导读:本文包含了人精浆蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:人精,蛋白,抗体,基因,前列腺,肿瘤,单克隆抗体。
人精浆蛋白论文文献综述
王栋,王禾,武国军,吴卫真,杨顺良[1]（2006）在《多价抗人精浆蛋白/抗CD_3双特异性单链抗体的活性研究》一文中研究指出目的探讨多价抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的生物学活性。方法利用流式细胞仪和51Cr释放试验评价多价双特异性单链抗体的抗原亲和活性和体外介导杀伤靶细胞的效果。利用母性BALB/C裸鼠前列腺癌模型分析多价双特异性单链抗体在体内介导细胞毒T淋巴细胞对肿瘤细胞杀伤的能力。结果多价双特异性抗体可以特异性结合表达PSA的前列腺癌细胞和CD3阳性淋巴瘤细胞,阳性结合率分别为74%和83%。在体外,有细胞毒T淋巴细胞存在时多价抗体可引起前列腺癌细胞裂解。与对照组比较,接种前列腺癌细胞的裸鼠在注射激活的细胞毒T淋巴细胞的同时接受多价抗体治疗后,肿瘤生长明显受到抑制(P<0.05)。结论多价抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体具有良好的生物学活性,在体内外均可以介导细胞毒T淋巴细胞对靶细胞的杀伤。(本文来源于《中华泌尿外科杂志》期刊2006年S1期）
王栋,王禾,武国军,吴卫真,杨顺良[2]（2006）在《抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究》一文中研究指出目的:构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性。方法:利用重迭延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因。测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用。结果:测序分析证实,Bss-cFv基因片段的大小为1.5kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致。SDS-PAGE和Westernblot分析证明:表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61000。FCM结果显示:BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%。体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤。与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05)。结论:抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv具有一定的生物学活性,在体内、体外均可介导CTL杀伤靶细胞LNCaP。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2006年04期）
孙脊峰,杨洁,郝晓柯,金明,赵晶[3]（2006）在《用亲和层析法纯化人精浆蛋白》一文中研究指出【目的】用亲和层析法从增生的前列腺组织中纯化人精浆蛋白(-γseminoprotein,-γsm)。【方法】采用超声波粉碎、NP-40提取与两种免疫亲和层析相结合[抗人精浆蛋白单抗(E4B7mAb)亲和层析和蛋白A亲和层析]的新提纯方案,获得了高纯度-γsm抗原。【结果】所纯化的-γsm蛋白经ELISA双抗夹心法和免疫印迹分析检测证明,用此法从增生的前列腺组织中分离到-γsm抗原,而且纯化的-γsm具有生物活性。【结论】这种方法的建立将为分离-γsm抗原提供一种有效途径,为抗精浆蛋白基因工程抗体的研究提供良好的抗原保证。(本文来源于《武警医学院学报》期刊2006年02期）
武国军,王禾,王栋,于磊,郝晓柯[4]（2004）在《多价抗人精浆蛋白/抗人CD_3双特异性单链抗体的构建及表达》一文中研究指出目的 构建多价抗人精浆蛋白 (γ Sm) /抗人CD3 双特异性单链抗体 (scFv)基因 ,并进行真核表达和活性测定。 方法 利用递归PCR法扩增人IgG3上游铰链区与人p5 3四聚功能域融合基因 ,克隆入pUC1 9载体中构建pUC1 9/IgG3/p5 3克隆载体。将抗人CD3 scFv(CD3 scFv)和抗人γ SmscFv(γ SmscFv)依次克隆入pUC1 9/IgG3/p5 3载体中 ,构建多价双特异性γ SmscFv/CD3 scFv[scFv2 (CD3 /γ Sm) ]融合基因。将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2 B中 ,转染HeLa细胞进行表达 ,表达产物纯化后流式细胞仪进行活性测定。 结果 获得了多价scFv2 (CD3 /γ Sm)融合基因 ,基因全长 1 6 38bp ,可编码 5 4 6个氨基酸 ,与已发表的γ SmscFv、CD3 scFv和人p5 3四聚功能域基因cDNA序列一致。表达产物经SDS PAGE和Western印迹实验证实为约 6 70 0 0的特异蛋白条带 ,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC 3细胞和人外周血单个核细胞 (PBMC) ,亲和力高于双特异性scFv。 结论 获得了可与PBMC和PC 3细胞特异结合的多价scFv2 (CD3 /γ Sm) ,为进一步临床应用提供了实验依据(本文来源于《中华泌尿外科杂志》期刊2004年08期）
