STAT1-CXCL9-10信号通路调控间充质干细胞免疫抑制作用的实验研究

论文摘要

目的探究间充质干细胞（MSC）在炎症微环境下,通过STAT1-CXCL9-10信号通路发挥免疫抑制作用的机制。方法分离并培养小鼠骨实质来源MSC,采用流式细胞术结合诱导分化等方法检测MSC自身生物学特性;炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激MSC,实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测趋化因子CXCL9、CXCL10表达;Western印迹检测STAT1及p-STAT1表达;进一步,RT-PCR检测转染STAT1-siRNA后MSC在炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激下STAT1、CXCL9及CXCL10的mRNA表达量;Western印迹检测STAT1及p-STAT1蛋白表达量。结果分离培养的MSC呈成纤维样,涡旋状贴壁生长,高表达CD29、Sca-1和CD90,不表达或低表达CD11b、CD31、CD34、CD45和MHCⅡ;诱导分化结果显示,细胞出现大量脂滴,碱性磷酸酶活性显著增加;成脂关键转录因子CEBPα和PPARγ、成骨关键转录因子骨钙素和Runx2表达显著增加（P<0.001）;炎症因子TNF-α、IFN-γ刺激后MSC中CXCL9、CXCL10、STAT1及p-STAT1表达量均显著增加（P<0.001）。采用siRNA敲低MSC中STAT1表达后,在同样的炎症因子刺激下CXCL9、CXCL10、STAT1及p-STAT1表达量均显著降低（P<0.001）。结论 MSC在炎症微环境（TNF-α、IFN-γ）中,通过高表达STAT1促使趋化因子CXCL9及CXCL10高表达,进而影响MSC的免疫抑制作用。

论文目录

• 1 材料与方法
•    1.1 材料
•      1.1.1 实验动物
•      1.1.2 试剂和主要仪器
•    1.2 方法
•      1.2.1 小鼠骨实质来源MSC的分离培养与鉴定
•      1.2.2 炎症环境下培养MSC
•      1.2.3 RT-PCR检测CXCL9和CXCL10的表达
•      1.2.4 Western印迹检测STAT1及p-STAT1表达
•    1.3 统计学分析
• 2结果
•   2.1小鼠骨实质来源MSC的培养与鉴定
•   2.2炎症微环境下MSC趋化因子的表达
•   2.3炎症微环境促进MSC高表达STAT1及p-STAT1
•   2.4 STAT1-siRNA转染MSC对趋化因子表达的影响
• 3讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周斌,刘伟江,查兰兰,李培,刘元林,樊月,于丰实,李雪,王洋,郑荣秀,张毅

关键词: 间充质干细胞,炎症因子

来源: 军事医学 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 天津医科大学总医院儿科,军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所

基金: 国家重点研发计划(2016YFC1000305),天津市卫计委重点攻关研究项目(16KG123),天津市自然科学基金重点项目(17JCZD-JC36400),天津市科技局科学技术普及项目(18KPHDSF00140)

分类号: R329.2

页码: 902-907

总页数: 6

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