导读:本文包含了基因载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,载体,转染,亚胺,聚乙烯,阳离子,细胞。
基因载体论文文献综述
林浩,何东升,涂家生[1]（2019）在《聚乙烯亚胺非病毒基因载体结构修饰研究进展》一文中研究指出聚乙烯亚胺(PEI)作为最经典的非病毒基因载体之一,由于其高转染效率,在基因递送领域受到极大的关注,但其毒性限制了聚乙烯亚胺的应用。本文综述了对聚乙烯亚胺进行不同的结构修饰,如多糖修饰、聚乙二醇(PEG)修饰和低分子聚乙烯亚胺衍生物等,以实现在不显着降低转染效率的前提下减少细胞毒性。(本文来源于《药学研究》期刊2019年11期）
邹云莲,胡边,张李琛,张进萍,朱学锴[2]（2019）在《人IL-12基因载体的构建及其在T细胞中的表达研究》一文中研究指出目的:探究T细胞携载人IL-12基因对T细胞生长和功能的影响。方法:构建表达人IL-12基因的PiggyBac转座子载体,在电转下,将携载IL-12基因的转座子系统导入新鲜分离的淋巴细胞获得持续稳定表达。通过T细胞表型分析及体外功能实验研究初步探讨T细胞携载IL-12基因的可行性。结果:借助电转可将携载有IL-12基因的PiggyBac转座子系统高效导入新鲜分离的淋巴细胞并获得高效稳定表达;IL-12的分泌可促进T细胞增殖,增加CD4阳性细胞百分比;携载IL-12基因的T细胞在肿瘤细胞刺激下可进一步促进IL-12分泌,增强T细胞的杀瘤活性。结论:在电场作用下,Piggybac转座子系统可将人IL-12基因高效载入并整合至T细胞基因组获得持续稳定表达,分泌的功能性IL-12可促进T细胞增殖,增强杀瘤活性。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年21期）
郑继江[3]（2019）在《汉字:中华民族精神的基因载体》一文中研究指出汉字作为中华文明的基础和载体,既是对中华民族先民认识世界的集中概括,又成为中华民族的思维工具,内涵着中华民族特有的真理精神、尚武精神、凝聚精神、君子精神、仁爱精神、应变精神和人本精神以及中华民族特有的认真、稳重、踏实、细腻的精神品格。汉字是中华民族的力量之源,必将助力中华民族继续赢得更美好的未来。中华民族的伟大复兴,就是汉字与其所承载的优秀传统文化的伟大复兴。(本文来源于《汉字文化》期刊2019年21期）
张宝臻,余涧坤[4]（2019）在《阳离子聚合物基因载体的研究进展》一文中研究指出阳离子聚合物是一类非常有应用前景的非病毒基因载体。与病毒载体比较,非病毒载体具有价格低廉、结构简单、低免疫原性等优点。聚乙烯亚胺(PEI)是目前研究最多的阳离子聚合物非病毒基因载体,具有较高的转染效率,常作为基因载体研究的阳性对照载体;聚氨基胺(PAAs)是由多氨基单体和还原敏感性交联剂聚合而成的线形或支化聚合物,具有水溶性佳、毒性低以及抗水解能力高等优点;聚氨基酯(PAEs)具有易降解的特性,细胞毒性较低;天然高分子生物材料具有良好的生物相容性。选择安全高效的基因载体是基因治疗的关键,深入了解阳离子聚合物载体的生物学性质、聚合物结构、转染效率以及细胞毒性之间的关系,可为设计构建安全、特异性高、具有高效基因递送效率的阳离子聚合物基因载体提供新的思路。(本文来源于《山东医药》期刊2019年29期）
