导读:本文包含了巢式逆转录多聚合酶链反应论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:逆转录,肠道,基因,蛋白,细胞,病毒,大肠癌。
巢式逆转录多聚合酶链反应论文文献综述
周敏航,姜孟孟,高丽,徐媛媛,丁一[1]（2011）在《逆转录-多重巢式聚合酶链反应技术在骨髓增殖性疾病PDGFRB基因重排检测中的应用》一文中研究指出本研究旨在探讨逆转录-多重巢式PCR技术在骨髓增殖性疾病(MPD)PDGFRB基因重排检测中的应用价值。利用逆转录-多重巢式PCR技术对146例MPD患者骨髓或外周血标本进行与PDGFRB基因重排相关的融合基因定性检测。结果显示,146例MPD患者骨髓或外周血标本中有8例出现PDGFRB基因重排,阳性率为5.5%。其中3例为TEL-PDGFRB融合基因,2例为HIP1-PDGFRB融合基因,1例为GIT2-PDGFRB融合基因,1例为TP53BP1-PDGFRB融合基因,1例为WDR48-PDGFRB融合基因。结论:运用逆转录-多重巢式PCR方法进行MPD患者PDGFRB基因重排检测,对于疾病诊断有一定指导意义,且可以为药物靶向治疗提供理论依据。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2011年06期）
倪穗,余晓巍,王建平,雷爱莹,曾地刚[2]（2009）在《应用巢式逆转录聚合酶链反应检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(VHSV)》一文中研究指出参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列,根据PCR引物设计的原则,设计巢式PCR引物,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究,并对RT-PCR的反应条件进行了优化。结果表明,巢式RT-PCR扩增获得279bp的特异性片断,阴性对照无扩增条带。巢式RT-PCR扩增出的特异性片段经测序分析,结果证实与报道的序列完全一致。该方法最低可检测出0.1pg的鱼类病毒性出血性败血症病毒RNA。初步建立了VHSV的巢式RT-PCR检测方法,该方法灵敏、特异,可为VHSV的检测提供一个快速、有效的手段。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2009年04期）
胡庆宏,易诚予,彭燕,刘明圭,熊建萍[3]（2009）在《改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移》一文中研究指出目的探讨改良巢式RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中CK20mRNA的表达情况,并分析其与微转移的关系,建立一种简便、快速的检测血中癌细胞微转移的方法。方法采用改良的巢式RT-PCR技术检测大肠癌患者及正常对照组外周血CK20mRNA的表达。结果CK20mRNA在正常对照组中均无表达,在大肠癌患者中阳性表达率为55.4%(62/112)。不同细胞分化程度大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率无显着性差异(P>0.05);而不同Dukes分期大肠癌患者其外周血中CK20mRNA阳性表达率有显着性差异(P<0.05)。结论改良的巢式RT-PCR技术检测血中微转移大肠癌细胞的CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,有助于癌细胞微转移的早期诊断,有助于指导辅助化疗和监测疗效。(本文来源于《江西医学院学报》期刊2009年04期）
胡庆宏,刘明圭[4]（2007）在《改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移》一文中研究指出2004年3月至2006年7月本院普外科收治各类大肠癌患者112例,均经病理组织学检查确诊．Dukes 分期为 A 期 19例,B 期31例,C 期46例,D 期16例。癌细胞分化程度为高分化22例,中分化54例,低分化28例,未分化8例；正常对照组30例为本院职工体检后的完全健康者。经过巢式 PCR 的两轮扩增,大肠癌患者外周血中 CK20 mRNA 表达阳性的标本,经琼脂糖凝胶电泳,均扩增出了303 bp 的产物条带,符合设计的片段大小,阳性表达总检出率为55．4%(本文来源于《遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集》期刊2007-11-01）
