导读:本文包含了丝胶基因启动子论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:Bombyx,mori,sericin,1,promoter,regulatory,element,correlation,analysis
丝胶基因启动子论文文献综述
叶露鹏,钱秋杰,张玉玉,尤征英,车佳倩[1]（2014）在《家蚕丝腺生物反应器中丝胶蛋白1启动子的分析和外源基因表达效率的辅助检测(英文)》一文中研究指出Promoter is one of the most important regulatory elements in regulating target genes spatiotemporal expression. However,the majority of studies are focus on core or proximal promoter regions, so that the information far away from 5'-fianking region of proximal promoter is often neglected. In this study, a long length sequence(about 4-kb) of sericin1(Ser1) promoter was cloned from silkworm genome, which was further validated as a kind of conserved and tissue-specific promoter by bioinformatic analysis. The4-kb length of Ser1 promoter was divided into three sections and each section was predicted including a lot of potential transcriptional factor binding sites(TFBSs). The transgenic experiment suggested that the TFBSs facilitated enhancement of promoter driving activity. To our surprise, the combination of multi-copy proximal Ser1 promoters could not improve the transcriptional level of exogenous gene but reduction. We speculated that multi-copy promoters would disperse transcription pre-initiation complexes, therefore the driving force of promoters were weakened. The correlation analysis between two contiguous genes, target foreign gene(firefly luciferase, FLuc) and marker gene(enhanced green fluorescent protein, EGFP), was carried out.The results indicated that the correlation was highly significant between FLuc and EGFP regardless of different insertion sites.Moreover, the ELISA assay revealed the correlation between transcriptional and translational level of EGFP were also very significant. Therefore, the exogenous genes expression could be simply and conveniently predicted by using an adjacent marker gene.This is a low-cost, time- and labour-saving approach for large-scale screening high foreign protein expression transgenic strains. In sum, all those results provide important clues for researchers to further investigate underlying molecular mechanism of promoters,and a new way is discovered to quickly and accurately predict exogenous genes expression in transgenic studies.(本文来源于《中国蚕学会第八届青年学术研讨会论文集》期刊2014-08-13）
