导读:本文包含了菌毛基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:链球菌,基因,蛋白,柑桔,岛屿,卟啉,牙周炎。
菌毛基因论文文献综述
王雪吟,布日额,陈金龙,王金良,吴金花[1]（2019）在《牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿AP_1-AP_2-BP基因亚单位抗体的制备》一文中研究指出目的构建牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a亚单位重组抗原AP_1-AP_2-BP,并制备其多亚单位抗体,为后期研制新型免疫疫苗和检测试剂提供实验基础。方法利用延伸PCR技术构建了AP_1-AP_2-BP叁联基因,并将该串联基因进行转化,诱导,表达,纯化,并将纯化蛋白制作为抗原,对家兔免疫,制备多亚单位抗体,并通过亲和层析的方式从免疫后的血清中获得纯化的IgG,完成多亚单位抗体的制备。结果 AP_1-AP_2-BP叁基因串联重组工程菌株通过诱导、表达,对产物亲和层析等方法获得的纯化蛋白,其相对分子质量为65 kDa,其含量达到3.3 mg/mL,并具有较好的免疫原性。经间接ELISA可知,经过4周的免疫抗体的滴度已达到1∶5 600的水平。通过Protein A280测量数据表明,纯化后的IgG的含量高达9.1 mg/mL。结论牛乳腺炎无乳链球菌的菌毛岛屿AP_1-AP_2-BP叁基因串联重组工程菌经诱导、表达后获得的纯化蛋白AP_1-AP_2-BP多亚单位抗原有较好的免疫原性,为制备相应多亚单位抗体的制备提供了良好的多价抗原,同时为将研制新型工程疫苗及检测试剂提供了科学研究基础。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2019年03期）
李宾宾,余乃通,杨毅,王健华,张秀春[2]（2019）在《柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备》一文中研究指出菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein, PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种(GenBank登录号:CP001677.5)PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过EcoRⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni~(2+)-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500～1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。(本文来源于《植物保护》期刊2019年05期）
余乃通,李宾宾,黎维丽,杨毅,刘志昕[3]（2018）在《柑桔黄龙病菌亚洲种菌毛形成蛋白基因序列分析、原核表达及抗血清制备》一文中研究指出柑桔黄龙病菌菌毛形成蛋白(pilusformationprotein,408)是一种丰度较高的分泌蛋白。以感染柑桔黄龙病(HLB)的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,利用408基因的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段。序列分析结果表明海南琼海黄龙病菌408基因与柑桔黄龙病菌亚洲种psy62株系(GenBank登录号:CP001677.5)408基因序列一致。功能预测结果表明其含有一个与菌毛形成相关的N端结构域,以及C端含有两个高度保守的基序(Motif1和Motif2)。通过Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体p ET32a-408并将其转化BL21(DE3)大肠杆菌。重组菌经终浓度为1mmoL/LIPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni2+-NTA层析柱纯化,并以此为抗原,腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500～1∶10000的多克隆抗血清;Westernblot进一步分析表明,408蛋白多克隆抗血清特异性强。研究结果为柑桔黄龙病菌408蛋白功能研究和柑桔黄龙病菌的蛋白检测产品开发提供重要科学依据。(本文来源于《广东农业科学》期刊2018年11期）
