导读:本文包含了己糖激酶基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:枸杞,己糖激酶基因,克隆,表达
己糖激酶基因论文文献综述
李浩霞,杨斌,尹跃,安巍,王亚军[1]（2019）在《枸杞己糖激酶基因LbHXK的克隆及表达分析》一文中研究指出该研究以宁夏枸杞‘宁杞1号’果实为材料,利用RT-PCR技术,分离出枸杞己糖激酶基因LbHXK的全长序列(1 494 bp),该基因包含完整开放阅读框ORF,编码498个氨基酸,蛋白质分子量为53.88 kD,理论等电点5.96;LbHXK基因编码的蛋白具有己糖激酶家族显着的特征,包含一个己糖激酶小亚基(Gly91～Val228)和一个大亚基结构(Asn229～Asp476),该蛋白叁级结构为V型,并且存在一个葡萄糖结合结构域;LbHXK与茄科烟草的同源性最高为93.36%。实时荧光定量分析发现,LbHXK基因在不同组织均有表达,叶中最高,茎中次之,根中最低,且组织间差异不显着;随着果实发育LbHXK基因表达量呈先升后降的变化趋势,并在色变期(开花后约22 d)达到最高,随后到果实成熟期降至最低,且果实发育前中期显着高于后期。该研究结果为进一步探讨枸杞LbHXK基因的功能奠定了基础。(本文来源于《西北植物学报》期刊2019年06期）
陈红丽,彭祥然,李孝良,Bismark,Kyei,尚瑞沙[2]（2018）在《家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达》一文中研究指出己糖激酶(hexokinase,HXK)是糖酵解途径的限速酶,在能量代谢中充当极其重要的角色。家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)具有完整的糖酵解途径,其基因组中有2个序列相似度较高的己糖激酶编码基因拷贝(NBO_1320g0001,NBO_27g0008)。根据其中的一个基因拷贝(NBO_27g0008)序列设计特异性引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板成功克隆了该基因,命名为Nb HXK-1。该基因大小为894 bp,包含完整的ORF,编码297个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为34.241 k D,等电点(p I)为5.26,蛋白质的氨基酸序列有31个磷酸化位点和4个潜在的N-糖基化位点,无跨膜结构域,有信号肽,二级结构主要由α螺旋(54.55%)、延伸片段(17.80%)和无规则卷曲(27.61%)组成。系统进化分析显示Nb HXK-1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)己糖激酶(Nc HXK)氨基酸序列的亲缘关系较近。将Nb HXK-1基因插入原核表达载体p ET-28a(+)并转化BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达后经蛋白质串联质谱鉴定和Western blot分析显示,获得了与预期大小一致的约35 k D的重组Nb HXK-1蛋白,为进一步阐明Nb HXK-1的生物学功能奠定了基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2018年01期）
