依赖于的聚合酶论文_张茜

导读:本文包含了依赖于的聚合酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:依赖于,肽酶,病毒,转录,层析,基因,蛋白。

依赖于的聚合酶论文文献综述

张茜[1](2016)在《依赖于环指蛋白8的人DNA聚合酶δ体外泛素化反应探讨》一文中研究指出在真核生物B-家族叁种主要DNA聚合酶(Polα、Polδ和Polε)中,Polδ是最重要的一种复制性聚合酶,除了在染色体DNA复制过程中起重要作用外,它还参与多种形式的DNA损伤修复过程,在维持细胞周期的正常调节以保证基因组结构的完整性和遗传稳定性方面具有特殊的重要意义。人源DNA聚合酶δ是由四个亚基组成的异源四聚体:催化大亚基p125、小亚基p50、以及另外两个辅助亚基p68和p12。前期的研究发现,在损伤试剂处理或射线诱导而引起DNA损伤的情况下,最小亚基p12在ATR/Chk1通路调控下以泛素化依赖(ubiquitinylation-dependent)的形式经蛋白酶体降解,从而导致细胞内Polδ由原来的四聚体形式Polδ4转换为叁聚体Polδ3以应对DNA损伤,并可能在随后的修复过程中起着重要作用。研究表明,p12的降解可能受到多种E3介导的多泛素化途径的调控,但截止到目前,仅鉴定出两种E3连接酶,环指蛋白8(Ring Finger Protein 8,RNF8)和CRL4Cdt2,它们均介导了以p12为靶标的多泛素化修饰。有报道指出,p68亚基在体内也能够被泛素化和类泛素化修饰,但在应对DNA损伤的过程中,Polδ究竟有多少亚基、具体哪个亚基、被何种E2/E3系统所介导、是发生多泛素还是单泛素修饰等的详细机制均不是很清楚。几乎所有主要的DNA修复途径、损伤避免机制和细胞周期检查点响应等过程都或多或少的受到泛素化和(或)类泛素化SUMO修饰途径的调控。泛素化和SUMO参与多种DNA的修复过程,如跨损伤合成(Translesion Synthesis)、核苷酸切除(Nucleotide Excision)、同源重组(Homologous Recombination)等。基于泛素化修饰在各种DNA损伤修复途径中的重要作用,本论文研究拟对Polδ的四个亚基分别进行体外泛素化分析,为揭示Polδ的泛素化修饰在DNA损伤应答过程中的未知功能提供参考。本研究应用昆虫-杆状病毒表达系统,通过制备具E3连接酶活性的RNF8,结合外购的多种E2缀合酶,对Polδ的四个亚基分别进行泛素化修饰的体外分析;同时通过外购的E2/E3系统-RAD6/RAD18,对Polδ各亚基也进行了初步的泛素化体外分析。结果表明,RNF8既可介导p50单泛素化修饰,又可介导p12亚基的多泛素化修饰,但不能介导p125亚基的泛素化。RAD6/RAD18作为E2/E3酶,在DNA基质的存在下,能够介导p50的泛素化修饰,类似条件下,RAD6/RAD18也可介导p12的单泛素化修饰。人类疾病,特别是癌症疾病对人类的健康和生存构成重大威胁,是世界各国面临的最重要社会问题之一。通过本论文的研究,将进一步加深对Polδ泛素化修饰调控的理解,探索涉及维持基因组稳定性和控制细胞有序分裂的新机制,为今后以Polδ作为某些小分子抑制剂的潜在靶标,设计新的肿瘤诊断和治疗手段来抗击癌症疾病提供理论参考。(本文来源于《江苏大学》期刊2016-06-01)

徐涛,王磊[2](2011)在《植物中依赖于RNA的RNA聚合酶研究进展》一文中研究指出依赖于RNA的RNA聚合酶(RDR)能够以单链RNA为模版合成互补RNA链,产生双链RNA。双链RNA在细胞内被类似RNaseⅢ的酶DCL加工成20~24 nt的小分子干扰RNA(siRNA)。siRNA可以在转录水平或转录后水平抑制靶基因的表达。RDR通过基因沉默途径参与植物的生长发育调节、逆境应答以及表观遗传修饰等许多生物学过程。加深对植物RDR表达模式、生化活性及生物学功能等方面的理解将有利于植物基因沉默的发展和运用。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2011年06期)

