miR-145靶向FSCN1的鉴定研究

miR-145靶向FSCN1的鉴定研究

论文摘要

miRNA是参与机体许多生理功能调控的重要因素之一。本研究以miR-145为研究对象,旨在通过三个靶基因预测软件(miRanda、PicTar及TargetScan)进行miR-145的靶基因的预测,以此来得到miR-145可能靶向FSCN1基因的结论。通过实时荧光定量PCR、蛋白质免疫印迹检测和双荧光素酶报告试验多重验证筛选miR-145靶基因。研究发现:在细胞水平中,miR-145的过表达会导致FSCN1的m RNA显著下调,当miR-145被抑制表达的时候,会导致FSCN1的mRNA水平显著上调。此外,荧光素酶报告试验显示,FSCN1基因的3′UTR存在着miR-145的靶向结合位点,其在miR-145的作用下可显著下调FSCN1活性。研究结果将明晰miR-145通过FSCN1来发挥生物学功能,为探索人类及动物调控机理提供了可靠的参考价值。

论文目录

  • 一、材料和方法
  •   (一)材料
  •   (二)miR-145的mimics和inhibi-tor转染293-T细胞
  •   (三)荧光定量PCR检测表达量
  •   (四)miR-145靶向FSCN1的双荧光素酶报告基因验证
  • 二、结果与分析
  •   (一)过表达及干扰miR-145表达量的效果
  •   (二)荧光定量PCR结果表明miR-145对FSCN1的表达具有干扰作用
  •   (三)双荧光素酶报告载体活性检测结果
  • 三、讨论
  • 四、小结
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 袁媛,陈志

    关键词: 靶基因鉴定,荧光素酶报告试验

    来源: 河南农业 2019年21期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 扬州大学

    基金: 国家自然科学青年基金项目,项目编号:31802035,中国博士后科学基金资助项目,项目编号:2017M621841

    分类号: Q78

    DOI: 10.15904/j.cnki.hnny.2019.21.025

    页码: 60-61+64

    总页数: 3

    文件大小: 1298K

    下载量: 36

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