蔺旭光[4]（2018）在《通辽地区犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及产肠毒素型大肠杆菌F41菌毛基因的克隆表达》一文中研究指出通辽是内蒙古自治区的养牛大市,素有“黄牛之乡”的美誉,近些年,随着养牛数量的增加,犊牛腹泻呈现逐年增长的趋势,已严重影响到养牛业的发展。产肠毒素型大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是导致犊牛腹泻的主要致病菌之一,该菌导致犊牛发病且有较高的发病率及死亡率。如何制定有效合理的预防措施及高效安全的疫苗预防犊牛腹泻大肠杆菌病迫在眉睫。本研究通过对通辽市地区从2015年4月年至2017年4月期间的各养殖场及散户进行犊牛腹泻大肠杆菌发病情况调查,并采集样品,对犊牛粪便的致病菌分离纯化。通过生化试验、16S rRNA方法鉴定菌种,并确定其O-抗原血清型。经鉴定共分离致病性大肠杆菌186株,其中O175是通辽本地区优势血清型,因其含有F41菌毛。采用PCR技术扩增分离菌菌毛F41毒力基因,并构建重组质粒pET-28a-F41,转化至BL21中表达F41蛋白,通过Western blotting鉴定该蛋白的反应原性。并通过软件分析菌毛F41生物学特性。结果显示,表达的F41蛋白有较好的反应原性。生物信息学分析可知,F41蛋白为疏水性蛋白,理论等电点为5.02,该蛋白无跨膜螺旋区,处于细胞膜外,亚细胞定位显示分泌信号通路位点占比0.05,为非分泌蛋白,且蛋白具有良好的抗原性及柔韧性。本研究克隆表达的F41蛋白具有良好抗原性,相关生物学分析为今后的疫苗研究提供相应参考依据。(本文来源于《内蒙古民族大学》期刊2018-06-01）
布日额,王金良,吴金花,锡林高娃,陈金龙[5]（2018）在《牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿辅助蛋白AP1、BP、AP2叁基因的串联表达及其免疫原性研究》一文中研究指出为探究无乳链球菌菌毛岛屿3个亚基AP1、AP2、BP融合蛋白的抗原性,本研究根据该3个亚基基因的主要抗原结构域序列设计并合成引物,通过重迭延伸PCR技术获得上述3个亚基的串联核苷酸片段,并插入pET-30a(+)载体,转化至BL21(DE3)感受态细胞后诱导表达,表达蛋白经亲和层析纯化后进行western blot鉴定和小鼠免疫实验。结果表明,AP1-AP2-BP融合抗原具有良好的反应原性和免疫原性。本研究为进一步研究无乳链球菌基于AP1-BP-AP2融合蛋白的致病机制、检测制剂及亚单位疫苗研制提供了实验依据。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2018年02期）
黄书伦,郑凯文,胡洋,李章程,程方俊[6]（2017）在《鸭源大肠杆菌Ⅰ型菌毛的鉴定及FimA、FimH基因特征分析》一文中研究指出为了解川渝部分地区鸭源大肠埃希菌Ⅰ型菌毛产生情况及分子特征,采用MSHA/MRHA试验、PCR扩增Ⅰ型菌毛基因(FimA、FimH)进行菌毛类型鉴定;通过分析FimA氨基酸序列的亲水性、抗原性、表面可及性来预测抗原位点。MSHA/MRHA试验结果显示,MSHA检测阳性率为44.3%;PCR检测FimA阳性率为63.41%,FimH阳性率为100%。氨基酸序列比对结果显示:FimA氨基酸序列与比对株大肠埃希菌(ECOR61)相比,存在19个差异位点;FimH氨基酸序列与比对株(ECOR45)相比,仅少数菌株出现1~2个氨基酸位点差异,表明该片段高度保守。对FimA氨基酸序列进行抗原位点预测,结果显示,多数菌株抗原表位共同区域分布在84~88、142~146、149~150位氨基酸之间,除上述位点外,部分菌株在101~105、130~134位氨基酸出现抗原表位。(本文来源于《浙江农业学报》期刊2017年12期）