杨洁,郝晓柯,孙脊峰,赵晶,于翠娟[5]（2004）在《抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达》一文中研究指出目的 获得鼠抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因并在大肠杆菌中表达。方法 从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA ,用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)克隆Fd段和κ链基因 ;构建到噬粒pComb3中 ;并用ELISA、Westernblotting和免疫细胞化学分析证明表达的Fab段特异性结合人精浆蛋白。结果 从分泌抗人精浆蛋白的鼠单克隆抗体杂交瘤细胞系E4B7中克隆出了重链Fd段和κ链基因 ,经序列测定表明 ,Vκ 属于鼠免疫球蛋白ⅩⅢ家族 ,VH与鼠免疫球蛋白MUSIGHAEI同源性最高。将该Fd和κ链基因克隆到表达载体pComb3中 ,在大肠杆菌中获得了表达。结论 ELISA、Westernblotting和免疫细胞化学分析表明 ,表达的Fab段可以特异性的与人精浆蛋白结合(本文来源于《免疫学杂志》期刊2004年04期）
孙脊峰,杨洁,郝晓柯,赵晶,温伟红[6]（2003）在《抗人精浆蛋白抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定》一文中研究指出目的 构建编码抗人精浆蛋白抗体Fab基因的表达载体 ,并在大肠杆菌中进行表达 .方法 :从克隆载体pUC1 9 K和 pBlue scriptKS (M1 3) Fd中 ,酶切获得抗人精浆蛋白单克隆抗体 (mAb)Fd基因和κ链基因 .然后将Fd和κ链(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2003年20期）
武国军,王禾,王栋,于磊,王智[7]（2003）在《抗人精浆蛋白单链抗体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定》一文中研究指出目的 在HeLa细胞中表达抗人γ 精浆蛋白 (γ Sm)单链抗体 (scFv)基因 ,并进行亲和活性测定。方法 在已经构建抗人γ SmscFv基因基础上 ,将基因克隆入真核分泌表达载体 pSecTag2 B中 ,并转染HeLa细胞进行表达。表达产物纯化后 ,用流式细胞仪进行亲和活性测定。结果 表达产物经SDS PAGE和Western印迹实验证实为约30ku的特异蛋白条带 ,纯化后经流式细胞仪检测可以特异性地结合PC 3细胞。结论 获得了可与PC 3细胞特异结合的抗人γ SmscFv ,为进一步临床应用奠定基础(本文来源于《西安交通大学学报(医学版)》期刊2003年05期）
孙脊峰,杨洁,郝晓柯,赵晶,温伟红[8]（2003）在《抗人精浆蛋白抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定》一文中研究指出目的 :构建编码抗人精浆蛋白抗体Fab基因的表达载体 ,并在大肠杆菌中进行表达。方法 :从克隆载体pUC19 К和pBluescriptKS(M13 ) Fd中 ,酶切获得抗人精浆蛋白单克隆抗体 (mAb)Fd基因和К链基因。然后将Fd和К链基因重组到Fab表达载体pComb3中 ,构建抗人精浆蛋白Fab基因的重组表达载体pComb3 Fab ,并在XL1 Blue菌中表达。结果 :经重组表达载体转化的XL1 Blue菌株可表达Fab基因。Westernblot和免疫细胞化学分析表明 ,表达产物Fab具有特异性结合精浆蛋白的活性。结论 :抗人精浆蛋白Fab基因成功地获得 ,为进一步将其与抗肿瘤药物偶联用于前列腺癌的导向治疗创造了条件。表达为构建其它基因工程抗体提供了基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2003年05期）
