毛花猕猴桃群体性状变异分析

论文摘要

本研究以毛华猕猴桃‘华特’（‘White’）与毛花猕猴桃雄株杂交得到的F-1代群体为实验材料,对杂交群体性别、果实重要经济性状的遗传特点进行统计调查、研究分析。在杂交群体中雄株数量为296,雌株数量为267,雄性植株比雌性植株多出29株,但群体中雌雄性别符合1:1（X2=0.01）;果实相关的五个重要经济性状分布区间分别是:单果重量10.05-64.33g,果实形状指数（纵径/横径）1.16-2.52,可溶性固形物含量10.40%-18.67%,维生素C含量543.39-1 677.12 mg·100 g-1FW和叶绿素含量24.41-196.74μg·g-1 FW;平均值分别为39.55g、1.96、13.64%、1 009.36mg·100 g-11 FW、79.67μg·g-1FW;变异系数分别为23.74%、11.04%、12.71%、22.44%和41.20%。五个性状在杂交群体中都是连续分布的,而且分布特点与正态分布吻合。通过对杂交群体和其他品种开花时间的连续观察和记录,发现毛花猕猴桃比中华猕猴桃开花晚了大约一个月。克隆两者开花途径的关键基因FD和LFY并进行序列比对,发现在毛花和中华猕猴桃中两个基因编码的蛋白质氨基酸序列几乎没有差别。再分析中华和毛花猕猴桃FD与LFY基因的启动子区域,发现在毛花猕猴桃FD基因的启动子缺失一段序列。经过初步试验证明这段序列能被FD下游基因LFY编码的蛋白质结合,在中华猕猴桃中LFY对FD基因启动子结合作用比在毛花猕猴桃中更强烈,在开花途径中起到正反馈作用,从而影响下游基因的表达。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• abstract
• 第一章 文献综述
•   1.1 猕猴桃属概况
•   1.2 猕猴桃产业面临的主要问题
•   1.3 毛花猕猴桃概述
•   1.4 猕猴桃主要经济和农艺性状研究
•     1.4.1 抗氧化物质和维生素C含量
•     1.4.2 果肉颜色和叶绿素含量
•     1.4.3 可溶性固形物含量
•     1.4.4 果实形状与大小
•     1.4.5 性别分化研究
•   1.5 猕猴桃开花相关研究
•   1.6 在群体中研究毛花猕猴桃性状的方法和意义
• 第二章 实验材料与方法
•   2.1 实验材料
•     2.1.1 毛花猕猴桃群体构建
•     2.1.2 实验用菌株和质粒
•     2.1.3 大肠杆菌感受态制备步骤
•     2.1.4 农杆菌感受态的制备步骤
•   2.2 实验中涉及的主要设备和仪器
•   2.3 实验中用到的主要试剂
•     2.3.1 实验常用的酶
•     2.3.2 实验用到的主要试剂
•     2.3.3 实验常用试剂盒
•     2.3.4 常用溶剂和溶液的配方
•   2.4 毛花猕猴桃群体性状研究方法
•     2.4.1 植株雌雄性别
•     2.4.2 果实重量
•     2.4.3 果实形状
•     2.4.4 果实维生素C含量
•     2.4.5 果实叶绿素含量
•     2.4.6 可溶性固形物含量
•     2.4.7 杂交群体遗传倾向型分析
•   2.5 猕猴桃开花时间的观察
•   2.6 LFY植物表达载体构建
•     2.6.1 基因载体构建的基本过程
•     2.6.2 设计LFY基因引物设计方法和基本要求
•     2.6.3 猕猴桃花芽RNA提取
•     2.6.4 RNA反转录为c DNA
•     2.6.5 PCR扩增目的基因
•     2.6.6 连接转化
•     2.6.7 大肠杆菌菌落单克隆阳性鉴定
•     2.6.8 基因测序
•     2.6.9 质粒的提取
•     2.6.10 目的基因和植物表达载体的双酶切与回收
•     2.6.11 目的基因连接植物表达载体并转化大肠杆菌
•     2.6.12 单克隆阳性鉴定
•     2.6.13 农杆菌的转化
•     2.6.14 农杆菌阳性鉴定
•   2.7 构建FDP::GUS载体
•     2.7.1 猕猴桃基因组DNA提取
•     2.7.2 基因载体构建的基本过程
•   2.8 农杆菌烟草瞬时表达过程
•   2.9 烟草叶片GUS染色
•   2.10 亚细胞定位
•   2.11 酵母单杂交
• 第三章 结果与分析
•   3.1 毛花猕猴桃群体重要经济性状研究结果
•     3.1.1 杂交群体性别比例
•     3.1.2 杂交群体5 个主要农艺性状调查结果
•     3.1.3 杂交群体果实重量性状分析
•     3.1.4 杂交群体果实形状性状分析
•     3.1.5 杂交群体果实可溶性固形物含量分析
•     3.1.6 杂交群体果实维生素C含量分析
•     3.1.7 杂交群体果实叶绿素含量分析
•   3.2 猕猴桃开花时期研究结果
•     3.2.1 猕猴桃开花期观察
•     3.2.2 猕猴桃开花时期分析
•   3.3 LFY植物表达载体构建结果
•     3.3.1 猕猴桃RNA获取
•     3.3.2 猕猴桃LFY基因的获取和PCR扩增
•     3.3.3 构建pEASY-Blunt-LFY载体
•     3.3.4 LFY连接以及载体转化
•     3.3.5 提取LFY表达载体并转化到农杆菌中
•     3.3.6 LFY表达植物载体农杆菌阳性鉴定
•   3.4 GUS表达载体获取及验证
•   3.5 构建FDP::GUS载体结果
•     3.5.1 FD启动子序列获取
•     3.5.2 FD启动子序列连接到pEASY-Blunt
•     3.5.3 FDP::GUS酶切鉴定
•     3.5.4 FDP::GUS农杆菌鉴定
•   3.6 农杆菌烟草瞬时表达和烟草叶片GUS染色
•   3.7 AcLFY亚细胞定位
•   3.8 酵母单杂交
• 第四章 结论与讨论
•   4.1 实验结论
•   4.2 讨论与展望
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 刘现稳

导师: 刘永胜

关键词: 毛花猕猴桃,杂交群体,果实性状,开花

来源: 合肥工业大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,生物学,园艺

单位: 合肥工业大学

分类号: S663.4;Q943.2

总页数: 72

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