张雪[2]（2008）在《家蚕Sericin-1启动子中与丝胶基因表达相关区域的分析》一文中研究指出家蚕(Bombyx mori)是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目昆虫,兼具重要的经济价值和学术价值。家蚕因为其强大的合成和分泌丝蛋白(丝素和丝胶)能力而备受人类关注,并且由于在昆虫中相对较好的研究基础以及相对简单的饲养条件,使得家蚕被普遍接受为鳞翅目昆虫的模式生物。家蚕丝腺是合成和分泌丝蛋白的特殊器官,从形态和功能上可以分为叁部分:前部丝腺(ASG)、中部丝腺(MSG)和后部丝腺(PSG)。丝蛋白的大量合成和分泌是在五龄起第3日开始的,后部丝腺特异性的合成和分泌丝素蛋白,而中部丝腺特异性地合成和分泌丝胶蛋白。两种丝蛋白基因的时间特异性和组织特异性表达现象,引起了研究者们广泛的兴趣。基因表达受多种调控因子的多级调节,其中启动子的调控占有十分重要的地位。因此,研究丝蛋白基因启动子的功能序列对于深入了解基因的表达调控机制具有十分重要的意义。目前已有5种丝胶基因被克隆和分离,分别被称为Ser1、Ser2、MSGS3、MSGS4和MSGS5,其中Ser1基因是丝胶蛋白的主要表达基因。Liu Y等利用重组AcMNPV介导的体内瞬时表达方法,对Ser1基因的启动子序列进行部分删除,通过分析EGFP报告基因的表达,研究了Ser1启动子序列中与丝腺组织专一性表达相关的元件[1]。为了更加准确地对家蚕丝胶1基因的启动子进行研究,本文利用rAcMNPV作为基因介导的载体[2],构建了一个FHNLuc-A3RL双荧光质粒,其中萤火虫荧光素酶(FLuc)基因由被研究启动子带动,另一个由家蚕actin3启动子控制的水母荧光素酶(RLuc)作内参。并对Ser1启动子进行了删减、缺失后插入到FLuc前,通过分析FLuc报告基因与RLuc报告基因的荧光素酶活性,进一步研究了Ser1启动子序列中与丝胶基因表达相关的区域。首先,构建了一个双荧光供体质粒,对1.6 kb的Ser1基因启动子进行了5’端分段顺次缺失,用PCR方法扩增得到5种不同长度的Ser1启动子序列,加上Ser1基因全长启动子,将这5种Ser1启动子序列分别装入双荧光质粒FHNLuc-A3RL中,成功获得6种重组的转移载体:FSer1600Luc-A3RL , FSer600Luc-A3RL , FSer500Luc-A3RL , FSer492Luc-A3RL ,FSer484Luc-A3RL和FSer475Luc-A3RL,通过Bac-to-Bac系统[3]制备6种重组杆状病毒Ac1600ser、Ac600ser、Ac500ser、Ac492ser、Ac484ser和Ac475ser。这些重组病毒分别注射感染五龄起家蚕,测定FLuc和RLuc的酶活发现:Ser1启动子的基本转录元件在转录起点上游475 bp范围内。但长短不同的启动子之间,其相对活性值还是有差异的,在?1600到?475区间中也可能存在一些调控元件,但对Ser1基因的基本转录影响不大。其次,为了进一步分析Ser1启动子上几个特殊的顺式调控原件的作用,对上游-475启动子进行了内部部分删除分析,其中一个是富含AT的SA区域,一个是CAAT位点,一个是TATA盒。使用PCR技术产生了3个有缺失的启动子片段。同样将这3个不同缺失的启动子装入双荧光pFHNLuc-A3RL质粒中,构建携带双报告基因的重组杆状病毒Acser475SA-,Acser475CAAT-和Acser475TATA-,体腔注射五龄起蚕,测定报告基因FLuc和RLuc的活性。结果显示:SA区域和CAAT区域的缺失,对启动子的活性有很大影响。(本文来源于《广西师范大学》期刊2008-05-01）
诸戌娴[3]（2007）在《家蚕丝胶基因启动子的克隆与活性分析及转基因研究》一文中研究指出家蚕丝腺是合成、分泌蚕丝蛋白的重要器官，具有强大的合成和分泌蛋白质的能力。利用家蚕丝腺生物反应器安全、高效地生产药用蛋白具有实用的可行性和很好的应用前景。本实验以家蚕丝胶基因启动子ser-1、人胰岛素样生长因子hIGF-1、丝素基因轻链多聚腺苷酸信号、丝素基因轻链第一内含子(增强子)以及新霉素抗性基因等为元件，通过多次克隆将它们插入到PigA3GFP转座载体中。经PCR、酶切鉴定及测序验证表明各元件已按照设计的方式插入到PigA3GFP转座载体，分别构建了由SV40启动子和IE-1启动子驱动的新霉素抗性基因所组成的PigA3GFP-hIGF-1.A和PigA3GFP-hIGF-1.B转基因载体。通过脂质体介导法和精子介导法及基因枪法将转基因载体分别导入BmN细胞和家蚕体内，获得发荧光的BmN细胞和家蚕幼虫。我们确定用于BmN细胞筛选的G418的最佳浓度为700μg／mL～800μg／mL，并已经对转基因BmN细胞进行了连续筛选，获得比例较高的发荧光的BmN细胞。(本文来源于《苏州大学》期刊2007-05-01）
