siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1沉默效果研究

论文摘要

目的利用siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1的表达进行干扰,并对基因沉默效果进行评价。方法人工合成家蝇cyp6d1基因的siRNA,编号为C474、C1226、C1446;采用微量注射方式将其导入实验室筛选出的cyp6d1基因高表达家蝇品系个体中;采用荧光染料PCR法对RNA干扰处理组和对照组家蝇体内mRNA的表达量进行定量测定,观察不同处理组cyp6d1基因的沉默效应。结果微量注射导入C474、C1226、C1446和阴性对照的家蝇cyp6d1基因mRNA表达量组间差异有统计学意义(F=14.948,P=0.000),组内比较显示各处理组与阴性对照组mRNA的表达量差异均有统计学意义。注射C474、C1226、C1466的处理组之间差异无统计学意义(F=2.615,P=0.101)。相对于阴性对照,注射了C474、C1226、C1466的处理组mRNA抑制率分别为63.74%、72.28%和65.99%。结论采用微量注射方式将人工合成的siRNA C474、C1226、C1446导入家蝇体内,可以在mRNA水平上对其cyp6d1基因的表达实现有效沉默。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 试剂
•   1.2 仪器
•   1.3 试虫
•   1.4 cyp6d1基因干扰
•     1.4.1 siRNA的设计与合成
•     1.4.2 干扰RNA的导入
•     1.4.3 RNA干扰效果评价
•   1.5 统计学处理
• 2 结果
•   2.1 siRNA导入
•   2.2 cyp6d1基因沉默效果评价
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 孔庆鑫,韦凌娅,沈林海,王英红,曹阳

关键词: 家蝇,基因,干扰,抗性,荧光定量,拟除虫菊酯

来源: 中国预防医学杂志 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 杭州市疾病预防控制中心

基金: 浙江省医药卫生科技计划项目(2018KY637),杭州市科技发展计划项目(20140733Q02)

分类号: R384.2

DOI: 10.16506/j.1009-6639.2019.11.020

页码: 1049-1053

总页数: 5

文件大小: 1134K

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