李俊龙,刘小康,王祎[5]（2019）在《TFF1基因启动子双荧光素酶报告基因载体的构建及活性鉴定》一文中研究指出目的:构建含有野生型或突变型人叁叶因子1(Trefoil factor 1,TFF1)基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒,并研究雌激素对上述启动子转录活性的影响。方法:设计人野生型和突变型TFF1基因启动子的引物,扩增回收片段,将其克隆到含有荧光素酶报告基因的载体pGL3-Basic中构建重组质粒,经双酶切和测序鉴定后转染胆囊癌GBC-SD细胞,24h后采用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶的表达活性。结果:成功构建了野生型pGL3-TFF1质粒和雌激素应答元件(Estrogen response elements,ERE)位点突变的pGL3-TFF1-△ERE突变质粒,激活蛋白1(Activating protein-1,AP-1)位点突变的pGL3-TFF1-△AP-1突变质粒以及pGL3-TFF1-△ERE+△AP-1双突变质粒。经双荧光素酶报告基因检测分析,pGL3-TFF1质粒和pGL3-TFF1-△ERE突变质粒均具有基础转录活性,与对照组比较(P<0.001)。雌激素能进一步增强野生型TFF1启动子质粒和pGL3-TFF1-△ERE突变质粒的启动子转录活性(P<0.01),而对pGL3-TFF1-△AP-1突变质粒以及pGL3-TFF1-△ERE+△AP-1双突变质粒的活性无影响(P>0.05)。结论:本研究成功构建了野生型以及突变型TFF1启动子质粒,发现非经典雌激素受体结合部位——激活蛋白1(AP-1)位点对雌激素诱导的TFF1启动子转录活性增强发挥决定性作用。(本文来源于《四川生理科学杂志》期刊2019年03期）
[6]（2019）在《一种聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法及基因载体》一文中研究指出本发明公开一种聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法及基因载体,涉及基因载体技术领域。所述聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法:在惰性气氛下,向米糠多糖铁溶液中依次加入叁乙胺和N,N-羰基-二咪唑溶液,避光反应形成反应溶液;将聚乙烯亚胺溶液加入到所述反应溶液中避光反应形成粗样液,并在反应过程中控制混合溶液呈碱性;对所述粗样液进行透析,(本文来源于《合成树脂及塑料》期刊2019年04期）
付莹,崔韶晖,韩磊,王玥莹,马启晨[7]（2019）在《表面电荷对阳离子基因载体的影响》一文中研究指出阳离子基因载体表面带有大量正电荷,由于许多DNA和细胞膜表面带负电荷,因此阳离子基因载体表面电荷有利于提高结合DNA的效率,纳米粒子与细胞膜的吸附也受粒子表面电荷的影响。同时,其表面电荷也是产生细胞毒性的主要原因之一,因此揭示细胞毒性及其作用机制有利于开发出更安全高效的基因递送载体。本文综述了阳离子基因载体表面电荷对DNA结合能力、细胞摄入、转染效率以及细胞毒性及其作用机制的影响。(本文来源于《生命的化学》期刊2019年04期）
刘诗音[8]（2019）在《多功能纳米基因载体的制备与分析》一文中研究指出本文通过反向微乳聚合等化学方法,成功制备出一种集磁性、荧光于一体的SiO_2纳米粒子,并以多聚赖氨酸(PLL)对其表面进行修饰,修饰后的纳米粒子能够有效地与DNA结合和分离,并保护DNA免受DNaseI的降解。该纳米基因载体能够介导外源DNA转化至植物细胞当中,为纳米基因载体在转基因植物的研究中及应用打下了基础。(本文来源于《吉林农业》期刊2019年12期）