丝胶基因启动子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
家蚕(Bombyx mori)是一种能吐丝的经过家养驯化的鳞翅目昆虫,兼具重要的经济价值和学术价值。家蚕因为其强大的合成和分泌丝蛋白(丝素和丝胶)能力而备受人类关注,并且由于在昆虫中相对较好的研究基础以及相对简单的饲养条件,使得家蚕被普遍接受为鳞翅目昆虫的模式生物。家蚕丝腺是合成和分泌丝蛋白的特殊器官,从形态和功能上可以分为叁部分:前部丝腺(ASG)、中部丝腺(MSG)和后部丝腺(PSG)。丝蛋白的大量合成和分泌是在五龄起第3日开始的,后部丝腺特异性的合成和分泌丝素蛋白,而中部丝腺特异性地合成和分泌丝胶蛋白。两种丝蛋白基因的时间特异性和组织特异性表达现象,引起了研究者们广泛的兴趣。基因表达受多种调控因子的多级调节,其中启动子的调控占有十分重要的地位。因此,研究丝蛋白基因启动子的功能序列对于深入了解基因的表达调控机制具有十分重要的意义。目前已有5种丝胶基因被克隆和分离,分别被称为Ser1、Ser2、MSGS3、MSGS4和MSGS5,其中Ser1基因是丝胶蛋白的主要表达基因。Liu Y等利用重组AcMNPV介导的体内瞬时表达方法,对Ser1基因的启动子序列进行部分删除,通过分析EGFP报告基因的表达,研究了Ser1启动子序列中与丝腺组织专一性表达相关的元件[1]。为了更加准确地对家蚕丝胶1基因的启动子进行研究,本文利用rAcMNPV作为基因介导的载体[2],构建了一个FHNLuc-A3RL双荧光质粒,其中萤火虫荧光素酶(FLuc)基因由被研究启动子带动,另一个由家蚕actin3启动子控制的水母荧光素酶(RLuc)作内参。并对Ser1启动子进行了删减、缺失后插入到FLuc前,通过分析FLuc报告基因与RLuc报告基因的荧光素酶活性,进一步研究了Ser1启动子序列中与丝胶基因表达相关的区域。首先,构建了一个双荧光供体质粒,对1.6 kb的Ser1基因启动子进行了5’端分段顺次缺失,用PCR方法扩增得到5种不同长度的Ser1启动子序列,加上Ser1基因全长启动子,将这5种Ser1启动子序列分别装入双荧光质粒FHNLuc-A3RL中,成功获得6种重组的转移载体:FSer1600Luc-A3RL , FSer600Luc-A3RL , FSer500Luc-A3RL , FSer492Luc-A3RL ,FSer484Luc-A3RL和FSer475Luc-A3RL,通过Bac-to-Bac系统[3]制备6种重组杆状病毒Ac1600ser、Ac600ser、Ac500ser、Ac492ser、Ac484ser和Ac475ser。这些重组病毒分别注射感染五龄起家蚕,测定FLuc和RLuc的酶活发现:Ser1启动子的基本转录元件在转录起点上游475 bp范围内。但长短不同的启动子之间,其相对活性值还是有差异的,在?1600到?475区间中也可能存在一些调控元件,但对Ser1基因的基本转录影响不大。其次,为了进一步分析Ser1启动子上几个特殊的顺式调控原件的作用,对上游-475启动子进行了内部部分删除分析,其中一个是富含AT的SA区域,一个是CAAT位点,一个是TATA盒。使用PCR技术产生了3个有缺失的启动子片段。同样将这3个不同缺失的启动子装入双荧光pFHNLuc-A3RL质粒中,构建携带双报告基因的重组杆状病毒Acser475SA-,Acser475CAAT-和Acser475TATA-,体腔注射五龄起蚕,测定报告基因FLuc和RLuc的活性。结果显示:SA区域和CAAT区域的缺失,对启动子的活性有很大影响。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
丝胶基因启动子论文参考文献
[1].叶露鹏,钱秋杰,张玉玉,尤征英,车佳倩.家蚕丝腺生物反应器中丝胶蛋白1启动子的分析和外源基因表达效率的辅助检测(英文)[C].中国蚕学会第八届青年学术研讨会论文集.2014
[2].张雪.家蚕Sericin-1启动子中与丝胶基因表达相关区域的分析[D].广西师范大学.2008
[3].诸戌娴.家蚕丝胶基因启动子的克隆与活性分析及转基因研究[D].苏州大学.2007
标签：Bombyx; mori; sericin; 1; promoter; regulatory; element; correlation; analysis;