导读:本文包含了硫代反义寡核苷酸论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:核苷酸,细胞,端粒,色谱,凋亡,活性,舌癌。
硫代反义寡核苷酸论文文献综述
林志鸿,谢良地,吴可贵,李庚山,蔺佩鸿[1]（2014）在《硫代磷酸化修饰的反义TGF-β_1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖》一文中研究指出目的:探讨反义转化生长因子β1(TGF-β1)寡核苷酸对血管损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转变的影响及对内膜增殖的作用。方法:在跨过TGF-β1cDNA序列的起始密码区ATG范围内,设计含15个碱基、无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-β1寡核苷酸(AS TGF-β1)及对照的正义(与反义寡核苷酸互补)寡核苷酸(S TGF-β1)。球囊导管损伤SD大鼠颈总动脉,术后7 d取出正常或损伤的血管进行VSMCs的培养,RT-PCR及蛋白印迹分别检测VSMCs生物学标志平滑肌22α蛋白(SM22α)、基质Gla蛋白和骨桥蛋白,以及TGF-β1和纤维连结蛋白(fibronectin,FN)mRNA和蛋白质的表达。采用ALZET泵皮下注射硫代磷酸化修饰AS TGF-β1及S TGF-β1(90μg·kg-1·d-1),连续给药28 d后测定血管内膜与中膜的面积比(I/M)。结果:(1)AS TGF-β1对血管损伤后VSMCs TGF-β1mRNA表达并无明显作用,但呈浓度依赖性抑制TGF-β1蛋白质的表达,而S TGF-β1不影响TGF-β1mRNA和蛋白质的表达。(2)AS TGF-β1呈浓度依赖性抑制血管损伤后VSMCs DNA的合成,而不管是AS TGF-β1还是S TGF-β1对正常VSMCs DNA的合成均无明显的量效作用;同时AS TGF-β1显着抑制了血管损伤后VSMCs FN的合成。(3)AS TGF-β1显着促进了VSMCs SM22αmRNA的表达,但抑制了基质Gla蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达,这种相反的作用在0.01及0.1μmol/L的水平最为明显。(4)硫代磷酸化修饰的AS TGF-β1治疗28 d后,显着抑制了颈动脉损伤后新生内膜的增殖,I/M比对照组下降了68%。结论:AS TGF-β1特异性抑制了VSMCs TGF-β1蛋白的表达,抑制血管损伤后VSMCs增殖及合成、分泌FN,减轻血管损伤后新生内膜的增殖。上述作用可能与逆转血管损伤后VSMCs的表型转变有关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2014年08期）
李康,齐向云,李庆平,夏燕平,杨静[2]（2014）在《硫代磷酸反义寡核苷酸prop5对流感病毒进入细胞的抑制作用》一文中研究指出目的研究硫代磷酸反义寡核苷酸prop5对流感病毒感染进入细胞的影响。方法采用流感病毒感染A549细胞模型,设立随机序列(prop5R)和正义序列(prop5S)作为阴性对照,收集细胞培养液,采用实时荧光定量PCR检测病毒RNA拷贝数,评价反义寡核苷酸对病毒吸附和进入的影响;进一步通过血凝抑制实验检测prop5对流感病毒吸附细胞的影响,溶血抑制实验检测prop5对流感病毒进入细胞的影响。结果 prop5能够抑制流感病毒A/Jingfang/1/86(H1N1)感染A549细胞,对流感病毒吸附细胞过程没有影响,prop5能够抑制A/Jingfang/1/86(H1N1)、A/Lufang/9/93(H3N2)、A/FM/1/47(H1N1)和A/PR/8/34(H1N1)介导的膜融合。结论 prop5能抑制流感病毒进入细胞,这种额外的活性增强了prop5的抗病毒能力。(本文来源于《国际药学研究杂志》期刊2014年01期）
贾巧云,邓新秀,高婵,鲁丹丹,游松[3]（2013）在《反相离子对高效液相色谱法分析硫代反义寡核苷酸CT102相关杂质》一文中研究指出目的:建立硫代反义寡核苷酸CT102及其相关杂质的反相离子对高效液相色谱(IP-RP-HPLC)分析方法。方法:对可能存在的3'n-1、5'n-1序列、5'(P=S/O)不完全硫代序列与CT102全长序列(n)的分离情况进行了考察,采用的色谱柱为XBridge OST C18 Column(50 mm×4.6 mm,2.5μm);流动相A为100 mmol.L-1 HFIP/31.6 mmol.L-1 TEA,10%甲醇(V/V));流动相B为100 mmol.L-1HFIP/31.6 mmol.L-1TEA,20%甲醇,洗脱梯度为0～12 min,17%→43%B;柱温为55℃;流速为0.4 mL.min-1;检测波长为260 nm。结果:在优化的条件下,合成过程中的主要杂质5'n-1、3'n-1以及5'(P=S/O)均能够实现与全长全硫代序列n基线分离。该法用于含量测定,CT102在50-600μg·mL-1浓度范围内线性良好,r=0.9999,检出限为2.5μg·mL-1,精密度与重现性良好,RSD小于2%,平均回收率为100.1%,(RSD=1.7%,n=9)。结论:该方法可应用于CT102原料药的纯度检测和含量测定,为该药物的深入研究提供保证。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2013年07期）
