叶绿体小分子热激蛋白论文_杨传燕,王翠,张景霞,王佳颖,王丽

导读:本文包含了叶绿体小分子热激蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:叶绿体,蛋白,分子,耐寒,转基因,番茄,耐热性。

叶绿体小分子热激蛋白论文文献综述

杨传燕,王翠,张景霞,王佳颖,王丽[1](2008)在《过表达番茄叶绿体小分子热激蛋白提高植株的耐热性》一文中研究指出小分子热激蛋白是植物受到热胁迫后的主要表达产物之一,与植物细胞耐热有密切关系.我们将由CaMV35S启动子驱动的叶绿体小分子热激蛋白cDNA导入番茄,Northern及Western印迹分析表明,叶绿体小分子热激蛋白在转基因番茄中呈现组成型表达,通过测定转基因番茄和未转基因番茄的耐热性,发现转基因株系基础耐热性强于对照,说明叶绿体小分子热激蛋白的过量表达提高了植株的基础耐热性.(本文来源于《山东师范大学学报(自然科学版)》期刊2008年04期)

胡小然,张文彦[2](2007)在《番茄叶绿体小分子热激蛋白多克隆抗体的制备》一文中研究指出目的为深入研究叶绿体sHSP的功能,构建有效的原核表达体系,制备高特异性的叶绿体sHSP的多克隆抗体。方法将PCR方法得到的番茄叶绿体小分子热激蛋白基因(cpshsp)全长cDNA基因片段,克隆入融合表达载体pGEX6p-1中,在强启动子作用下在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达,并将sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔,western blot检测sHSP多克隆抗体。结果表达菌株经0.2 mmol/L IPTG诱导4h后,GST-CPsHSP形成包涵体,sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔后得到叶绿体sHSP多克隆抗体,western blot检测表明该抗体的特异性和效价较好。结论构建的原核表达载体pGEX6p-1/cpshsp,在一定的诱导条件下,在DE3中得到稳定高效的融合表达,为制备叶绿体sHSP抗体提供足够的抗原,为进一步研究叶绿体sHSP的功能奠定了基础。(本文来源于《泰山医学院学报》期刊2007年01期)

王丽,赵春梅,王义菊,刘箭[3](2005)在《过量表达叶绿体小分子热激蛋白提高番茄的抗寒性(英文)》一文中研究指出小分子热激蛋白与植物耐寒性提高有相关性,但是没有直接的实验证据能证明小分子热激蛋白的存在增加植物抗寒性。我们克隆了番茄叶绿体(定位)小分子热激蛋白cDNA,并将35SCaMV启动子驱动的番茄叶绿体小分子热激蛋白cDNA植物表达构架导入番茄,测定转基因番茄和未转基因番茄的抗寒性水平。低温处理后,转基因番茄的冷害症状轻于未转基因的番茄;转基因番茄细胞电解质外渗较少、花青素和MDA累积量较低;净光合速率和叶绿体含量高于对照。这些实验结果说明叶绿体小分子热激蛋白的过量表达提高了植物抗寒性。(本文来源于《植物生理与分子生物学学报》期刊2005年02期)