俞莉敏,党耕町,杨吉成,郑祖根[5]（2007）在《巢式逆转录-聚合酶链反应扩增人骨形成蛋白2全长cDNA及其真核表达载体的构建》一文中研究指出目的:利用巢式逆转录-聚合酶链反应扩增的方法,从肌肉组织中扩增人骨形成蛋白2全长cDNA并构建真核表达载体系统。方法:实验于2003-10/2005-10在苏州大学基因工程教研室和北京大学第叁医院骨科实验室完成。提取成人肌肉组织内的总RNA,设计内外两对引物以巢式逆转录-聚合酶链反应扩增方法分两次扩增出人骨形成蛋白2全长1188bp基因,经T-A克隆装入pUCM-T质粒载体内,测序验证后,将克隆质粒以Hind Ⅲ和Xba Ⅰ双酶切后与pcDNA3.0载体相连接,构建真核表达载体系统。结果:利用巢式逆转录-聚合酶链反应扩增方法能从成人肌肉组织内扩增出1188bp的人骨形成蛋白2全长cDNA基因,其测序结果显示与Genebank报道序列完全相符。将扩增序列双酶切后与pcDNA3.0载体相连接,经电泳验证,能构建人骨形成蛋白2全长基因的真核表达系统。结论:巢式逆转录-聚合酶链反应扩增方法能从成人肌肉组织内扩增出人骨形成蛋白2全长cDNA基因,并克隆构建真核表达载体系统,为下一步基因组织工程人工骨实验奠定基础。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2007年14期）
胡庆宏,易诚予,刘明圭[6]（2006）在《用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中CK20mRNA》一文中研究指出目的建立一种简便、快速的检测血中微量大肠癌细胞CK20mRNA的方法。方法用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中大肠癌标准细胞株VoLo的CK20mRNA。结果浓度分别为1、10、100、1000个/mL的大肠癌标准细胞株LoVo的每份标本,均扩增出了符合所设计片段大小的303bp的目的产物条带。结论用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中微量存在的大肠癌细胞CK20mRNA具有简便、快速、灵敏的优点,可以大力地推广于临床。(本文来源于《实用临床医学》期刊2006年12期）
张寿斌,廖华,黄呈辉,谭庆瑜,张炜灵[7]（2006）在《应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒》一文中研究指出目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以求敏感、特异及快速诊断肠道病毒(EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计2对通用引物,建立RT-n-PCR检测方法。结果共有104份临床标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%(104/327);在147例病例中粪便和咽拭子EV阳性比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%(64/165)。正常儿童与可疑EV感染病人EV阳性率比较差异有统计学意义(u=3.38,P<0.01)。结论RT-n-PCR可以准确快速地检测出肠道病毒,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。(本文来源于《中国医师杂志》期刊2006年07期）
胡庆宏,刘明,栾树清,易诚予,彭燕[8]（2005）在《介绍一种改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术》一文中研究指出近年来,基因分析技术广泛应用于医学的各个领域,特别是检测基因的mRNA表达在科研及临床应用方面已显得越来越重要。常规检测mRNA表达主要是应用逆转录聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reac-ti(本文来源于《实用临床医学》期刊2005年11期）
潘金兰,薛永权,姜海燕,何军,王玮[9]（2005）在《逆转录多重巢式聚合酶链反应技术在急性单核系白血病M4/M5MLL基因重排检测中的应用》一文中研究指出目的探讨逆转录多重巢式聚合酶链反应(多重PCR)技术在初诊M4/M5患者MLL基因重排检测中的价值。方法采用骨髓直接或短期培养法制备染色体,应用R显带技术进行核型分析。采用多重PCR技术,检测40例初诊M4/M5患者中5种急性髓系白血病常见的MLL融合基因以及MLL部分串联重复。结果R显带揭示7有涉及11q23的易位,包括t(6;11)(q27;q23)、t(9;11)(p21;q23)、t(11;17)(q23;q21)、t(11;19)(q23;p13.1),14例有其他核型异常,19例为正常核型。多重PCR证实了7例核型分析显示11q23易位标本中的6例,例3核型分析揭示46,XX,t(6;11)(q27;q23),多重PCR检测MLL/AF6为阴性;19例显带分析为正常核型标本中检出2例MLL部分串联重复。结论多重PCR是对初诊M4/M5患者进行各种MLL重排筛检的有效方法。(本文来源于《中华医学遗传学杂志》期刊2005年04期）