谢书阳,张敬之,任兆瑞[3](2004)在《依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ与基因表达和基因治疗》一文中研究指出依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ (polⅢ )能催化 5SrRNA、tRNA、U6SnRNA等一些小的、稳定的RNA的合成。文章综述了依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ的启动子和转录复合物 ,并介绍了RNA聚合酶Ⅲ的转录在基因表达和基因治疗 (核酶、反义核酸、RNA干扰技术等 )研究中的应用价值。(本文来源于《医学分子生物学杂志》期刊2004年04期)

张伟[4](2004)在《Ⅰ.GL-7-ACA酰化酶CA130结构与功能的研究 Ⅱ.SARS病毒中依赖于RNA的RNA聚合酶的研究》一文中研究指出本论文包括叁部分内容:(1)GL-7-ACA 酰化酶CA130 的蛋白质工程改造;(2)GL-7-ACA 酰化酶标记复合物的结晶过程研究;(3)SARS 病毒中依赖于RNA 的RNA 聚合酶的研究。一、GL-7-ACA 酰化酶CA130 的蛋白质工程改造作为催化头孢类抗生素母核7-氨基头孢烷酸(7-ACA)生成的关键酶,戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶(GL-7-ACA 酰化酶,EC.3.5.1.11)在工业生产中有着重要的应用价值。为了提高GL-7-ACA 酰化酶CA130 的催化活力并改善其在反应体系中使用的稳定性,我们运用计算机在蛋白质晶体结构的基础上进行有理设计,通过定点突变来提高酶的活力、半衰期及碱稳定性。在底物结合区域以及蛋白表面分别设计了两个系列的突变体,通过筛选在第一系列中得到了催化效率(Kcat/Km)分别提高2-3 倍的突变体Y151αF 和Q50βN。Y151αF 和Q50βN的Km 降低了大约50%,而Kcat 分别由12.3 s-1 提高至14.4 s-1 和16.9 s-1.他们对底物类似物GL-6-APA 和AD-7-ACA 的催化活力也有所上升。在第二系列中,R121βA, K198βA 和D286βA 表现出与野生型相似的Km 和Kcat 值,表达水平、发酵总活力和纯化后的比活力相差无几,与设计方法所预期的吻合。同时,他们的半衰期和最适pH 有所改变。R121βA 和K198βA 的半衰期分别延长了30%和58%(由68.1 小时提高到88.3 和107.5 小时)。最适pH 的变化也很明显:K198βA 和D286βA 的最适pH 分别碱移了1.0 和2.0 个pH 单位。R121βA 的最适pH 酸移了大约0.8 个pH 单位。选择K198βA 在37°C,不同的pH 环境下(pH7.0,8.0,9.0,10.0)保温4 小时,检测其碱性pH 稳定性,发现K198βA 比野生型CA130 具有较高的活力保持能力。随着pH 的上升,K198βA 的稳定性与野生型CA130 的稳定性差值越大。(本文来源于《中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)》期刊2004-06-01)

陈忠斌,王升启[5](2000)在《丙型肝炎病毒依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)研究进展》一文中研究指出由于缺乏合适的HCV感染细胞模型 ,严重制约了HCV复制 ,特别是HCV复制的关键因子依赖于RNA的RNA聚合酶 (RdRp)的研究 .对HCV序列比较分析并通过异源表达证明NS5B是HCV复制的RdRp .NS5BC端疏水性氨基酸区域以及NS5B与细胞膜形成复合体等影响NS5B溶解性 .在合适的反应条件下NS5B可以多种RNA分子为模板催化RNA复制 ,特别是能有效复制HCV全长 (+ )RNA .高浓度GTP激活HCVRdRp活性 .NS5BN/C端缺失突变和保守性A、B、C区中的点突变影响RdRp活性 ,但D区 345位精氨酸突变为赖氨酸时RdRp活性明显升高 .HCVRdRp的发现及其功能研究为HCV药物研究提供了新型靶标(本文来源于《生物化学与生物物理进展》期刊2000年06期)

