导读:本文包含了臂丛根性撕脱伤论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:神经元,损伤,神经,轴突,根性,髓鞘,氧化氮。
臂丛根性撕脱伤论文文献综述
王雨[1]（2019）在《葛根素对臂丛根性撕脱伤大鼠脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:探讨中药葛根提取物葛根素对大鼠臂丛神经根性撕脱伤(brachial plexus root avulsion injury,BPRAI)脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表达及血清iNOS表达的影响。方法:50只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、葛根素低、中、高剂量治疗组,每组10只。采用椎管内撕脱大鼠右侧脊髓C_5-C_7脊神经前根、同时剪断C_5-C_7后根的方法进行BPRAI造模。术后低、中、高剂量治疗组进行葛根素腹腔注射给药,剂量分别为50 mg·kg~(-1)·d~(-1)、100 mg·kg~(-1)·d~(-1)、200 mg·kg~(-1)·d~(-1),正常组、模型组注射等体积生理盐水,连续给药4w。尼氏染色法检测大鼠脊髓前角α-运动神经元(α-motorneurons,α-MNs)的存活率,免疫荧光化学方法检测脊髓前角GFAP、p-Akt1/2/3蛋白表达,比色法测定血清iNOS和总NOS的含量,免疫印迹方法检测损伤侧脊髓GFAP、iNOS、CGRP的蛋白表达。结果:1.尼氏染色结果显示:与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角α-MNs存活率显着降低(P<0.01);与模型组比较,中、高剂量的葛根素治疗可显着提高α-MNs的存活率(P<0.01)。2.免疫荧光化学结果显示:与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角GFAP蛋白表达升高(P<0.01);与模型组相比,中、高剂量葛根素治疗组GFAP蛋白表达降低(P<0.01);与低剂量组相比,中、高剂量葛根素治疗组GFAP蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。与正常组相比,模型组损伤侧脊髓前角胶质细胞大量表达p-Akt1/2/3(P<0.01);与模型组相比,低、中、高剂量葛根素均可抑制胶质细胞表达p-Akt1/2/3(P<0.05或P<0.01);与低剂量组相比,高剂量葛根素均可抑制胶质细胞表达p-Akt1/2/3(P<0.05)。3.血清生化检测结果显示:与模型组相比,低、中剂量组的iNOS、总NOS表达升高(P<0.05或P<0.01);与低剂量组相比,高剂量组的总NOS表达下降(P<0.05)。4.免疫印迹实验结果显示:与模型组相比,高剂量组损伤侧脊髓iNOS蛋白表达下降(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组损伤侧脊髓iNOS蛋白表达下降(P<0.05)。与正常组相比,模型组GFAP蛋白表达增加(P<0.05);与模型组相比,低、中、高剂量组GFAP蛋白表达均下降(P<0.05)。与正常组相比,模型组CGRP蛋白表达下降(P<0.05);与模型组相比,高剂量组CGRP蛋白表达上升(P<0.05)。结论:葛根素可提高臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元的存活率,其机制可能与其抑制脊髓前角星形胶质细胞活化以及iNOS、GFAP蛋白表达,促进CGRP蛋白表达有关,并且可能有p-Akt信号通路的参与。此外,其治疗作用呈现剂量依赖性,中、高剂量疗效最优。(本文来源于《湖北民族大学》期刊2019-06-30）
陈传奇,陈龙菊,吴太鼎,谭云霞,李丹[2]（2019）在《葛根素对臂丛根性撕脱后脊髓MMP-9蛋白表达的影响》一文中研究指出目的探讨大鼠臂丛根性撕脱后脊髓基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达变化以及葛根素对其表达的影响。方法成年雄性SD大鼠174只,随机分为正常组、模型组、葛根素低、中、高处理组。模型组和葛根素处理组行右侧C_5～C_7脊神经前根撕脱术,术后腹腔注射给药。Western Blot法检测C_5～C_7节段脊髓MMP-9蛋白的表达。结果与正常组比较,臂丛神经根性撕脱后1 d时MMP-9蛋白表达达高峰,3 d降至接近正常,1周后下降至较低水平。葛根素处理组脊髓组织MMP-9蛋白表达在1 d时比模型组显着降低。结论 MMP-9可能参与臂丛根性撕脱后早期损伤反应,且葛根素可能有助于减轻该种损伤。(本文来源于《中国临床解剖学杂志》期刊2019年02期）