高秀梅,孙大鹏,张凤香[4]（2012）在《全硫代反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响》一文中研究指出目的本研究探讨全硫代反义寡核苷酸(PS-ASODN)对乳腺癌MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞生长、迁移、侵袭的影响。方法本实验将PS-ASODN经脂质体转染作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞,将实验分为空白对照组、对照正义全硫代寡核苷酸(PS-SODN)组和不同剂量的PS-ASODN组;脂质体介导的PS-ASODN和PS-SODN作用于乳腺癌MDA-MB-231细胞后,分别采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、酶联免疫吸附法(ELISA)、流式细胞术、Transwell小室迁移、侵袭实验检测细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡、细胞迁移、侵袭能力的影响。结果终浓度为1、3及5μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞端粒酶活性及细胞的增殖均有抑制作用,与空白对照组比较差异显着(P<0.01),并呈一定剂量依赖性;ELISA法检测结果,1、3及5μmol/L的PS-ASODN对MDA-MB-231细胞作用72 h后端粒酶皆为阴性,表明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性,对照组端粒酶皆为阳性。1、3及5μmol/L的PS-ASODN作用24 h可以明显抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭能力(P<0.01)。结论 PS-ASODN能有效抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞的生长、促进凋亡、抑制其侵袭和迁移能力,其机制可能是通过PS-ASODN降低端粒酶活性而实现。(本文来源于《山东医药》期刊2012年16期）
崔凯,李洪秀,鞠培新,秦书俭[5]（2012）在《全硫代反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞生长及端粒酶活性的影响》一文中研究指出目的采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(ASODN)对骨肉瘤细胞HOS细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法脂质体介导的细胞转染后,PS-ASODN和PS-SODN分别作用于骨肉瘤细胞HOS细胞后并培养24、48、72h,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)、吖啶橙染色法检测骨肉瘤细胞HOS细胞的端粒酶活性、细胞形态改变。结果端粒酶PS-ASODN作用骨肉瘤细胞HOS细胞72h后端粒酶活性表达为阴性。PS-ASODN作用的骨肉瘤细胞HOS细胞有明显凋亡现象,凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩。结论 PS-ASODN对端粒酶活性的抑制率与PS-ASODN的浓度和作用时间呈依赖关系,即抑制率随着反义寡核苷酸的浓度和作用时间的增加而增大。(本文来源于《中国实用医药》期刊2012年07期）
倪伟民,郭闻师,衣服新,邱建武,刘兴波[6]（2010）在《全硫代反义寡核苷酸对脑胶质瘤细胞端粒酶活性作用》一文中研究指出目的本研究采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN)对脑胶质瘤HO-8910细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法本实验将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)经lipotap脂质体转染作用于脑胶质瘤细胞系C6,然后分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色实验、酶联免疫吸附试验(ELISA)法和流式细胞术检测C6脑胶质瘤细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果经MTT法检测,PS-ASODN对C6细胞生长具有明显的抑制作用和诱导细胞凋亡,1.0μMPS-ASODN处理后24h细胞生长抑制率为12.93%,且随着时间的延长,抑制作用逐渐增强;给药72h对细胞生长抑制率达到最高,为50.81%,有相应的浓度依赖关系。ELISA法检测结果 ,0.5～1.5μM的PS-ASODN对C6细胞作用72h后端粒酶皆为阴性,表明PS-ASODN能够抑制端粒酶活性,对照组端粒酶皆为阳性。结论端粒酶PS-ASODN对体外培养的脑胶质瘤C6细胞的增殖有明显的浓度、时间依赖性抑制作用;抑制脑胶质瘤C6的端粒酶活性和诱导C6脑胶质瘤细胞发生凋亡,可能是端粒酶PS-ASODN抑制C6细胞增殖的主要机制。(本文来源于《解剖科学进展》期刊2010年03期）
