电针百会和神庭穴对脑缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响

电针百会和神庭穴对脑缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响

论文摘要

目的:观察电针百会和神庭穴对脑缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响,探讨其作用机制。方法:将111只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组36只和手术组75只。假手术组麻醉后只分离左侧颈总、颈内、颈外动脉,不结扎、插线。手术组采用Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。依据Zea Longa评分法和Barnes迷宫实验对造模后大鼠进行神经行为学评分和认知缺损筛查,75只大鼠最终纳入72只,采用随机数字表法分为模型组和电针组,每组各36只。电针组于术后2 h给予大鼠电针百会、神庭穴。模型组除不予电针治疗外,其余操作同电针组。采用Barnes迷宫实验评估术后1、7 d大鼠的认知功能;运用2,3,5-氯化三苯四唑溶液(TTC)染色法检测术后1、7 d大鼠的脑梗死体积;以Iba1阳性细胞作为海马区小胶质细胞/巨噬细胞极化的标记物,采用免疫组化法观察术后1、7 d大鼠海马区小胶质细胞/巨噬细胞极化状况;运用Western blot检测术后1、7 d大鼠海马区M1型小胶质细胞/巨噬细胞特异性标记蛋白MHCⅡ及M2型小胶质细胞/巨噬细胞特异性标记蛋白Arg-1的表达;采用双抗体/夹心酶联免疫吸附测定法检测术后1、7 d大鼠海马区脑组织匀浆中M1型小胶质细胞/巨噬细胞特异性免疫细胞因子TNF-α、IL-1β及M2型小胶质细胞/巨噬细胞特异性免疫细胞因子IL-10、TGF-β的表达。结果:①假手术组大鼠各时间段均未见神经功能缺损;造模术后2 h,与假手术组比较,模型组及电针组神经行为学评分明显增高(P<0.05),Barnes迷宫逃避潜伏期时间明显延长(P<0.05),进入错误洞口次数明显增多(P<0.05);造模术后1 d,电针组与模型组大鼠Barnes迷宫逃避潜伏期时间、进入错误洞口次数比较,差异均无统计学意义(P>0.05);术后7 d,电针组大鼠Barnes迷宫逃避潜伏期时间、进入错误洞口次数较模型组明显减少(P<0.05)。②假手术组大鼠各时间段TTC均未见染色;造模术后1 d,电针组与模型组大鼠脑梗死体积比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后7 d,电针组脑梗死体积较模型组明显缩小(P<0.05)。③造模术后1、7 d,电针组和模型组Iba1阳性表达率较假手术组明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);电针组与模型组Iba1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。④造模术后1 d,电针组和模型组Iba1、MHCⅡ、TNF-α、IL-1β蛋白表达较假手术组明显增多(P<0.05),电针组和模型组Arg-1、IL-10、TGF-β蛋白表达与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),电针组与模型组Iba1、MHCⅡ、TNF-α、IL-1β、Arg-1、IL-10、TGF-β蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);造模术后7 d,电针组和假手术组MHCⅡ、TNF-α、IL-1β蛋白表达较模型组明显减少(P<0.05),电针组Arg-1、IL-10、TGF-β蛋白表达较模型组、假手术组明显增多(P<0.05)。结论:电针百会、神庭穴能有效改善脑缺血再灌注损伤大鼠的认知功能,其机制可能是抑制小胶质细胞/巨噬细胞M1型极化,促进M2型极化,一定程度调节神经炎症应答,促进认知功能的恢复。

论文目录

  • 1 实验材料
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 主要试剂与仪器
  • 2 实验方法
  •   2.1 动物分组及模型制备
  •     2.1.1 实验分组
  •     2.1.2 模型制备
  •     2.1.3 模型的筛查
  •   2.2 实验动物处理方法
  •     2.2.1 假手术组
  •     2.2.2 电针组
  •     2.2.3 模型组
  •   2.3 指标检测
  •     2.3.1 神经功能缺损评估
  •       2.3.1. 1 神经行为学的检测
  •       2.3.1. 2 学习记忆的检测
  •     2.3.2 脑梗死体积的检测
  •     2.3.3 术后1 d、7 d海马区小胶质细胞/巨噬细胞活化的检测
  •       2.3.3. 1 海马区小胶质细胞/巨噬细胞特异性标记蛋白表达的检测
  •       2.3.3. 2 海马区M1型、M2型小胶质细胞/巨噬细胞特异性标记蛋白表达的检测
  •       2.3.3. 3 海马区TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β蛋白含量的检测
  •   2.4 统计学方法
  • 3 结果
  •   3.1 3组大鼠神经行为学评分比较
  •   3.2 3组大鼠学习记忆能力的比较
  •   3.3 3组大鼠脑梗死体积比较
  •   3.4 3组大鼠海马区小胶质细胞/巨噬细胞活化比较
  •     3.4.1 Iba1阳性细胞表达比较
  •     3.4.2 3组大鼠M1、M2型特异性标志蛋白MHCⅡ、Arg-1表达比较
  •     3.4.3 3组大鼠M1、M2特异性免疫细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10、TGF-β比较
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 游咏梅,江一静,林志诚,詹增土,王君,魏伟,杨珊莉

    关键词: 脑缺血再灌注,电针,百会,神庭,小胶质细胞,巨噬细胞极化,认知功能

    来源: 康复学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中医学

    单位: 福建中医药大学附属康复医院,福建省康复技术重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(81574048),福建省教育厅高校自然基金重大项目(JZ160443)

    分类号: R245

    页码: 28-36

    总页数: 9

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