过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞衰老模型的建立

论文摘要

目的应用过氧化氢（H2O2）诱导人皮肤成纤维细胞衰老,建立体外细胞衰老模型。方法组织块贴壁法分离培养人皮肤成纤维细胞,免疫荧光法对获得的细胞进行鉴定,采用50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L的H2O2处理细胞1h、2h两个时间点,然后正常培养4d,应用细胞增殖实验,衰老相关的β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色实验,确定H2O2氧化应激下的损伤力和细胞衰老率。结果镜下可见细胞呈梭形或多角形,结合免疫荧光结果,分离获得的细胞即为成纤维细胞。用50μmol/L、100μmol/L H2O2处理1h、2h后虽然活细胞较多,但是SA-β-gal染色阳性率较低。200μmol/L、400μmol/L H2O2处理2h组SA-β-gal染色阳性率较高,但细胞量较少给以后实验带来较多困难。200μmol/L、400μmol/L H2O2处理1h组细胞数量,SA-β-gal染色阳性率最高且二者间无明显差异。结论选取200μmol/L H2O2处理1h作为建立衰老细胞模型。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 人皮肤成纤维细胞的培养与鉴定
•   1.2 实验分组及细胞增殖实验
•   1.3 衰老相关的β-半乳糖苷酶
•   1.4 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 培养的人皮肤成纤维细胞特征
•   2.2 细胞增殖实验结果
•   2.3 SA-β-gal染色结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 潘长伟,赵峰,郎宏鑫,林学文,施萍,庞希宁

关键词: 衰老,人皮肤成纤维细胞

来源: 解剖科学进展 2019年02期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 中国医科大学基础医学院干细胞与再生医学研究室

基金: 沈阳市科技局沈阳市百项重大科技成果转化项目(250039)

分类号: R329.2

DOI: 10.16695/j.cnki.1006-2947.2019.02.022

页码: 193-195+199

总页数: 4

文件大小: 1308K

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