刘学,单伟,曾瑞霞,房艳,李德华[7]（2009）在《全硫代反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生长抑制作用》一文中研究指出目的采用针对人端粒酶hTR基因的反义寡聚脱氧核苷酸,探讨端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸(antisense oligodeoxy nucleotides,ASODN)对卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响。方法将实验分为空白对照组、脂质体对照组、端粒酶全硫代正义寡聚脱氧核苷酸(Phosphorathioatesense oligodeoxy nucleotides,PS-SODN)组和不同剂量的全硫代反义寡聚脱氧核苷酸(Phosphorat-hioate an-tisense oligodeoxy nucleotides,PS-ASODN)组;②脂质体介导的细胞转染后,PS-ASODN和PS-SODN分别作用于卵巢癌HO-8910细胞后并培养24、48、72h,分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)、吖啶橙染色法、四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)、流式细胞术检测HO-8910细胞的端粒酶活性、细胞形态、体外增殖、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果ELISA法检测结果显示端粒酶PS-ASODN作用卵巢癌HO-8910细胞72h后端粒酶活性表达为阴性,说明端粒酶PS-ASODN能够抑制端粒酶活性;②吖啶橙染色观察细胞形态:PS-ASODN作用的卵巢癌HO-8910细胞有明显凋亡现象,凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩,说明PS-ASODN能够促进卵巢癌HO-8910细胞凋亡;③MTT实验:PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖(P<0.0l),并呈一定剂量和时间依赖关系;④流式细胞仪检测细胞凋亡和周期:与空白对照组比较,PS-ASODN组G0/G1期细胞明显增多,差异显着(P<0.01);在G0/G1期前出现亚二倍体凋亡峰,表明细胞被阻止在G1/S期。结论PS-ASODN作用于卵巢癌HO-8910细胞后,卵巢癌HO-8910细胞增殖受到明显抑制,并出现凋亡;②PS-ASODN对端粒酶活性的抑制率与PS-ASODN的浓度和作用时间呈依赖关系,即抑制率随着反义寡核苷酸的浓度和作用时间的增加而增大;③以端粒酶RNA模板区为靶点的PS-ASODN明显抑制卵巢癌HO-8910细胞的增殖,其机制可能是通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞的凋亡,PS-ASODN对卵巢癌的治疗具有重要价值。(本文来源于《中国实用医药》期刊2009年08期）
刘学,单伟,曾瑞霞,房艳,李德华[8]（2009）在《全硫代反义寡核苷酸对肺癌细胞生长及端粒酶活性的影响》一文中研究指出目的将互补于hTR模板区的全硫代修饰型反义寡核苷酸(PS-ASODN)作用于肺癌细胞NCI-H292,探讨其对肺癌的治疗价值。方法PS-ASODN经lipotap脂质体转染作用于NCI-H292细胞,采用MTT法、ELISA法和流式细胞术检测NCI-H292细胞的体外增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变。结果①MTT法检测,1.0μmol/LPS-ASODN处理后24h细胞生长抑制率为12.86%,且随着时间的延长,抑制作用逐渐增强。②ELISA法检测结果,0.5～1.5μmol/L的PS-ASODN对NCI-H292细胞作用72h后端粒酶皆为阴性,对照组阳性。③流式细胞仪检测结果:端粒酶PS-ASODN转染NCI-H292细胞培养72h后,检测到细胞早期凋亡率增加,凋亡率为15.3%,与对照组相比有极显着意义(P<0.01)。PI染色结果细胞被阻止在G1/G0期,S期比率有所降低,降为14.5%。结论①端粒酶PS-ASODN对NCI-H292细胞增殖有明显的抑制作用,其抑制作用具有浓度、时间依赖性。②端粒酶PS-ASODN能明显地抑制NCI-H292的端粒酶活性。(本文来源于《医学综述》期刊2009年06期）