张凯,高珊,朱树华[3]（2017）在《肥城桃果实己糖激酶Ⅱ基因克隆、生物信息学分析及原核表达》一文中研究指出为了深入研究己糖激酶(HK)的同工酶HKⅡ调控线粒体通透性转换孔(MPTP)的开放机理,通过RT-PCR技术和RACE技术,以克隆得到的肥城桃果实c DNA为模板,成功克隆得到HKⅡ基因全长,经原核表达和SDS-PAGE检测,体外构建原核表达载体pET-30a-HKⅡ,成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达;使用镍柱纯化法,得到纯化的重组蛋白。克隆得到HKⅡ基因共1 835 bp,其中编码区1 496 bp,共编码497个氨基酸。HKⅡ蛋白预测分子式为C2379H3846N652O717S17,原子总数为7 611个,分子量为53.6 kDa,理论等电点为6.17,总平均疏水指数为0.023,表明HKⅡ蛋白为疏水性蛋白。TMHMM跨膜结构预测HKⅡ为跨膜蛋白,有1次跨膜,绝大部分在膜外。从二级结构预测结果来看,HKⅡ蛋白由15段α螺旋和11段β折叠和无规则卷曲构成。肥城桃HKⅡ蛋白预测的叁级结构呈V字型,折迭结构较多。系统进化树和氨基酸相似性分析发现,桃果实HKⅡ与枇杷的相似度最高,达到了96.98%,桃果实HKⅡ与其他植物HK的氨基酸的同源性较高,说明HKⅡ具有较高的保守性。为进一步解析HKⅡ蛋白的结构和功能从而探讨HKⅡ调控线粒体MPTP的机理奠定了基础。(本文来源于《华北农学报》期刊2017年06期）
汝玉涛,王勇,王德意,周敬林,曾军[4]（2017）在《柞蚕己糖激酶基因的组织表达特征及在解除滞育和蛹发育期的表达与酶活性变化》一文中研究指出昆虫能够将消化吸收的葡萄糖在脂肪体中转化为海藻糖或作为糖原储存,当机体需要能量时,海藻糖再转化为葡萄糖进入糖酵解途径,己糖激酶(hexokinase,HK)是在此转化过程合成中间代谢物葡萄糖-6-磷酸的限速酶。为研究柞蚕蛹解除滞育及发育过程中的糖类代谢规律,克隆了柞蚕2个己糖激酶同工酶基因,分别命名为Ap HK1和Ap HK2(Gen Bank登录号:KY624592,KY624593)。2个基因的ORF全长分别为1 455 bp、1 362 bp,编码484、453个氨基酸。系统进化分析柞蚕HK1和HK2蛋白分布于2个不同的进化分支,不同种类昆虫的同一类型HK具有更高的同源性。柞蚕5龄幼虫各组织中,2个HK基因在脂肪体中的表达水平都较高,Ap HK2在各组织中均有表达,分布比Ap HK1更广,且在中肠、肌肉内也有较高表达。以一化性柞蚕滞育蛹的脂肪体组织为材料,采用qRT-PCR分析长光照(17 h/d)处理解除柞蚕蛹滞育及蛹发育过程中HK基因的表达规律,结果表明:2个HK基因的表达量在处理后21 d明显升高,其中Ap HK2的表达量升高了3.1倍;化蛹后42 d,Ap HK1的表达量升高了2.8倍,而Ap HK2的表达量无显着变化。同时测定蛹脂肪体中己糖激酶的活性在长光照处理下高于对照组,前期呈现上升趋势,处理后28 d达到最高值,此后逐渐下降并于处理后35 d趋于稳定;测定蛹血淋巴中葡萄糖含量呈先下降后上升的趋势,这与脂肪体中己糖激酶的活性具有相关性。研究结果显示柞蚕滞育蛹解除滞育及发育过程中己糖激酶基因表达上调,在蛹发育中期己糖激酶酶活力及葡萄糖含量之间呈现出互补关系,即己糖激酶的活性增强,血淋巴中葡萄糖的含量减少。(本文来源于《蚕业科学》期刊2017年05期）
王倩,赵星,刘龙,耿拓宇,龚道清[5]（2017）在《己糖激酶2基因在鹅肥肝形成过程中的表达研究》一文中研究指出为探讨己糖激酶2(HK2)基因与鹅脂肪肝形成的关系,选取30只朗德鹅为研究对象,将其分为填饲组(15只)和对照组(15只),填饲组分填饲7、14和19d3个阶段。采用实时荧光定量PCR技术测定朗德鹅填饲不同阶段HK2在肝脏、胸肌和腹脂中的表达水平,并用葡萄糖、脂肪酸和胰岛素分别处理鹅原代肝细胞,观察这些因子对HK2基因表达的影响。结果表明:各阶段填饲组肝脏中HK2基因的表达量显着高于对照组,胸肌和腹脂则呈下调趋势。此外,在培养的鹅原代肝细胞中,葡萄糖、不饱和脂肪酸(油酸和亚油酸)能使HK2基因表达量显着下调,而胰岛素能显着上调HK2基因表达。HK2基因表达与鹅肥肝形成密切相关,为深入研究HK2基因在鹅肥肝形成过程中的作用奠定了基础。(本文来源于《扬州大学学报(农业与生命科学版)》期刊2017年03期）