韦勇,邓丹琼,吴盛龙,林烈宝,黄飞飞[3]（2019）在《银杏叶提取物对大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元轴突再生及再髓鞘化的影响》一文中研究指出目的探讨银杏叶提取物对大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元轴突再生及再髓鞘化的影响。方法选取健康雌性SD大鼠72只,其中54只用手术建立C5-C7臂丛神经撕脱、C6神经根再植模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、对照组和实验组,每组18只;假手术组18只接受假手术。假手术组及模型组均给予0. 9%Na Cl 2 m L,qd,腹腔注射;对照组给予8. 5 mg·m L~(-1)氯化锂溶液2m L,qd,腹腔注射;实验组给予10. 0 mg·m L~(-1)银杏叶提取物溶液2 m L,qd,腹腔注射。各组均连续干预12周。对大鼠运动及感觉神经功能、再生运动神经元数量、肌皮神经再生神经轴突的数量和再髓鞘化程度,以及肌皮神经Slit1蛋白、Slit2蛋白表达水平进行检测。结果治疗后,实验组、对照组、模型组和假手术组的Terzis梳洗试验评分分别为(4. 21±0. 59),(3. 73±0. 51),(0. 22±0. 03)和(4. 83±0. 67)分,痛阈压力差分别为(1. 45±0. 16),(2. 26±0. 31),(4. 53±0. 62)和(0. 37±0. 05) N,停留时间差分别为(4. 02±0. 37),(6. 47±0. 75),(10. 85±1. 28)和(1. 53±0. 21) s,再生运动神经元数量分别为(414. 25±43. 63),(365. 54±35. 48),(175. 47±21. 17)和(82. 17±10. 23)个,肌皮神经轴突总数分别为(16. 64±2. 18),(13. 43±1. 53),(8. 65±1. 12)和(1. 62±0. 19)×10~3·mm~(-2),有髓轴突数量分别为(9. 27±1. 28),(6. 84±0. 73),(4. 37±0. 56)和(0. 83±0. 11)×103·mm~(-2),再生轴突髓鞘厚度分别为(0. 77±0. 11),(0. 65±0. 08),(0. 46±0. 06)和(0. 89±0. 12)μm,肌皮神经Slit1蛋白IOD值分别为(130. 59±14. 28)×10~2,(116. 84±12. 14)×10~2,(99. 75±11. 14)×10~2和(80. 32±10. 12)×10~2,Slit2蛋白IOD值分别为(224. 86±30. 45)×10~2,(165. 86±22. 85)×10~2,(127. 54±15. 45)×10~2和(104. 83±13. 24)×10~2,实验组的上述指标与假手术组、模型组、对照组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论银杏叶提取物能促进大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元轴突再生及再髓鞘化,加速运动和感觉神经功能恢复,其作用机制可能与促进神经组织表达Slit1蛋白和Slit2蛋白有关。(本文来源于《中国临床药理学杂志》期刊2019年01期）
陈传奇[4]（2017）在《葛根素对臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元NGF、GAP-43mRNA及蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:臂丛根性撕脱伤常发生于交通事故、产瘫,可导致脊髓神经元的大量死亡,进而造成患者上肢的运动和感觉障碍。针对这种发病机制,本研究从保护神经元和促进神经元再生入手,探讨葛根素对臂丛根性撕脱伤导致的神经元死亡是否具有保护作用及其可能的机制。方法:成年雄性SD大鼠252只,体重250±20 g,完全随机分为正常对照组、模型组、葛根素低、中、高治疗组。模型组和治疗组行右侧C5-C7脊神经前后根撕脱术,术后待动物苏醒即每日给予腹腔注射给药,其中模型组给予生理盐水,葛根素治疗组的剂量分别为50 mg/kg/d、100 mg/kg/d、200 mg/kg/d。并于术后1w、2w、4w、6w、8w这5个时间点取材,每个时间点12只。通过尼氏染色法观察脊髓前角运动神经元的形态及数量;免疫组织化学染色法及Western Blot法检测NGF和GAP-43蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测NGF和GAP-43mRNA的表达。结果:尼氏染色实验结果表明:与正常对照组比较,模型组各时间点脊髓前角运动神经元形态较差、细胞间隙增大、排列紊乱、且运动神经元数量及神经元树突明显减少,结果有统计学意义(p<0.01)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元形态及排列均有所改善,运动神经元树突亦比模型组有所增加,神经元的存活率明显升高,组间比较有统计学意义(p<0.05)。免疫组化实验结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均明显降低,结果均具有统计学意义(p<0.001)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在第2周明显升高,随后一直维持高表达,直至第8周NGF蛋白继续维持高水平,趋势更加明显,差别亦更显着。与正常对照组比较,模型组自术后1周开始出现GAP-43阳性运动神经元表达,第2周时达到高峰,第4周时降至较低水平维持至第8周末。