刘玲[9]（2019）在《以聚乙烯亚胺为骨架的肝靶向性基因载体的合成及应用研究》一文中研究指出肝癌是世界上致死率最高的肿瘤之一,也是我国发病率最高的肿瘤之一。基因治疗为肝癌的治疗提供了一种新的途径。在基因治疗中,除了治疗基因以外,安全高效的基因载体是解决限制基因治疗问题的又一关键因素。聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)是一种聚阳离子基因载体,分子中含有大量氨基,在生理条件下,可以将基因通过静电引力结合并包裹压缩,发挥良好的基因保护作用;此外,PEI具有极强质子缓冲能力,能促进载体复合物进行内涵体逃逸,提高基因递送效率。因此,PEI被广泛研究,BPEI25 kDa和LPEI22 kDa被视为基因载体的“黄金标准”。研究发现,PEI的基因转染效率和毒性与其相对分子质量有关。高相对分子质量的PEI基因转染效率较高,但毒性却较大;低相对分子质量的PEI虽然不具有毒性,但也几乎不显示基因转染能力。因此,将低相对分子质量PEI通过生物可降解键连接成高相对分子质量PEI,可以在保证其在低毒性的同时,提高基因转染效率。本课题使用生理活性小分子肌醇(inositol)通过氨基甲酸酯键将低相对分子质量的BPEI800连接成高相对分子质量的PEI-inositol(PI),研究PI/pDNA的理化性质和生物学功能。结果发现,PEI与肌醇摩尔配比为1:3的PI聚合物能将质粒包裹成球状纳米粒子,其相对分子质量为8149,低于常用BPEI25 kDa。该聚合物在N/P40时具有最高基因转染效率,转染效率强于BPEI25 kDa,而且毒性低于BPEI25 kDa。体内分布研究显示,该聚合物在给药二天后具有最高luciferase蛋白表达量,且主要分布于小鼠肝脏。该载体作为肝靶向性基因载体有进一步的研究价值。尽管PI的毒性相比于BPEI25 kDa有一定的改善,但其毒性需要进一步降低以用于体内基因递送。与BPEI相比,LPEI具有较低毒性。因此,选用LPEI2500与肌醇通过生物可降解键连接,得到LPEI-inositol(LPI)类基因载体。LPI类聚合物在HepG2和HeLa细胞上的基因转染效率与LPEI25 kDa相当。体外毒性研究显示,线状LPI的毒性低于LPEI25 kDa,而且也远远低于PI。体内分布研究显示,该聚合物在给药一天后具有最高luciferase蛋白表达量,且主要分布于小鼠肝脏。因此,该类载体作为低毒的基因载体值得进一步研究。系统给药时,基因与载体形成的复合物必需延长体内循环时间,才有更多的机会通过EPR效应聚集于肿瘤组织。PEG化修饰能减少聚阳离子基因载体被内皮网状系统吞噬,延长体内循环时间。因此,本课题在PI上嫁接不同比例的mPEG,研究mPEG的嫁接对载体复合物的理化性质和生物学功能的影响。合成得到7种mPEG-PI(PPI)类聚合物。研究发现,低mPEG嫁接比率的PPI载体复合物的粒径和电位与PI相当;高嫁接比率的PPI复合物的粒径明显增大,电位变小。即使嫁接低比率的mPEG,载体复合物在缓冲盐溶液中的稳定性均能大大提高。嫁接mPEG后,载体对基因的转染效率降低,尤其是高mPEG嫁接比例的PPI,几乎不显示基因转染能力。体内分布研究显示,mPEG的嫁接能使载体系统通过被动靶向更多地聚集于肿瘤组织。PEG的嫁接提高了载体复合物在体内的循环时间,但同时也降低了细胞对载体系统的摄取能力。在载体表面接枝靶向配体,可以通过受体-配体介导的内吞作用增加细胞对载体系统的摄取。肝细胞和肝癌细胞表面高表达脱唾液酸糖蛋白受体(ASGPR),该受体与半乳糖具有高亲和力。本课题将乳糖酸(含半乳糖)修饰的PEG(LA-PEG)嫁接到PI上,形成新的基因载体LA-PegPI。转染效率最高的基因载体中各组分的配比为LA:PEG:PI=0.06:0.15:1。该载体能将基因进行良好包裹,在盐溶液中具有较好的稳定性。LA-PegPI/pluc复合物在ASGPR高表达的HepG2细胞上具有高基因转染能力和低毒性。体内研究发现,LA-PegPI能将基因递送至小鼠肝脏部位,且基因在肝实质细胞中表达。因此,LA-PegPI是一种高效、低毒,并具有肝靶向作用的基因载体,具有良好的应用前景。