陈军,崔红利,赵佳琳,秦松[6]（2017）在《凯氏拟小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培养条件下的表达分析》一文中研究指出为研究凯氏拟小球藻(Parachlorellakessleri)糖代谢分子机制,本研究采用RT-PCR和RACE技术从凯氏拟小球藻中克隆了己糖激酶基因CkeHK(GenBankID:AHF54566),并对其自养、异养、混养条件下的转录表达进行分析。结果表明,该序列的cDNA全长为1844bp,开放阅读框1389bp,编码462个氨基酸。该蛋白的相对分子质量为49.73,等电点为6.98。实时荧光定量PCR结果显示,以自养培养条件为对照,异养培养和混养培养条件下,CkeHK均能够发生明显上调,且混养条件下上调量比异养条件下上调量更多,说明CkeHK可能在凯氏拟小球藻利用外源糖的过程发挥重要作用,并且光信号对于凯氏拟小球藻利用外源糖可能存在调控作用。这些研究结果为进一步阐明CkeHK的功能及其作用机制奠定了分子基础。(本文来源于《海洋科学》期刊2017年07期）
吴敏怡,李霞,何亚飞,张琛,严婷[7]（2017）在《脱落酸和己糖激酶抑制剂对高表达C_4-PEPC转基因稻苗耐旱性的影响》一文中研究指出为了研究高表达转玉米C_4-磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC)基因水稻(PC)的耐旱性机制,本研究以PC和未转基因野生型原种kitaake为材料,分别在光照和黑暗预处理24 h,其中光照处理中光强为600μmol·m~(-2)·s-1,预处理后稻苗再在15%聚乙二醇-6000模拟干旱胁迫下,同时使用药理学的方法,通过加入脱落酸和己糖激酶的专一性抑制剂100μmol·L~(-1)去甲二氢愈创木酸和10 mmol·L~(-1)葡萄糖胺,观察两种水稻4~5叶期稻苗耐旱表现。结果发现,与WT水稻相比,在PEG-6000处理后,经过光预处理的PC水稻叶片相对含水量下降较少,始终比WT的高,而且丙二醛含量则较少,脯氨酸诱导增加,表现耐旱;而经过暗预处理后PC植株显着降低这个优势,表明光预处理有利于PC耐旱性的表现;黑暗预处理均显着下调了2供试材料植株叶片中可溶性糖的含量,而对可溶性蛋白的含量影响不显着;而光预处理后PC水稻叶片内可溶性糖含量比WT增加,而在黑暗预处理则PC的显着低于WT的,其中葡萄糖胺对光预处理下PC的可溶性糖含量的下调作用最显着;暗预处理逆转或消除了NO,H_2O_2和钙离子含量变化趋势,这些变化与暗预处理减少了两材料叶片蔗糖和葡萄糖含量变化同步;光暗预处理对两材料的PEPC酶活性的差异影响不大,表明外源玉米C4-PEPC在水稻中是组成型表达。可见PC叶片可部分通过糖组分,参与内源糖介导ABA和HXK信号途径,缓解干旱处理对叶片的伤害,稳定光合能力。(本文来源于《植物研究》期刊2017年03期）
许壁榆,邵霞,张义炜,蔡佳翌,陈芳源[8]（2017）在《shRNA干扰己糖激酶Ⅱ基因表达对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响》一文中研究指出目的 :观察shR NA干扰己糖激酶(hexokinase,HK)Ⅱ基因表达对人淋巴瘤Raji和SU-DHL-4细胞代谢、增殖、凋亡及耐药的影响,初步评价HKⅡ基因靶向治疗在淋巴瘤中的潜在应用前景。方法 :构建慢病毒介导的shRNA靶向干扰HKⅡ基因表达的淋巴瘤细胞株Raji和SU-DHL-4(HKⅡshRNA转染组),同时设置阴性shRNA转染对照组。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法分别检测细胞中HKⅡmRNA和蛋白的表达水平。