20±1.18)。结论:NICD基因过表达的人PDLSCs在一定程度上增殖及迁移能力加强。(本文来源于《口腔医学研究》期刊2019年01期）
何美伦,徐爱晖[10]（2019）在《晚期糖基化终末产物受体及胞内信号分子在肺腺癌细胞中的表达及功能》一文中研究指出目的探讨在肺腺癌细胞株A549中,晚期糖基化终末产物受体(RAGE)及其胞内信号分子DIAPH1的表达及对细胞迁移及凋亡能力的影响。方法 (1)以肺腺癌细胞株A549及正常人支气管上皮细胞株BEAS-2B为研究对象,利用qRT-PCR、Western blot检测RAGE及DIAPH1在二者中的表达;(2)以10、100μg/ml RAGE配体CML-AGE及1、10、100μg/ml RAGE配体S100B处理A549细胞,划痕实验检测其对细胞迁移能力的影响;(3)以25、50、100μg/ml RAGE配体CML-AGE处理A549细胞,qRT-PCR法检测凋亡相关基因BCL-2和BAX的表达情况。结果 (1) qRT-PCR、Western blot检测结果显示A549细胞中RAGE及DIAPH1表达较BEAS-2B细胞明显下调(P <0. 001);(2) 10、100μg/ml RAGE配体CML-AGE及1、10、100μg/ml RAGE配体S100B处理对A549细胞的迁移能力皆有明显抑制作用,且作用呈浓度依赖性(P <0. 01),差异有统计学意义;(3)以25、50、100μg/ml RAGE配体CML-AGE处理A549细胞后,抗凋亡基因BCL-2表达下调,促凋亡基因BAX表达上调,其作用呈浓度依赖性(P <0. 05),差异有统计学意义。结论 RAGE及DIAPH1在肺腺癌细胞株A549中的表达低于正常人支气管上皮细胞BEAS-2B。RAGE配体在一定程度上可以抑制A549细胞的迁移,促进其凋亡,有望成为肺腺癌治疗新的靶点。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2019年02期）
胞内表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨胞内转运途径受到抑制后,根尖牙乳头干细胞(stem cells from apical papilla,SCAP)表面CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)表达的变化,为了解SCAP迁移机制提供实验依据。方法:采用免疫荧光共染色方法和原位邻近连接技术(proximity ligation assay,PLA)检测SCAP胞内CXCR4与细胞胞内转运相关细胞器标记蛋白的共定位,检测指标包括早期胞内体标记蛋白Rab5、循环胞内体标记蛋白Rab11A、溶酶体标记蛋白Lamp1。分别采用80μmol/L的内吞抑制剂Blebbistatin、80μmol/L的内吞抑制剂Dyanasore对SCAP进行预处理1 h,流式细胞分析方法检测表面阳性表达CXCR4的SCAP所占百分比,使用单因素方差分析进行统计学分析。结果:免疫荧光共染色结果显示,CXCR4在SCAP胞内的表达位置与早期胞内体标记物Rab5、循环胞内体标记物Rab11A的表达位置重合,小部分与溶酶体标记物Lamp1的表达位置重合。PLA结果显示,CXCR4在SCAP胞内与Rab5、Rab11A、Lamp1均存在共定位。阴性对照组SCAP CXCR4阳性表达的细胞为0. 13%±0. 10%,经Blebbistatin、Dynasore抑制内吞后,表面CXCR4阳性表达的SCAP显着增多,分别为13. 34%±1. 31%、4. 03%±0. 92%,差异有统计学意义(F=161. 762,P <0. 001),且Blebbistatin组多于Dynasore组,差异有统计学意义(P <0. 001)。结论:采用内吞抑制剂抑制CXCR4的胞内转运途径,可使表面表达CXCR4的SCAP增多,提升了SCAP迁移的潜能。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胞内表达论文参考文献
[1].吴东,南刚,李佳悦,刘芬玲,崔洪勇.人CD147胞内结构域蛋白的表达与纯化[J].转化医学杂志.2019
[2].姚心韵,高晓敏,邹晓英,岳林.胞内转运对根尖牙乳头干细胞表面CXC趋化因子受体4表达的影响[J].北京大学学报(医学版).2019
[3].张建国.丙酮酸氧化酶在大肠杆菌中的胞内表达及分泌表达的研究[C].第十二届中国酶工程学术研讨会论文摘要集.2019
[4].药欣荣,高巍,张金霞,常明昌,黄晨阳.高温胁迫下糙皮侧耳胞内钙离子对热激蛋白基因表达的调控[J].食用菌学报.2019
[5].仲文.靶向CDK4胞内抗体对乳腺癌细胞中NPM1的表达及其活性的影响[D].吉林大学.2019
[6].廖军义,杜婷婷,黄伟,何通川,徐伟.重组腺病毒过表达Notch1受体胞内结合域(NICD1)外源性激活Notch信号通路[J].南京医科大学学报(自然科学版).2019
[7].李建勋,肖斌,孙朝晖,王露霞,陈丽丹.代谢型谷氨酸受体4胞内段的原核表达及纯化[J].中国生物制品学杂志.2019
[8].赵悦含,姜梦婷,高达,刘飞,杜鹏.氮缺乏对保加利亚乳杆菌胞内肽酶基因表达的影响[J].中国乳品工业.2019
[9].龙晏,邱申彩,李淑慧,舍玉秀,王娜.过表达Notch1的胞内段基因对人牙周膜干细胞增殖能力影响[J].口腔医学研究.2019
[10].何美伦,徐爱晖.晚期糖基化终末产物受体及胞内信号分子在肺腺癌细胞中的表达及功能[J].安徽医科大学学报.2019
论文知识图