在此基础上,使用LA-PegPI负载免疫刺激因子pIL15,研究LA-PegPI/pIL15对小鼠原位肝癌的治疗作用。结果发现,LA-PegPI/pIL15能显着抑制小鼠原位肝肿瘤的生长,并显着提高荷瘤小鼠生存期,其作用呈剂量依赖性。LA-PegPI/pIL15抑制肿瘤的作用机制可能与活化外周血和脾脏中的T细胞和NK细胞,促使T细胞和NK细胞增殖,增加外周血细胞因子水平,并增加T细胞和NK细胞的肿瘤组织浸润有关。与此同时,LA-PegPI/pIL15还能抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,从而发挥较强的抗肿瘤作用。此外,实验中意外发现载体空质粒对照组LA-PegPI/pluc也能中等程度地抑制肿瘤生长和延长小鼠生存期,其作用可能与促进NK细胞增殖及增加NK细胞肿瘤组织渗透性有关,这说明LA-PegPI也能刺激机体免疫,可以作为一种免疫佐剂。因此,LA-PegPI/pIL15是一种高效肿瘤免疫基因治疗试剂,值得进一步研究。(本文来源于《中国矿业大学》期刊2019-05-01）
李书挺[10]（2019）在《酸敏感超支化聚酰胺基因载体的设计、制备及转染性能研究》一文中研究指出基因治疗作为遗传性疾病治疗的一种有效方法,随着不断的研究与发展,其在获得性疾病(如癌症)的治疗方面也展现了较大的前景和潜力。基因治疗是将新的基因导入细胞,通过修复或添加基因,以治疗疾病。基于此,基因治疗的关键在于得到一种合适的基因载体,可以安全高效地将外源正常基因导入到靶细胞。病毒载体作为一种可以高效转染的基因载体,因其具有免疫原性等安全问题,大大限制了其发展与应用;而非病毒载体因其良好的生物安全性、易制备、价格低等优点也得到了很好的发展,例如阳离子脂质和阳离子聚合物等,其在基因治疗方面具有很好的潜力。尽管阳离子聚合物作为一种成功的基因传递载体已经得到广泛的应用,但由于以下的障碍,其临床应用仍然受到限制。阳离子类型聚合物面临的障碍主要包括其毒性、内涵体逃逸、血液相容性、靶点有效的细胞内传递、复合物释放DNA以及最终的基因表达。早在30年前,阳离子聚合物作为基因载体已有报道,并且随着大量研究者的探究与发现,阳离子聚合物已经作为一种不可或缺的基因载体应用在基因治疗上。聚阳离子与带负电的DNA通过正负电荷吸引形成纳米复合物,从而使得带负电的DNA可以安全有效地进入到目的细胞内起到治疗作用。作为基因载体的阳离子聚合物主要可以分为线性聚合物和树形聚合物两大类。树形的阳离子聚合物与线性的阳离子聚合物相比较,其形貌呈现出良好的叁维球形结构,并且其表面携带大量的末端官能团、溶解性能良好、溶液粘度和熔融粘度都较小、大量的内部空腔结构等优异性能。树形聚合物所拥有的这些优异性能使其作为基因载体具有广阔的应用前景。有研究进一步表明,可降解的树枝状阳离子聚合物的转染效率比不可降解的树枝状阳离子聚合物要高大约50倍,这表明阳离子聚合物的可降解性能极大地改善其转染效率,达到更好的治疗效果。超支化聚合物具备树形聚合物的优势且其合成方法较为简易,生产成本较低,因此超支化阳离子聚合物在基因载体方面的应用更具前景。因此开发一种新型的可降解的超支化阳离子基因载体,改善细胞毒性和转染效率变得非常有意义。我们旨在开发一种新型的超支化阳离子基因载体,并研究其作为基因载体的性能。本工作以二甘油为起始原料,通过简单的改变温度制备了线性和超支化阳离子聚合物。本论文主要通过以下几个部分展开:(1)在已报道合成的两端氨基的原酸酯单体基础上,使用该单体与丙烯酸酐反应得到丙烯酰原酸酯单体,丙烯酰原酸酯单体与N-氨乙基哌嗪反应,在20℃生成线性聚酰胺胺(LPOEAMAM),在50℃得到超支化聚酰胺胺(HPOEAMAM)。通过核磁共振波谱图确定线性POEAMAM和超支化POEAMAM结构。