菊花iPBS分子标记的建立及优化

论文摘要

菊花是一种重要的观赏花卉,反转录转座子在其遗传多样性形成中发挥着重要作用.iPBS分子标记技术是一种基于反转录转座子的分子标记技术,建立此标记体系可用于检测菊花品种的多样性.本研究对菊花iPBSPCR体系进行优化,得到的最佳反应体系为:引物浓度0.40μmol/L,dNTPs浓度0.40 mmol/L,Mg2+浓度1.80mmol/L,Taq酶浓度0.10U,DNA模板用量60ng,反应总体积20.00μL.反应程序为:95℃预变性3min;95℃变性15s;48℃退火1min;68℃复性1min,30个循环;最后72℃延伸5min.依据上述iPBS-PCR反应体系和程序,从25个iPBS引物中筛选得到2个多态性较高的引物,对8个菊花品种进行iPBS-PCR扩增,结果显示所选用引物扩增效果较好,可以应用于菊花种质资源材料的iPBS分子标记分析.

论文目录

• 0 引言
• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•   1.2 方法
•     1.2.1 iPBS-PCR反应体系设计
•     1.2.2 iPBS-PCR程序退火温度优化
•     1.2.3 iPBS-PCR引物筛选及其验证
•     1.2.4 电泳检测
• 2 结果与分析
•   2.1 iPBS-PCR体系正交实验优化结果
•   2.2 退火温度筛选结果
•   2.3 iPBS-PCR引物筛选结果
•   2.4 iPBS-PCR引物验证
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李茫茫,李帅磊,时灿,李忠爱,刘艳华,安静,王子成

关键词: 菊花,技术,体系优化,引物筛选

来源: 河南大学学报(自然科学版) 2019年03期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,园艺

单位: 河南大学生命科学学院

基金: 国家自然科学基金资助项目(31372090),河南省自然科学基金资助项目(182300410026),开封市科技攻关项目(KF201702)

分类号: S682.11;Q943.2

DOI: 10.15991/j.cnki.411100.2019.03.008

页码: 318-323

总页数: 6

文件大小: 728K

下载量: 60