猴T淋巴细胞趋向性病毒l型RPA和荧光RPA检测方法的建立

论文摘要

目的为了提高口岸对进出境野生及实验用灵长类动物猴T淋巴细胞趋向性病毒l型（Simian T-cell lymphotropic virus type 1, STLV-1）感染情况的监测和流行病学调查,本研究建立了重组酶聚合酶扩增（RPA）和荧光RPA检测STLV-1的方法。方法使用软件分析不同国家和地区分离的STLV-1的gag蛋白（gag polyprotein）基因序列,设计RPA引物和探针,建立RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行验证。结果通过将猴其它特定病原体与STLV-1对比检测,证实建立的检测方法具有良好的特异性;通过敏感性试验,证实建立的RPA和荧光RPA方法检测下限与PCR一致;通过对30份STLV-1阳性和阴性核酸样本的检测,证实建立的RPA和荧光RPA方法,具有PCR方法一样的稳定性和可靠性。结论本研究建立的RPA和荧光RPA检测STLV-1的方法具有良好的特异性、敏感性和可靠性,可应用于STLV-1的监测和流行病学调查。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 主要试剂
•   1.2 病毒样品来源及处理
•   1.3 RNA抽提及cDNA模板制备
•   1.4 RT-PCR检测
•   1.5 RPA引物和探针
•   1.6 RPA检测
•   1.7 荧光RPA检测
• 2 结果
•   2.1 RPA和荧光RPA检测STLV-1的特异性试验
•   2.2 RPA和荧光RPA检测STLV-1的敏感性试验
•   2.3 RPA和荧光RPA检测STVL-1的可靠性试验
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 熊炜,林颖峥,魏晓锋,陈鸿军,张强,王艳,李健

关键词: 猴淋巴细胞趋向性病毒型,技术,荧光

来源: 实验动物科学 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 上海出入境检验检疫局,上海实验动物研究中心,中国农业科学院上海兽医研究所

基金: 上海市科委实验动物研究专项(No.17140900300)

分类号: Q95-33

页码: 33-37

总页数: 5

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