张寿斌,廖华,黄呈辉,谭庆瑜,张炜灵[10]（2004）在《应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒(英文)》一文中研究指出目的设计通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应(RT-n-PCR),以达到广泛。特异及快速诊断肠道病毒(Enterovirus,EV)感染。方法在EV基因组5'端非编码区(5'-UTR)设计二对通用第物,建立RT-n-PCR检测方法,对3种EV和3种非EV标准株以及165例可疑EV感染的327份临床标本进行检测。结果EV标准株均在电泳中检测到一清晰312bp扩增条带,而非EV标准株则无扩增条带;共有104份标本检测到相应大小扩增条带,阳性率31.8%;147例病例同时检测了粪便和咽拭子,粪便阳性49例,咽拭子阳性44例,其中粪便和咽拭子同时阳性35例,粪便和咽拭子EV阳性比较无显着性差异(P>0.05)。病例总阳性数64例,阳性率38.8%。结论RT-n-PCR可以准确地检测出肠道病毒,特异性强,用时少,同时检测多份标本可以提高EV阳性率。(本文来源于《中国现代医学杂志》期刊2004年22期）
巢式逆转录多聚合酶链反应论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
参照鱼类病毒性出血性败血症病毒序列,根据PCR引物设计的原则,设计巢式PCR引物,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对如何快速检测鱼类病毒性出血性败血症病的方法进行了较为系统的研究,并对RT-PCR的反应条件进行了优化。结果表明,巢式RT-PCR扩增获得279bp的特异性片断,阴性对照无扩增条带。巢式RT-PCR扩增出的特异性片段经测序分析,结果证实与报道的序列完全一致。该方法最低可检测出0.1pg的鱼类病毒性出血性败血症病毒RNA。初步建立了VHSV的巢式RT-PCR检测方法,该方法灵敏、特异,可为VHSV的检测提供一个快速、有效的手段。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
巢式逆转录多聚合酶链反应论文参考文献
[1].周敏航,姜孟孟,高丽,徐媛媛,丁一.逆转录-多重巢式聚合酶链反应技术在骨髓增殖性疾病PDGFRB基因重排检测中的应用[J].中国实验血液学杂志.2011
[2].倪穗,余晓巍,王建平,雷爱莹,曾地刚.应用巢式逆转录聚合酶链反应检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(VHSV)[J].海洋与湖沼.2009
[3].胡庆宏,易诚予,彭燕,刘明圭,熊建萍.改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移[J].江西医学院学报.2009
[4].胡庆宏,刘明圭.改良巢式逆转录聚合酶链反应检测大肠癌血中微转移[C].遗传学进步与人口健康高峰论坛论文集.2007
[5].俞莉敏,党耕町,杨吉成,郑祖根.巢式逆转录-聚合酶链反应扩增人骨形成蛋白2全长cDNA及其真核表达载体的构建[J].中国组织工程研究与临床康复.2007
[6].胡庆宏,易诚予,刘明圭.用改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术检测血中CK20mRNA[J].实用临床医学.2006
[7].张寿斌,廖华,黄呈辉,谭庆瑜,张炜灵.应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒[J].中国医师杂志.2006
[8].胡庆宏,刘明,栾树清,易诚予,彭燕.介绍一种改良的巢式逆转录聚合酶链反应技术[J].实用临床医学.2005
[9].潘金兰,薛永权,姜海燕,何军,王玮.逆转录多重巢式聚合酶链反应技术在急性单核系白血病M4/M5MLL基因重排检测中的应用[J].中华医学遗传学杂志.2005
[10].张寿斌,廖华,黄呈辉,谭庆瑜,张炜灵.应用通用引物建立巢式逆转录聚合酶链反应检测肠道病毒(英文)[J].中国现代医学杂志.2004