H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

论文摘要

为建立一种快速准确检测H9亚型禽流感病毒基因的检测方法,根据GenBank中H9亚型禽流感病毒血凝素编码基因进行荧光检测引物和探针设计,建立了一种针对H9亚型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测方法。利用该方法进行灵敏度和特异性检测,并用本方法和国家标准中的荧光RT-PCR检测方法,同时对临床样本进行检测。结果显示,仅H9亚型禽流感病毒出现了正常荧光检测曲线,而其他病毒及阴性对照均未出现;检测灵敏度为RNA终浓度10-4ng/μL(1.30×104copies/μL);临床样本检测结果与国标方法一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高,可用于H9亚型禽流感病毒检测。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试剂与仪器
  •   1.2 毒株与核酸提取
  •   1.3 引物与探针筛选
  •   1.4 反应体系与条件
  •   1.5 特异性与灵敏度评估
  •   1.6 临床样品检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 引物与探针筛选
  •   2.2 特异性与灵敏度
  •   2.3 临床样品检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王楷宬,王素春,樊擎莹,孙亚伟,康京丽,汪洋,刘华雷,黄保续

    关键词: 亚型禽流感病毒,实时荧光检测,方法建立,应用

    来源: 中国动物检疫 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国动物卫生与流行病学中心,河南科技大学动物科技学院

    基金: 国家重点研发计划项目(2017YFC1200503)

    分类号: S852.65

    页码: 52-57

    总页数: 6

    文件大小: 1257K

    下载量: 226

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    H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用
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