杨洁,郝晓柯,张盈华,孙脊峰,赵晶[9]（2002）在《抗人精浆蛋白单抗重链Fd段基因的克隆及其在HeLa细胞的表达》一文中研究指出目的 获得鼠抗人精浆蛋白 m Ab重链 Fd段基因 ,并将其转染到 He L a细胞进行表达 .方法 从分泌抗人精浆蛋白 m Ab的杂交瘤细胞系 E4 B7中提取总 RNA,用 RT- PCR法获取重链 Fd段 c DNA.将其克隆入真核表达载体 pc D-NA3,用脂质体转染法转染 He L a细胞 ,并用免疫荧光染色方法检测重链 Fd段的表达 .结果 从分泌抗人精浆蛋白的鼠m Ab杂交瘤细胞系 E4 B7中克隆出了重链 Fd段基因 ,序列测定表明 ,VH 与鼠免疫球蛋白 MUSIGHAEI同源性最高 .将含重链 Fd段基因的真核表达载体 pc DNA3- E4 B7Fd中转染He L a细胞后 ,在 He L a细胞中检测到了重链 Fd段的表达 .结论 获得了序列正确的重链 Fd段基因 ,它在 He L a细胞中可以成功地表达 ,为进一步构建和表达 Fab奠定基础 .(本文来源于《第四军医大学学报》期刊2002年17期）
杨洁,郝晓柯,张盈华,孙脊峰,赵晶[10]（2002）在《抗人精浆蛋白单抗κ链基因的克隆及其在HeLa细胞的表达》一文中研究指出目的 获得鼠抗人精浆蛋白单抗（ｍＡｂ）κ链基因，并将其转染到ＨｅＬａ细胞进行表达。方法 从分泌抗人精浆蛋白ｍＡｂ的杂交瘤细胞系Ｅ４Ｂ７中提取总ＲＮＡ，用ＲＴ－ＰＣＲ法获取κ链ｃＤＮＡ。将其克隆入真核表达载体ｐｃＤＮＡ３，用脂质体转染法转染ＨｅＬａ细胞，并用免疫荧光染色法检测κ链的表达。结果从分泌抗人精浆蛋白的鼠ｍＡｂ杂交瘤细胞系Ｅ４Ｂ７中克隆了κ链基因。序列测定表明，Ｖκ属于鼠免疫球蛋白ⅩⅢ家族。以含κ链基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３－Ｅ４Ｂ７κ转染ＨｅＬａ细胞后，在ＨｅＬａ细胞中检测到了κ链的表达。结论 获得了序列正确的κ链基因，并在ＨｅＬａ细胞中成功地表达，为进一步构建和表达Ｆａｂ段打下了良好基础。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2002年02期）
人精浆蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:构建并表达抗人精浆蛋白/抗CD3的双特异性单链抗体(BsscFv),并检测其生物学活性。方法:利用重迭延伸拼接PCR,拼接抗人精浆蛋白scFv基因和抗CD3scFv基因,并在中间引入柔性短肽(GlySerGly)2,构建抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv基因。测序正确后,将融合基因亚克隆入真核表达载体中,并在HeLa细胞中进行表达,采用流式细胞术(FCM)和51Cr释放试验,评价BsscFv的抗原结合活性和体外介导的特异性杀伤靶细胞的效应,以及利用裸鼠前列腺癌模型观察其在体内的抑瘤作用。结果:测序分析证实,Bss-cFv基因片段的大小为1.5kb,编码500个氨基酸,该序列与设计的完全一致。SDS-PAGE和Westernblot分析证明:表达产物存在于HeLa细胞的培养上清中,其相对分子质量(Mr)为61000。FCM结果显示:BsscFv可特异性的结合前列腺癌细胞LNCaP和CD3+淋巴瘤细胞Jurkat,结合率分别为54.1%和53.7%。体外实验表明,BsscFv可介导CTL对LNCaP细胞的杀伤。与对照组相比较,接种LNCaP的裸鼠在体内注射激活的CTL和BsscFv治疗后,肿瘤的生长明显受到抑制(P<0.05)。结论:抗人精浆蛋白/抗CD3的BsscFv具有一定的生物学活性,在体内、体外均可介导CTL杀伤靶细胞LNCaP。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人精浆蛋白论文参考文献
[1].王栋,王禾,武国军,吴卫真,杨顺良.多价抗人精浆蛋白/抗CD_3双特异性单链抗体的活性研究[J].中华泌尿外科杂志.2006
[2].王栋,王禾,武国军,吴卫真,杨顺良.抗人精浆蛋白/抗CD3双特异性单链抗体的活性研究[J].细胞与分子免疫学杂志.2006
[3].孙脊峰,杨洁,郝晓柯,金明,赵晶.用亲和层析法纯化人精浆蛋白[J].武警医学院学报.2006
[4].武国军,王禾,王栋,于磊,郝晓柯.多价抗人精浆蛋白/抗人CD_3双特异性单链抗体的构建及表达[J].中华泌尿外科杂志.2004
[5].杨洁,郝晓柯,孙脊峰,赵晶,于翠娟.抗人精浆蛋白单克隆抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌的表达[J].免疫学杂志.2004
[6].孙脊峰,杨洁,郝晓柯,赵晶,温伟红.抗人精浆蛋白抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定[J].第四军医大学学报.2003
[7].武国军,王禾,王栋,于磊,王智.抗人精浆蛋白单链抗体基因在HeLa细胞中的表达和活性鉴定[J].西安交通大学学报(医学版).2003
[8].孙脊峰,杨洁,郝晓柯,赵晶,温伟红.抗人精浆蛋白抗体Fab片段在大肠杆菌中表达及活性鉴定[J].细胞与分子免疫学杂志.2003
[9].杨洁,郝晓柯,张盈华,孙脊峰,赵晶.抗人精浆蛋白单抗重链Fd段基因的克隆及其在HeLa细胞的表达[J].第四军医大学学报.2002
[10].杨洁,郝晓柯,张盈华,孙脊峰,赵晶.抗人精浆蛋白单抗κ链基因的克隆及其在HeLa细胞的表达[J].细胞与分子免疫学杂志.2002
论文知识图