王丽[4](2003)在《叶绿体小分子热激蛋白导入番茄的研究》一文中研究指出叶绿体是植物特有的细胞器,与植物的光合作用、生长发育密切相关。叶绿体小分子热激蛋白是叶绿体的主要热胁迫产物,离体叶绿体的研究表明叶绿体sHSP与叶绿体类囊体膜的热激应答有关。当诱导产生叶绿体sHSP时,其表达量的增加与PSⅡ(PhotosystcmⅡ)耐热性的增强以及整株植物耐热性的增强密切相关。另外,叶绿体是有害的活性氧产生的活跃部位,在氧化胁迫条件下,叶绿体sHSP对细胞起到重要的保护作用。而这个保护作用与叶绿体sHSP的甲硫氨酸富含区有关。 近几年的研究发现热激蛋白特别是小分子热激蛋白,除可以提高细胞的抗热能力外,还和细胞的耐寒性有关。已有实验证明线粒体sHSP、内质网sHSP、细胞质sHSP与细胞的耐寒性有关,而叶绿体sHSP是否也与植物的耐寒性有关还不清楚。 本实验采用PCR方法从番茄花cDNA文库中克隆到叶绿体sHSP基因,经测序证实与Genbank中已发表的序列在编码区相差2个碱基,其中一个碱基导致1个氨基酸的改变。将叶绿体sHSP基因定向克隆于带有组成性表达启动子CaMV35S的植物表达载体pROKⅡ中,冻融法转化农杆菌LBA4404,利用叶圆盘法对番茄进行Ti质粒介导的遗传转化。提取转基因番茄基因组DNA,分别以NPTⅡ和35S/CP引物对其进行PCR分析,结果表明叶绿体sHSP基因已整合进番茄基因组中;对转基因番茄进行低温处理(冬季,自然条件下(无加热的温室),白天最高温度15℃,夜间最低温度5℃),生长6周后,检测转基因番茄的系列生理指标,主要结果如下: 1) 生长势:测量转基因番茄与对照(未转基因番茄)的株高,结果显示转基因植株生长明显快于对照,且从外观上看到对照叶片发红程度远大于转基因植株,随着低温时间延长,对比更加明显,说明叶绿体sHSP的组成性表达在低温下对番茄具有一定的保护作用。 2) 丙二醛含量:丙二醛是膜脂过氧化的产物,它在植物体内含量的高低能够在一定程度上反映植物受伤害的程度,实验结果表明转基因植株体内丙二醛的含量明显低于对照,说明转基因番茄在低温胁迫下有毒物质积累的少,膜脂过氧化程度轻,耐寒性强。 3) 叶绿素含量的测定:chla是植物进行光合作用的重要色素,少数chla为光合作用中心色 叶绿体小分子热激蛋臼基因导入番茄的研究素;cib作为捕光色素参与光合作用。低温处理6周后,转基因苗叶片中chla,cib含量及叶绿素总量明显高于对照,反应叶绿体中类囊体垛迭程度的chla/the比值也大于对照,可见冷害条件下转基因植株体内叶绿素的破坏程度小。4))t%hs用:低温Al:Pll6周,测定植物光合作用的重要指标净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间隙CQZ鹏,结果显示赂因番茄的即雏率、蒸腾速率、气孔导度均明显高于对照,而胞间隙COZ 氏于对照。说明转基因番茄的光合效率比未转基因植株的高。 以上生理指标的测定结果表明,叶绿体sSP基因的导人提高了番茄的耐寒性。(本文来源于《山东师范大学》期刊2003-04-28)

叶绿体小分子热激蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的为深入研究叶绿体sHSP的功能,构建有效的原核表达体系,制备高特异性的叶绿体sHSP的多克隆抗体。方法将PCR方法得到的番茄叶绿体小分子热激蛋白基因(cpshsp)全长cDNA基因片段,克隆入融合表达载体pGEX6p-1中,在强启动子作用下在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中诱导表达,并将sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔,western blot检测sHSP多克隆抗体。结果表达菌株经0.2 mmol/L IPTG诱导4h后,GST-CPsHSP形成包涵体,sHSP纯化产物免疫新西兰大白兔后得到叶绿体sHSP多克隆抗体,western blot检测表明该抗体的特异性和效价较好。结论构建的原核表达载体pGEX6p-1/cpshsp,在一定的诱导条件下,在DE3中得到稳定高效的融合表达,为制备叶绿体sHSP抗体提供足够的抗原,为进一步研究叶绿体sHSP的功能奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

叶绿体小分子热激蛋白论文参考文献

[1].杨传燕,王翠,张景霞,王佳颖,王丽.过表达番茄叶绿体小分子热激蛋白提高植株的耐热性[J].山东师范大学学报(自然科学版).2008

[2].胡小然,张文彦.番茄叶绿体小分子热激蛋白多克隆抗体的制备[J].泰山医学院学报.2007

[3].王丽,赵春梅,王义菊,刘箭.过量表达叶绿体小分子热激蛋白提高番茄的抗寒性(英文)[J].植物生理与分子生物学学报.2005

[4].王丽.叶绿体小分子热激蛋白导入番茄的研究[D].山东师范大学.2003

论文知识图

了蕊温处理9周的转基因番茄及对照6 作图亲本与作图群体中部分单株 LMWHS...黄化苗抗胜苗生根番茄CP sHSP蛋白表达的Western检测纯化的GST-CP sHSP融合蛋白及CP sHSP...

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