陈忠斌,陆军波,管伟,王升启[6](2000)在《丙型肝炎病毒依赖于RNA的RNA聚合酶基因克隆与原核表达》一文中研究指出丙型肝炎病毒 (HCV)依赖于RNA的RNA聚合酶 (RdRp)是参与病毒基因组RNA复制的一个关键蛋白因子 ,是研究抗HCV新型药物的重要靶标 ,获得纯化的RdRp产物是建立靶向RdRp药物高通量筛选体系和抗病毒药物研究的关键步骤。以HCV病毒基因组全长cDNA质粒 (p90 HCVFL longpU)为模板 ,设计了特异性扩增RdRp的引物 ,通过CPR扩增获得编码RdRp的基因。将该基因克隆到T载体中 ,构建了重组质粒 ,通过克隆快速筛选和酶切分析筛选到含RdRp基因的阳性克隆(克隆号为 4 4 ) ,DNA序列分析证实 4 4号阳性克隆RdRp基因序列与cDNA质粒中的相应序列完全一致。将含RdRp基因的重组质粒 (44号 )用NheⅠ XhoⅠ双酶切 ,获得RdRp基因 ,将该基因连接到用NheⅠ XhoⅠ双酶切的原核表达载体pET2 8(a)中 ,构建了重组质粒pET2 8(a) NS5B ,用该重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经 1mmol LIPTG诱导 ,SDS PAGE分析 ,发现一条特异性蛋白带 ,相对分子质量约 6 6× 10 3 ,与预期的完全一致。HCVRdRp基因的克隆与表达为靶向RdRp的新型抗HCV药物研究 ,特别是靶向RdRp药物高通量筛选技术的建立奠定了实验基础(本文来源于《生物技术通讯》期刊2000年04期)

周宁一[7](1990)在《酿酒酵母依赖于DNA的RNA聚合酶的分离和鉴定》一文中研究指出从酿酒酵母A_(364A)菌株制备原生质体,经超声波处理、磷酸纤维素P11吸附分离和DEAE-Sephadex A25层析等步骤,获得四个依赖于DNA的RNA聚合酶活性峰。根据层析行为和对α-鹅膏蕈碱的敏感性,确定四个活性峰依次分别为RNA聚合酶IA、IB、Ⅱ和Ⅲ。(本文来源于《浙江工学院学报》期刊1990年03期)

于平,卢文筠,康良仪,田波[8](1989)在《小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅱ不能转录绒毛烟斑驳病毒及其拟病毒》一文中研究指出小麦芽经过匀浆、沉淀、高速及超速离心、透析以及DE_(52)离子交换层析等步骤,纯化小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶。用α-鹅膏蕈碱抑制试验,证明得到RNA聚合酶Ⅱ。用此聚合酶Ⅱ组建的体外转录体系的研究结果表明,绒毛烟斑驳病毒的拟病毒和卫星RNA(黄瓜花叶病毒相关RNA_3)都不能利用该体系进行转录,类病毒PSTV可进行转录,但转录效率明显低于小牛胸腺DNA;α-鹅膏簟碱可抑制类病毒的转录。绒毛烟斑驳病毒拟病毒和卫星RNA都不能被转录,表明他们的复制方法与类病毒不同。(本文来源于《病毒学报》期刊1989年02期)