通过倒置荧光显微镜和稳态荧光光谱仪研究超支化POEAMAM和线性POEAMAM的荧光性质。通过酸碱滴定实验验证超支化POEAMAM的质子缓冲能力。(2)阳离子聚合物作为基因递送载体的必要条件是它们能够将DNA浓缩成纳米尺寸的复合物。首先通过琼脂糖电泳验证POEAMAM压缩DNA的能力,然后经肝素钠置换实验进一步验证压缩能力。超支化POEAMAM复合物的粒径稳定在100 nm左右,电位稳定在+15 mV左右。在pH 5.5时,HPOEAMAM/DNA复合物在48 h释放DNA由87%增加至92%,LPOEAMAM/DNA复合物在48 h释放DNA由54%增加至72%。(3)通过MTT法检测线性POEAMAM和超支化POEAMAM的细胞毒性,结果显示细胞存活率均在95%以上,表明聚合物具有优异的生物相容性。通过平面细胞模型和叁维细胞模型考察POEAMAM/DNA的转染效率。倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测结果显示超支化POEAMAM在平面细胞中具有很好的转染效率。激光共聚焦结果显示超支化POEAMAM在10%血清条件下的转染效率优于PEI-25K。本文报道了一种由丙烯酰原酸酯单体与N-氨乙基哌嗪,通过迈克尔加成聚合法合成的新型超支化POEAMAM。本研究发现新合成的聚合物具有良好的生物相容性高的转染效率。因此,在基因治疗中超支化POEAMAM具有巨大的潜力。(本文来源于《安徽大学》期刊2019-05-01）
基因载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探究T细胞携载人IL-12基因对T细胞生长和功能的影响。方法:构建表达人IL-12基因的PiggyBac转座子载体,在电转下,将携载IL-12基因的转座子系统导入新鲜分离的淋巴细胞获得持续稳定表达。通过T细胞表型分析及体外功能实验研究初步探讨T细胞携载IL-12基因的可行性。结果:借助电转可将携载有IL-12基因的PiggyBac转座子系统高效导入新鲜分离的淋巴细胞并获得高效稳定表达;IL-12的分泌可促进T细胞增殖,增加CD4阳性细胞百分比;携载IL-12基因的T细胞在肿瘤细胞刺激下可进一步促进IL-12分泌,增强T细胞的杀瘤活性。结论:在电场作用下,Piggybac转座子系统可将人IL-12基因高效载入并整合至T细胞基因组获得持续稳定表达,分泌的功能性IL-12可促进T细胞增殖,增强杀瘤活性。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因载体论文参考文献
[1].林浩,何东升,涂家生.聚乙烯亚胺非病毒基因载体结构修饰研究进展[J].药学研究.2019
[2].邹云莲,胡边,张李琛,张进萍,朱学锴.人IL-12基因载体的构建及其在T细胞中的表达研究[J].中国免疫学杂志.2019
[3].郑继江.汉字:中华民族精神的基因载体[J].汉字文化.2019
[4].张宝臻,余涧坤.阳离子聚合物基因载体的研究进展[J].山东医药.2019
[5].李俊龙,刘小康,王祎.TFF1基因启动子双荧光素酶报告基因载体的构建及活性鉴定[J].四川生理科学杂志.2019
[6]..一种聚乙烯亚胺接枝米糠多糖铁的制备方法及基因载体[J].合成树脂及塑料.2019
[7].付莹,崔韶晖,韩磊,王玥莹,马启晨.表面电荷对阳离子基因载体的影响[J].生命的化学.2019
[8].刘诗音.多功能纳米基因载体的制备与分析[J].吉林农业.2019
[9].刘玲.以聚乙烯亚胺为骨架的肝靶向性基因载体的合成及应用研究[D].中国矿业大学.2019
[10].李书挺.酸敏感超支化聚酰胺基因载体的设计、制备及转染性能研究[D].安徽大学.2019
论文知识图
