短期重复口服鸡α干扰素体内抑制H9N2亚型流感病毒复制

论文摘要

为研究口服鸡α干扰素最佳的给药频率及与灭活病毒联合使用对鸡群的影响,文中将构建的原核表达质粒pET-22b-ChIFN-α转入大肠杆菌Escherichia coli BL21 （DE3）,宿主菌经诱导表达收获重组包涵体蛋白,经变性、纯化、复性后获得重组鸡α干扰素。SDS-PAGE结果分析显示,目的蛋白可在原核表达载体中高效表达,发酵液上清中目的蛋白浓度高达0.2 mg/mL,分子量约为20 kDa。将鸡α干扰素稀释至活性为2.5×104 U/羽份,与灭活H9N2亚型流感病毒联用以口服的方式免疫无特定病原（SPF）鸡群,试验结果表明,短期（96 h）重复免疫3次,鸡α干扰素具有较好的安全性,可诱导鸡群的外周血、脾脏及胸腺产生较高水平的抗病毒相关的诱导基因,攻毒结果显示鸡α干扰素使用次数为连续使用3–5 d鸡群排毒率最低,体现出较好的抗流感病毒能力。本研究结果获得了鸡α干扰素的最佳免疫频率及免疫时间,为干扰素的最佳临床应用方法提供理论支撑。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 质粒、菌、毒株及实验动物
•   1.2 主要试剂与设备
•   1.3 鸡α干扰素的制备及活性测定
•   1.4 鸡α干扰素口服疫苗的制备
•   1.5 动物安全性试验
•   1.6 SPF鸡免疫试验
•   1.7 荧光定量PCR测定体内干扰素诱导基因水平
•   1.8 攻毒检测SPF鸡排毒率
• 2 结果与分析
•   2.1 鸡α干扰素表达纯化及活性测定
•   2.2 动物安全性检测试验
•   2.3 口服鸡α干扰素对鸡群组织的影响
•     2.3.1 口服鸡α干扰素对外周血的影响
•     2.3.2 口服鸡α干扰素对胸腺的影响
•     2.3.3 口服鸡α干扰素对脾脏的影响
•   2.4 攻毒后鸡群排毒率检测
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王萌,宋洁,范文辉,刘丽蓉,黄卓然,杨成程,吴昊,刘文军,李晶

关键词: 鸡干扰素,亚型流感病毒,口服,短期重复

来源: 生物工程学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国科学院微生物研究所中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,中国科学院大学,北京海淀外国语实验学校

基金: 国家重点研发计划(No.2017YFD051105),中国科学院青年促进人才项目(No.2019091)资助~~

分类号: S852.65

DOI: 10.13345/j.cjb.180490

页码: 1029-1040

总页数: 12

文件大小: 1425K

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