新生大鼠原代肝细胞分离和培养实验研究

新生大鼠原代肝细胞分离和培养实验研究

论文摘要

目的:尝试建立分离并获得稳定培养的新生大鼠原代肝细胞(Hepatocyte,HC)的简易方法。研究方法:采用多步酶消化法分离大鼠原代HC,经低速离心、选择性贴壁法纯化及培养肝细胞。结果:最初获得单细胞数量约12×106个/只,经0.4%台盼蓝染色细胞瞬时活率>70%,细胞悬液贴壁生长培养,在35d细胞可长满瓶底的70%80%,原代肝细胞经传代纯化、糖原染色和抗CK-18免疫组化染色鉴定,发现HC纯度>95%,细胞生长状态良好。结论:成功建立了分离、培养原代HC的简易方法,细胞数量、纯度、活率较好,可供一般实验室应用,为肝脏疾病的研究提供基本保障。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 英文缩略语
  • 1 前言
  • 2 材料与方法
  •   2.1 动物
  •   2.2 试剂
  •   2.3 材料
  •   2.4 仪器
  •   2.5 实验试剂的配制
  •   2.6 实验步骤
  • 3 结果
  •   3.1 细胞数量及形态学变化
  •   3.2 糖原染色鉴定
  •   3.3 免疫组化染色鉴定
  • 4 讨论
  • 5 结论
  • 本论文创新性评价
  • 参考文献
  • 综述
  •   参考文献
  • 攻读学位期间取得的成果
  • 致谢
  • 个人简历
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 郭丽平

    导师: 李异玲

    关键词: 肝细胞,分离,原代培养,体外,新生大鼠

    来源: 中国医科大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学,基础医学

    单位: 中国医科大学

    分类号: R329.2;R-332

    DOI: 10.27652/d.cnki.gzyku.2019.001169

    总页数: 33

    文件大小: 1544K

    下载量: 137

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