锥虫蓝拒染法检测细胞存活数并绘制生长曲线;CCK-8法检测多柔比星(doxorubicin,DOX)对淋巴瘤细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)。FCM法分析细胞周期分布及细胞凋亡。蛋白质印迹法检测细胞中凋亡相关蛋白caspase-3及其剪切体、Bcl-2和Bcl-6的表达;分别应用乳酸和葡萄糖检测试剂盒检测细胞培养上清液中乳酸和葡萄糖的浓度。结果 :与空质粒转染对照组细胞相比,HKⅡshRNA转染组细胞中HKⅡmRNA及蛋白的表达水平均明显降低(P值均<0.05)。shRNA干扰HKⅡ基因表达能抑制2种淋巴瘤细胞的增殖活性(P值均<0.01),并使细胞周期阻滞在G0/G1期(P值均<0.05),同时促进细胞凋亡(P值均<0.01)。与对照组细胞相比,HKⅡ基因沉默可降低DOX对2种淋巴瘤细胞的IC50值(P值均<0.05),抑制细胞中葡萄糖消耗(P值均<0.05),减少乳酸生成(P值均<0.01)。与对照组细胞相比,HKⅡshRNA转染后2种淋巴瘤细胞中Bcl-2蛋白的表达水平明显降低(P值均<0.05),而caspase-3剪切体表达水平明显升高(P值均<0.05);加入DOX作用后,2种淋巴瘤细胞的Bcl-2表达水平无明显差异(P值均>0.05),但HKⅡshRNA转染组细胞中caspase-3前体蛋白表达水平明显降低(P值均<0.01),而caspase-3剪切体表达水平升高更加明显(P值均<0.05)。结论 :shRNA干扰HKⅡ基因表达可抑制淋巴瘤细胞增殖,促进细胞凋亡,纠正细胞糖酵解代谢表型,提高细胞对化疗药物DOX的敏感性。提示HKⅡ基因可能是治疗复发或耐药侵袭性淋巴瘤的潜在靶点。(本文来源于《肿瘤》期刊2017年04期）
张丹,徐慧琴,汪会,余文静,薛杨央[9]（2017）在《siRNA沉默己糖激酶-2基因对MDA-MB231细胞放疗敏感性的影响》一文中研究指出目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默己糖激酶-2(HK2)对乳腺癌细胞MDA-MB231放疗敏感性的影响。方法实验分为3组:空白(Control)组、阴性对照(Negative)组和转染HK2 siRNA的实验(siRNA-HK2)组。将HK2 siRNA瞬时转染于MDA-MB231细胞,用Western blot和qRT-PCR分别检测转染前后HK2蛋白和mRNA表达;CCK-8实验观察不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X线照射下叁组细胞增殖情况;流式细胞仪检测叁组细胞在4 Gy照射下细胞凋亡率,观察siRNA干扰HK2对乳腺癌细胞MDA-MB231放疗敏感性的影响。结果 siRNA-HK2组HK2的蛋白和mRNA表达量均降低。叁组细胞分别给予不同剂量的X线照射后,细胞存活率呈剂量依赖性递减的趋势,且siRNA-HK2组的存活率较Control组和Negative组明显下降(P<0.05)。照射后,siRNA-HK2组细胞凋亡率明显高于Control组和Negative组(P<0.01)。结论沉默乳腺癌细胞HK2基因可增加其对放疗的敏感性。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2017年01期）
苏豫,陈依军,车永胜,刘钢[10]（2017）在《顶头孢霉中己糖激酶编码基因Achka的功能研究》一文中研究指出己糖激酶在真菌中广泛存在,参与葡萄糖磷酸化等生理过程。本文从头孢菌素产生菌顶头孢霉中克隆并鉴定了一个己糖激酶编码基因,命名为Achka。通过RT‐PCR证明Achka含有4个内含子,其推测的编码蛋白含有484个氨基酸,分子量为53.7k Da。在顶头孢霉中敲除Achka后发现,突变株在以果糖、蔗糖或甘露糖为唯一碳源的培养基上生长受到严重限制。我们在大肠杆菌中异源表达了Achka,并对表达的重组蛋白AcHKA进行了分离纯化。酶学动力学分析表明,AcHKA对果糖的最大反应速率要大于葡萄糖,但是却对葡萄糖有更高的亲和力。上述结果进一步证明AcHKA为己糖激酶,在顶头孢霉体内主要负责果糖、蔗糖和甘露糖等的代谢。(本文来源于《菌物学报》期刊2017年03期）