于大海,韦舜,曹滢,陈海波,郝洁[9]（2008）在《硫代磷酸化反义寡核苷酸对耐放疗舌癌细胞MDR1基因和P-gp表达的抑制作用》一文中研究指出目的:研究反义硫代磷酸化寡核苷酸(phosphorothioate antisense o1igonuc1eotide,PS-ASOs)抑制人舌癌细胞耐放疗株Tca8113多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,MDR1)以及MDR1蛋白(P-gp)表达的作用。方法:人工合成互补于MDR1基因mRNA特定片断的硫代磷酸化正反义寡核苷酸;PS-ASOs浓度分别为0.1μmol/L,0.25μmol/L,0.5μmol/L,以正义寡核苷酸作为实验对照,未转染的耐放疗组为空白对照,以5μl/ml脂质体Lipofectamine为载体转染耐放疗的Tca8113细胞株;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)测定转染后MDR1 mRNA表达,流式细胞技术(FCM)测定细胞膜P-gp表达。结果:与正义组和空白对照组相比,转染PS-ASOs后12h,MDR1 mRNA和P-gp表达降低,转染24h,各剂量组表达均降至最低,在转染48h后,基本恢复到转染前水平,而正义组和空白对照组在各时段及各剂量组均无统计学差异;双因素方差分析:PS-ASOs不同浓度(P=0.00)、不同作用时间(P=0.00)对下调MDR1 mRNA、P-gp表达差异显着,结论:PS-ASOs能降低MDR1基因以及蛋白的表达;PS-ASOs的作用具有浓度依赖性和时间依赖性。(本文来源于《临床口腔医学杂志》期刊2008年11期）
张宏燕,鲁丹丹,吴利霞,周喆,王升启[10]（2008）在《硫代反义寡核苷酸药物FT19有关物质的分析》一文中研究指出为了进行硫代反义寡核苷酸药物FT19的质量控制研究,建立了用阴离子交换高效液相色谱(AX-HPLC)和毛细管凝胶电泳(CGE)分析自行合成的FT19有关物质的方法。设计合成了FT19的硫代不完全序列(P=O)1和短序列(n-x)并将它们作为已知杂质。在AX-HPLC上,使用的分析柱为DNAPacPA-100(4mm×250mm);流动相A为10mmol/LNaOH-0.1mol/LNaCl,流动相B为10mmol/LNaOH-3mol/LNaCl;梯度洗脱条件为流动相B液在8min内从60%升至100%;流速1mL/min;柱温40℃;检测波长为260nm。CGE所用毛细管规格为内径100μm,总长度为31cm,有效长度为20cm;电泳缓冲溶液为叁羟甲基氨基甲烷(Tris)-硼酸-7mol/L尿素,pH8.5;采用电动进样,进样电压-10kV;分离胶为250g/L的聚丙烯酰胺;检测波长为254nm。结果表明,FT19与硫代不完全的(P=O)1序列在AX-HPLC上能够达到基线分离,与短序列(n-1)在CGE上能达到基线分离。说明AX-HPLC和CGE联合应用能够很好地分析FT19中的有关物质。(本文来源于《色谱》期刊2008年05期）
硫代反义寡核苷酸论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究硫代磷酸反义寡核苷酸prop5对流感病毒感染进入细胞的影响。方法采用流感病毒感染A549细胞模型,设立随机序列(prop5R)和正义序列(prop5S)作为阴性对照,收集细胞培养液,采用实时荧光定量PCR检测病毒RNA拷贝数,评价反义寡核苷酸对病毒吸附和进入的影响;进一步通过血凝抑制实验检测prop5对流感病毒吸附细胞的影响,溶血抑制实验检测prop5对流感病毒进入细胞的影响。结果 prop5能够抑制流感病毒A/Jingfang/1/86(H1N1)感染A549细胞,对流感病毒吸附细胞过程没有影响,prop5能够抑制A/Jingfang/1/86(H1N1)、A/Lufang/9/93(H3N2)、A/FM/1/47(H1N1)和A/PR/8/34(H1N1)介导的膜融合。结论 prop5能抑制流感病毒进入细胞,这种额外的活性增强了prop5的抗病毒能力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
硫代反义寡核苷酸论文参考文献
[1].林志鸿,谢良地,吴可贵,李庚山,蔺佩鸿.硫代磷酸化修饰的反义TGF-β_1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖[J].中国病理生理杂志.2014
[2].李康,齐向云,李庆平,夏燕平,杨静.硫代磷酸反义寡核苷酸prop5对流感病毒进入细胞的抑制作用[J].国际药学研究杂志.2014
[3].贾巧云,邓新秀,高婵,鲁丹丹,游松.反相离子对高效液相色谱法分析硫代反义寡核苷酸CT102相关杂质[J].药物分析杂志.2013
[4].高秀梅,孙大鹏,张凤香.全硫代反义寡核苷酸对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响[J].山东医药.2012
[5].崔凯,李洪秀,鞠培新,秦书俭.全硫代反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞生长及端粒酶活性的影响[J].中国实用医药.2012
[6].倪伟民,郭闻师,衣服新,邱建武,刘兴波.全硫代反义寡核苷酸对脑胶质瘤细胞端粒酶活性作用[J].解剖科学进展.2010
[7].刘学,单伟,曾瑞霞,房艳,李德华.全硫代反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生长抑制作用[J].中国实用医药.2009
[8].刘学,单伟,曾瑞霞,房艳,李德华.全硫代反义寡核苷酸对肺癌细胞生长及端粒酶活性的影响[J].医学综述.2009
[9].于大海,韦舜,曹滢,陈海波,郝洁.硫代磷酸化反义寡核苷酸对耐放疗舌癌细胞MDR1基因和P-gp表达的抑制作用[J].临床口腔医学杂志.2008
[10].张宏燕,鲁丹丹,吴利霞,周喆,王升启.硫代反义寡核苷酸药物FT19有关物质的分析[J].色谱.2008
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