Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体方法优化及其应用

论文摘要

对Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体的方法进行优化,制备了黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2免疫亲和柱。采用甲醇-水为提取溶剂,用均质机将样品的粉碎和毒素提取一步完成,免疫亲和柱对提取液进行净化、富集,收集洗脱液,在UPLC-MS/MS多反应监测（MRM）模式下进行了定性和定量分析。实验结果表明,该偶联方法稳定,亲和柱回收率在94. 4%～107. 1%之间,相对标准偏差为1. 5%～4. 9%,重复性、再现性和稳定性良好,柱容量可满足国标检测要求。采用所建立的方法检测花生、玉米和小麦实际样品中的黄曲霉毒素,检出率分别为15%、10%和10%。

论文目录

• 1 实验部分
•   1.1 主要仪器与试剂
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 单克隆抗体的制备
•     1.2.2 免疫亲和柱的制备
•     1.2.3 样品前处理
•     1.2.4 液质联用仪条件
• 2 结果与讨论
•   2.1 液质方法的优化
•   2.2 样品前处理方法的优化
•   2.3 偶联方法的优化
•     2.3.1 溶胀方式的优化
•     2.3.2 偶联时间的优化
•     2.3.3 抗体用量的优化
•   2.4 亲和柱评价
•     2.4.1 回收率实验
•     2.4.2 重复性实验
•     2.4.3 再现性实验
•     2.4.4 稳定性实验
•   2.5 实际样品分析
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 胡小风,张奇,张文,李培武

关键词: 黄曲霉毒素,亲和柱,液质联用

来源: 化学试剂 2019年04期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 化学,轻工业手工业

单位: 中国农业科学院油料作物研究所农业部油料作物生物学与遗传育种重点实验室,中国农业科学院油料作物研究所国家农业检测基准实验室(生物毒素),中国农业科学院油料作物研究所农业部油料产品质量安全风险评估实验室,中国农业科学院油料作物研究所农业部生物毒素检测重点实验室

基金: 国家重点研发计划项目(2016YFE0119900),国家自然科学基金项目(31601573),湖北省技术创新专项重大项目(2018ABA081)

分类号: O657.63;TS210.7

DOI: 10.13822/j.cnki.hxsj.2019006907

页码: 338-342

总页数: 5

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