互花米草NHX2基因的克隆与功能鉴定

论文摘要

NHX2属于CPA1基因家族,编码Na+/H+逆向转运蛋白,控制液泡膜中活性K+的摄取,同时调节气孔的关闭。该研究以耐盐植物互花米草为材料,采用PCR技术克隆NHX2基因,并将其转入拟南芥进行相关功能鉴定。结果显示:（1）成功克隆获得互花米草NHX2基因CDS序列（1 602 bp）,命名为SaNHX2,该基因编码533个氨基酸,SaNHX2蛋白的分子量约为58.65 kD,定位于细胞核和细胞膜,表明SaNHX2基因可能发挥转录调控的功能。（2） qRT-PCR结果显示,在ABA、NaCl和干旱胁迫处理下,互花米草叶和根中SaNHX2基因的表达量均上调。（3）为进一步鉴定其功能,成功构建植物表达载体,将SaNHX2基因转入拟南芥;经RT-PCR检测结果显示,SaNHX2基因在转基因植株中过表达;高盐胁迫处理后,转SaNHX2基因拟南芥的主根长度、叶绿素总量和相关胁迫应答基因表达量均高于转空载拟南芥,表明转SaNHX2基因拟南芥的耐盐能力显著增强。研究表明,SaNHX2基因可能在盐胁迫调节机制中发挥调控作用,可作为改良农作物耐盐的重要候选基因。

论文目录

• 1 材料和方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 方 法
•     1.2.1 基因生物信息学分析
•     1.2.2 烟草瞬时表达
•     1.2.3 互花米草胁迫处理
•     1.2.4 总RNA提取及cDNA合成
•     1.2.5 SaNHX2转基因拟南芥的获得与鉴定
•     1.2.6 SaNHX2转基因的耐盐实验
• 2 结果与分析
•   2.1 互花米草NHX2蛋白的保守区域
•   2.2 互花米草SaNHX2蛋白的亚细胞定位
•   2.3 互花米草SaNHX2在非生物胁迫下的基因表达
•   2.4 过表达SaNHX2促进拟南芥植株抗盐
•   2.5 过表达SaNHX2拟南芥胁迫相关基因的表达
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 周梦岩,王涛涛,陈冉红,金松松,李明,马留银

关键词: 互花米草,过表达,拟南芥,盐胁迫

来源: 西北植物学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 福建农林大学林学院,福建农林大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金(31741025,31500258)

分类号: Q943.2

页码: 2093-2099

总页数: 7

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