唐路,薛栋,白雨豪,王鹏程,陆夏[7]（2017）在《颈动脉粥样硬化斑块中牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA基因型的分布研究》一文中研究指出目的检测牙龈卟啉单胞菌菌毛不同fimA基因型在颈动脉粥样硬化斑块中的分布。方法选取需要进行颈动脉内膜剥脱术的患者47例,收集术中分离的颈动脉粥样硬化斑块和患者龈下菌斑,用16S rRNA PCR检测牙龈卟啉单胞菌菌毛不同fimA基因型的分布。结果在47例患者中,牙龈卟啉单胞菌在龈下菌斑和颈动脉粥样硬化斑块中的检出率分别为72.3%和46.8%,在同一患者同时检出率为40.4%。Type Ⅱ fimA在龈下菌斑和颈动脉粥样硬化斑块中的检出率最高,分别为76.4%和81.8%;其次为Type Ⅳ fimA,检出率分别为50%和40.9%;这两种基因型的检出率显着高于其他基因型。牙龈卟啉单胞菌Type Ⅴ fimA基因型在龈下菌斑和动脉粥样硬化斑块中均未检出。结论牙龈卟啉单胞菌及其不同fimA基因型同时在龈下菌斑和颈动脉粥样硬化斑块中被检出,Type Ⅱ和Ⅳ fimA基因型牙龈卟啉单胞菌作为主要的定植菌,可能在颈动脉粥样硬化发生和发展中起到了一定的作用。(本文来源于《现代口腔医学杂志》期刊2017年06期）
王万玉,杨丙烨,童亚萍,胡方平,蔡学清[8]（2017）在《西瓜噬酸菌菌毛基因Aave-2726的功能研究》一文中研究指出西瓜细菌性果斑病是以西瓜、甜瓜等为主的葫芦科作物上一种严重的世界性病害,主要是通过种子传播。据报道,植物病原细菌的Ⅳ型菌毛与其定殖、表面黏附、遗传物质摄取、生物膜形成和毒力因子的注入等有关。NCBI上关于西瓜噬酸菌菌毛基因Aave-2726的注释为hvpothetical protein,即功能尚不明确,本研究通过定点突变和互补,并测定了生物学特性。结果表明菌毛基因Aave-2726缺失后病菌的游动性减弱、生物膜形成能力降低,互补菌株的游动性和生物膜形成能力恢复;缺失菌株在NA培养基上的菌落形态发生变化,晕圈宽度变窄,互补后菌落的晕圈形成能力部分恢复;缺失菌株对甜瓜和西瓜幼苗的致病性降低,互补后对甜瓜和西瓜幼苗的致病力部分恢复;但是缺失菌株的群体感应和过敏性反应没有变化。试验结果证明菌毛基因Aave-2726与西瓜噬酸菌的致病性、游动性和生物膜的形成有关。(本文来源于《中国植物病理学会2017年学术年会论文集》期刊2017-07-25）
白文丽,吴金花,锡林高娃,布日额,王华[9]（2017）在《奶牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a骨架蛋白BP基因的克隆及其序列分析》一文中研究指出目的获得通辽地区奶牛乳腺炎致病菌无乳链球菌相关菌毛岛屿BP基因序列并进行比对分析。方法根据DNAMAN分析基因库中牛源无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a的BP基因序列设计1对特异性引物,以无乳链球菌通辽分离株总DNA为模板,PCR扩增BP基因片段并进行序列比对分析。结果获得了菌毛岛屿PI-2a的BP基因序列,目的基因为609bp,编码203个氨基酸,其基因序列与GenBank上公布的牛源无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a的BP基因(EU930008)同源性为100%。BP蛋白二级结构的α螺旋在N端分布较多,β折叠较丰富且分布C端较多,无规则卷曲分布较均匀。BP蛋白的亲水区分布较广,遍布于整个蛋白区,属于亲水性蛋白。BP蛋白分子表面可及性较高,区域占比达57.0%,且具有抗原性。结论获得了奶牛乳腺炎无乳链球菌通辽分离株菌毛岛屿PI-2a骨架蛋白BP基因序列,该基因序列具有高度保守性,其编码蛋白具有抗原表位,可作为奶牛无乳链球菌重组基因工程疫苗候选亚单位抗原。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2017年06期）