孟祥顺[9](1989)在《受照大鼠胸腺细胞内聚ADP核糖聚合酶的抑制可能是依赖于Ca~(++)/Mg~(++)核酸内切酶激活的原因》一文中研究指出依赖于Ca~(++)/Mg~(++)的核酸内切酶可引起核小体间DNA的降解。照后2~3小时,该酶活力增加2.5~7倍。其活力增加并不是由于该酶合成的增加。该酶对聚ADP核糖基化很敏感,如该酶发生聚ADP核糖基化的修饰则明显抑制其活性。照后由于胸腺细胞核中聚ADP核糖基化的紊乱,造成该酶活性的激活。当对照与受照10Gy的细胞核用NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)预处理时,可观察到由于NAD促进聚ADP核糖基化,因而DNA自溶降解的速率明显降低,表示Ca~(++)/Mg~(++)核酸内切酶活性下降。并证明该酶活力下降并非由于染色质DNA对酶的易感性有什么变化,而主要是由于该酶自我修饰之故。烟酰胺和胸腺嘧啶可减少NAD效应。(本文来源于《国外医学(放射医学核医学分册)》期刊1989年03期)

孙伟,龚祖埙,曹天钦[10](1987)在《小麦丛矮病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶》一文中研究指出本文证明小麦丛矮病毒含有依赖于RNA的RNA聚合酶,酶活力与病毒的核衣壳(NP)有关。NP的体外转录需要四种叁磷酸核苷酸和Mg~2+,一定的盐浓度以及某些还原剂的存在能增大酶活力。通过SDS解聚和超迷离心可以将NP分解为上清和沉淀两个部分,上清含有NP的叁种结构蛋白,L,N和NS;沉淀主要为病毒RNA。上清蛋白与病毒RNA的重新组合能再现病毒的RNA聚合酶活力,并且当蛋白与RNA的配比为100:7.7(W/W)时,RNA聚合酶重组活力达到最高。(本文来源于《中国科学(B辑 化学 生物学 农学 医学 地学)》期刊1987年09期)

依赖于的聚合酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

依赖于RNA的RNA聚合酶(RDR)能够以单链RNA为模版合成互补RNA链,产生双链RNA。双链RNA在细胞内被类似RNaseⅢ的酶DCL加工成20~24 nt的小分子干扰RNA(siRNA)。siRNA可以在转录水平或转录后水平抑制靶基因的表达。RDR通过基因沉默途径参与植物的生长发育调节、逆境应答以及表观遗传修饰等许多生物学过程。加深对植物RDR表达模式、生化活性及生物学功能等方面的理解将有利于植物基因沉默的发展和运用。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

依赖于的聚合酶论文参考文献

[1].张茜.依赖于环指蛋白8的人DNA聚合酶δ体外泛素化反应探讨[D].江苏大学.2016

[2].徐涛,王磊.植物中依赖于RNA的RNA聚合酶研究进展[J].中国农业科技导报.2011

[3].谢书阳,张敬之,任兆瑞.依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅲ与基因表达和基因治疗[J].医学分子生物学杂志.2004

[4].张伟.Ⅰ.GL-7-ACA酰化酶CA130结构与功能的研究Ⅱ.SARS病毒中依赖于RNA的RNA聚合酶的研究[D].中国科学院研究生院(上海生命科学研究院).2004

[5].陈忠斌,王升启.丙型肝炎病毒依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)研究进展[J].生物化学与生物物理进展.2000

[6].陈忠斌,陆军波,管伟,王升启.丙型肝炎病毒依赖于RNA的RNA聚合酶基因克隆与原核表达[J].生物技术通讯.2000

[7].周宁一.酿酒酵母依赖于DNA的RNA聚合酶的分离和鉴定[J].浙江工学院学报.1990

[8].于平,卢文筠,康良仪,田波.小麦芽依赖于DNA的RNA聚合酶Ⅱ不能转录绒毛烟斑驳病毒及其拟病毒[J].病毒学报.1989

[9].孟祥顺.受照大鼠胸腺细胞内聚ADP核糖聚合酶的抑制可能是依赖于Ca~(++)/Mg~(++)核酸内切酶激活的原因[J].国外医学(放射医学核医学分册).1989

[10].孙伟,龚祖埙,曹天钦.小麦丛矮病毒的依赖于RNA的RNA聚合酶[J].中国科学(B辑化学生物学农学医学地学).1987

论文知识图

表达系统示意图异位配对和异常RNA模型虚拟组合库用于先导化合物优化的策略流...编码的蛋白质结构和功能的预测SRAP-PCR的dNTPs浓度梯度实验系统

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