己糖激酶基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
己糖激酶(hexokinase,HXK)是糖酵解途径的限速酶,在能量代谢中充当极其重要的角色。家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)具有完整的糖酵解途径,其基因组中有2个序列相似度较高的己糖激酶编码基因拷贝(NBO_1320g0001,NBO_27g0008)。根据其中的一个基因拷贝(NBO_27g0008)序列设计特异性引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板成功克隆了该基因,命名为Nb HXK-1。该基因大小为894 bp,包含完整的ORF,编码297个氨基酸,预测蛋白质的分子质量为34.241 k D,等电点(p I)为5.26,蛋白质的氨基酸序列有31个磷酸化位点和4个潜在的N-糖基化位点,无跨膜结构域,有信号肽,二级结构主要由α螺旋(54.55%)、延伸片段(17.80%)和无规则卷曲(27.61%)组成。系统进化分析显示Nb HXK-1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)己糖激酶(Nc HXK)氨基酸序列的亲缘关系较近。将Nb HXK-1基因插入原核表达载体p ET-28a(+)并转化BL21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达后经蛋白质串联质谱鉴定和Western blot分析显示,获得了与预期大小一致的约35 k D的重组Nb HXK-1蛋白,为进一步阐明Nb HXK-1的生物学功能奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
己糖激酶基因论文参考文献
[1].李浩霞,杨斌,尹跃,安巍,王亚军.枸杞己糖激酶基因LbHXK的克隆及表达分析[J].西北植物学报.2019
[2].陈红丽,彭祥然,李孝良,Bismark,Kyei,尚瑞沙.家蚕微孢子虫己糖激酶基因的克隆及序列结构分析和原核表达[J].蚕业科学.2018
[3].张凯,高珊,朱树华.肥城桃果实己糖激酶Ⅱ基因克隆、生物信息学分析及原核表达[J].华北农学报.2017
[4].汝玉涛,王勇,王德意,周敬林,曾军.柞蚕己糖激酶基因的组织表达特征及在解除滞育和蛹发育期的表达与酶活性变化[J].蚕业科学.2017
[5].王倩,赵星,刘龙,耿拓宇,龚道清.己糖激酶2基因在鹅肥肝形成过程中的表达研究[J].扬州大学学报(农业与生命科学版).2017
[6].陈军,崔红利,赵佳琳,秦松.凯氏拟小球藻己糖激酶基因的克隆及其在不同培养条件下的表达分析[J].海洋科学.2017
[7].吴敏怡,李霞,何亚飞,张琛,严婷.脱落酸和己糖激酶抑制剂对高表达C_4-PEPC转基因稻苗耐旱性的影响[J].植物研究.2017
[8].许壁榆,邵霞,张义炜,蔡佳翌,陈芳源.shRNA干扰己糖激酶Ⅱ基因表达对人淋巴瘤细胞恶性生物学行为的影响[J].肿瘤.2017
[9].张丹,徐慧琴,汪会,余文静,薛杨央.siRNA沉默己糖激酶-2基因对MDA-MB231细胞放疗敏感性的影响[J].安徽医科大学学报.2017
[10].苏豫,陈依军,车永胜,刘钢.顶头孢霉中己糖激酶编码基因Achka的功能研究[J].菌物学报.2017