罗美[10]（2017）在《肺炎克雷伯菌KP1_4563基因参与Ⅲ型菌毛功能的研究》一文中研究指出目的探究肺炎克雷伯菌KP1_4563基因对Ⅲ型菌毛功能的影响及cAMP受体蛋白(c AMP receptor protein,CRP)对KP1_4563基因的调控机制。方法首先,利用同源重组基因无痕敲除技术从肺炎克雷伯菌NTUH-K2044中敲除KP1_4563基因,获得突变株Kp-Δ4563,再用pBAD33质粒携带KP1_4563 DNA片段,导入Kp-Δ4563获得回补株Kpc-Δ4563。采用甘露糖敏感的血凝实验(MSHA),甘露糖抵抗的血凝实验(MRHA),甘露糖结合实验和黏附实验对Kp-Δ4563,Kpc-Δ4563,K2044的表型和毒力进行鉴定,初步判断KP1_4563基因对肺炎克雷伯菌菌毛功能的影响。接着验证CRP对KP1_4563的调控,先从转录水平,采用LacZ报告基因融合实验。接着从分子水平,采用凝胶迁移阻滞实验(EMSA)和DNaseⅠ足迹实验。全面的阐述CRP对KP1_4563基因的调控。结果血凝实验结果显示KP1_4563基因负调控Ⅲ型菌毛的功能,缺失KP1_4563基因增强肺炎克雷伯菌黏附到甘露糖和A549细胞的能力。LacZ报告基因融合实验显示CRP负调控KP1_4563基因的转录,凝胶阻滞实验和DNaseⅠ足迹实验表明CRP能直接结合到KP1_4563基因启动子区-85到-49 bp之间的序列上(以翻译起始位点为+1)。结论KP1_4563基因负调控Ⅲ型菌毛的功能,CRP通过直接结合到KP1_4563基因的启动子区,负调控KP1_4563基因的转录。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2017-05-01）
菌毛基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
菌毛装配蛋白(Flp pilus assembly protein, PAP)是一种分泌蛋白,参与细菌菌毛的组装,表达量高。本研究以感染柑橘黄龙病的海南琼海市绿橙叶片为材料提取总DNA,用其菌毛装配蛋白基因(PAP)的特异引物进行PCR扩增,获得该基因的目的片段,序列分析表明海南琼海柑橘黄龙病菌PAP基因与柑橘黄龙病菌亚洲种(GenBank登录号:CP001677.5)PAP基因序列一致。功能预测表明它含有两个与分泌功能相关的CpaC和Secretin结构域。PCR产物通过EcoRⅤ和XhoⅠ双酶切构建重组载体pET32a-PAP。将pET32a-PAP载体转化BL21(DE3)大肠杆菌,经终浓度为1 mmoL/L IPTG诱导,目的蛋白主要以包涵体形式表达。目的蛋白经Ni~(2+)-NTA层析柱纯化,并作为抗原腹腔免疫小白鼠,获得效价在1∶500～1∶1 000的多克隆抗血清。Western blot分析表明,PAP多克隆抗血清特异性强;以田间样品总蛋白做抗原时,能特异性检测染病样品。本研究为PAP蛋白功能研究和开发柑橘黄龙病菌的蛋白检测产品提供研究基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
菌毛基因论文参考文献
[1].王雪吟,布日额,陈金龙,王金良,吴金花.牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿AP_1-AP_2-BP基因亚单位抗体的制备[J].中国人兽共患病学报.2019
[2].李宾宾,余乃通,杨毅,王健华,张秀春.柑橘黄龙病菌亚洲种菌毛装配蛋白基因(PAP)序列分析、原核表达及抗血清制备[J].植物保护.2019
[3].余乃通,李宾宾,黎维丽,杨毅,刘志昕.柑桔黄龙病菌亚洲种菌毛形成蛋白基因序列分析、原核表达及抗血清制备[J].广东农业科学.2018
[4].蔺旭光.通辽地区犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及产肠毒素型大肠杆菌F41菌毛基因的克隆表达[D].内蒙古民族大学.2018
[5].布日额,王金良,吴金花,锡林高娃,陈金龙.牛乳腺炎无乳链球菌PI-2a菌毛岛屿辅助蛋白AP1、BP、AP2叁基因的串联表达及其免疫原性研究[J].中国预防兽医学报.2018
[6].黄书伦,郑凯文,胡洋,李章程,程方俊.鸭源大肠杆菌Ⅰ型菌毛的鉴定及FimA、FimH基因特征分析[J].浙江农业学报.2017
[7].唐路,薛栋,白雨豪,王鹏程,陆夏.颈动脉粥样硬化斑块中牙龈卟啉单胞菌菌毛fimA基因型的分布研究[J].现代口腔医学杂志.2017
[8].王万玉,杨丙烨,童亚萍,胡方平,蔡学清.西瓜噬酸菌菌毛基因Aave-2726的功能研究[C].中国植物病理学会2017年学术年会论文集.2017
[9].白文丽,吴金花,锡林高娃,布日额,王华.奶牛乳腺炎无乳链球菌菌毛岛屿PI-2a骨架蛋白BP基因的克隆及其序列分析[J].中国病原生物学杂志.2017
[10].罗美.肺炎克雷伯菌KP1_4563基因参与Ⅲ型菌毛功能的研究[D].重庆医科大学.2017
论文知识图
