家蝇抗菌肽Domesticin在毕赤酵母中的表达及抑菌活性检测

论文摘要

利用毕赤酵母菌株表达家蝇抗菌肽domesticin基因并检测其抑菌活性。克隆家蝇domesticin基因与pPIC9k质粒相连,构建重组表达载体p PIC9K-domesticin,将其电击转化入毕赤酵母KM71中。甲醇诱导后利用Tricine-SDS-PAGE及Western Blot检测融合蛋白的表达,通过最小抑菌浓度测定表达产物的抑菌活性。结果显示家蝇抗菌肽Domesticin在毕赤酵母中成功表达,抑菌实验表明Domesticin对多种细菌具有抑制作用。Domesticin是一种对受试革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌活性的广谱新型抗菌肽,有望成为新一代抗菌剂。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 总RNA提取和反转录
•     1.2.2 基因克隆、重组表达载体的构建及电转化
•     1.2.3 遗传霉素筛选及PCR鉴定转化子
•     1.2.4 重组pPIC9K-Domesticin的诱导表达、蛋白检测及分离纯化
•     1.2.5 Domesticin的抑菌活性检测
• 2 结果
•   2.1 目的基因的扩增及表达载体p P I C 9 K-domesticin的构建
•   2.2 高拷贝转化子的筛选以及PCR鉴定
•   2.3 重组酵母表达产物的检测
•   2.4 抑菌活性检测
• 3 讨论
• 4 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 刘进兰,杨雪,李双双,张玉明,柳峰松,唐婷,李红权

关键词: 家蝇,抗菌肽,毕赤酵母,真核表达,抑菌活性

来源: 生物技术通报 2019年02期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学

单位: 河北大学

基金: 国家自然科学基金项目(31572327)

分类号: Q78;Q51

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0611

页码: 109-115

总页数: 7

文件大小: 3077K

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