与模型组比较,葛根素各治疗组GAP-43蛋白在术后第1周时已达较高水平,第2周时达最高峰,随后开始下降,第8周时降至较低水平。Western Blot实验结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均明显降低,结果均具有统计学意义(p<0.001)。与模型组比较,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元NGF蛋白表达量在5个时间点均高于模型组。低剂量组只在第1周时与模型组的差别具有统计学意义(p<0.05);中剂量组在第4-8周与模型组比较,差别均具有统计学意义(p<0.05);高剂量组只在第8周时与模型组比较差别具有统计学意义(p<0.05)。结合课题组前期实验结果,葛根素各治疗组脊髓前角运动神经元GAP-43蛋白表达的WB实验结果与免疫组化结果趋势相符合,此处不予赘述。实时荧光定量PCR法检测结果示:与正常对照组比较,模型组脊髓前角运动神经元NGF mRNA第2周表达稍高于正常组,第4周开始降低,第6周时降至最低,第8周时表达量有所回升;与模型组比较,葛根素低、中治疗组在第6周时表达量开始升高,差别均具有统计学意义(p<0.05),第8周时表达量更高,差别亦均具有统计学意义(p<0.01)。与正常对照组比较,模型组GAP-43 mRNA表达在术后第1周时已开始明显升高,第2周达高峰,之后稍下降,第8周时降至较低水平,差别均具有统计学意义(p<0.05)。与模型组相比,葛根素各治疗组GAP-43 mRNA表达自第1周时便急剧升高,第2周时达到最高峰,以中剂量组差别具有统计学意义(p<0.01)。随后开始缓慢下降,至8周时表达量仍高于模型组。结论:葛根素能保护臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元,其机制可能与其能促进脊髓前角运动神经元NGF、GAP-43 mRNA及蛋白的表达有关。(本文来源于《湖北民族学院》期刊2017-06-30）
何琼[5]（2017）在《新生儿臂丛根性撕脱伤的应用解剖学研究》一文中研究指出目的:探讨新生儿臂丛神经根根性撕脱伤的特殊性,以及撕脱后神经根回植深度、角度;进一步对新生儿臂丛神经血供进行叁维重建,为临床治疗新生儿臂丛根性撕脱伤提供解剖学基础。方法:1.12例完整新生儿(0-1个月)标本,解剖在手术显微镜sxp-1c(10)下观测新生儿臂丛神经前后根的形态特点;2.12段游离新生儿臂丛神经脊髓组织标本,测量C_5-C_6神经根前根角度和深度;3.1例墨汁灌注,6例红色乳胶灌注,观察新生儿臂丛C_5-T_1神经根血供;4.2例聚乙烯醇-氧化铋灌注,保留神经、血管原位的状态下,行X线显影和CT扫描,并对其臂丛神经血供进行叁维重建。结果:1.新生儿臂丛神经前根直径均小于后根直径,C_5-C_6段后根根丝直径、后根的起始长度、从硬脊膜穿出处至神经干汇合处长度均为右侧小于左侧;2.新生儿前根起始处与脊髓中线的距离呈增大趋势,由C_5的最小1.62mm,逐渐增大到T_1的2.54mm;相反的,后根起始处与脊髓中线的距离呈减小趋势,由C_5的3.22mm,逐渐减小到T_1的1.86mm;其前、后根自脊髓发出处斜向外下方走行,其夹角逐渐变小;3.新生儿的前根分出角及前支分出角度数均小于成人,且前根分出角的差异性更大,前根分出角与成人相比角度差异均在10°以上,而前支分出角差异均在10°以内;新生儿C_5-C_6前根分出角与前支分出角较成人的差异性更大,新生儿两者间差距平均在20°以上,成人平均不超过20°;4.组织学结果显示,C_5-T_1段各部分灰质与白质比、外形及大小均有差异,相应的根性撕脱后神经回植的角度和深度各有不同,自C_5-T_1回植的角度在20°-50°;回植深度,C_7最大约为2.50mm,T_1最小仅为1.60mm;前外侧沟与前正中裂距离,C_7最大1.42mm,T_1最小0.92mm。5.新生儿臂丛前、后根的血供主要来源于锁骨下动脉的节段性动脉;新生儿臂丛神经的血供主要来源于锁骨下动脉-腋动脉轴(SAA)所发出的分支;6.臂丛神经血供的叁维图像可全方位、多角度地观察臂丛神经及其供血血管间的叁维空间关系。结论:新生儿臂丛神经C_5-C_6神经根较C_7-T_1神经根、右臂较左臂考虑可能因解剖学因素,更易发生根性撕脱伤。新生儿发生臂丛神经根性撕脱后,行神经根回植时,可选择脊髓前外侧沟内下方,与前正中裂呈20°-50°;脊髓中线靠近伤侧约1.60-2.50mm,前外侧沟内侧与前正中裂的距离约为1mm处。(本文来源于《南华大学》期刊2017-05-01）
周春,李占玉[6]（2016）在《健侧颈7神经根移位对全臂丛根性撕脱伤术后对侧运动皮层的远期影响》一文中研究指出目的观察健侧颈7移位术后2年运动皮层功能的重塑变化,以期从运动皮层功能重塑方面对临床远期随访的结果进行解释。方法 30只SD大鼠随机分为对照组、全臂丛根性撕脱伤组及颈7移位修复组,于术后24个月以微电极刺激技术检测各组大鼠患肢支配区在对侧大脑运动皮层的分布。结果术后24个月,对照组上肢支配区在大脑运动皮层的刺激位点数量在右侧为21.17±1.14个;在全臂丛根性撕脱伤组,颈部位点在术后两年仍占据着原前肢代表区;颈7移位术后左侧前肢代表区逐渐替代颈部位点,术后2年刺激位点数量为14.83±0.83。结论健侧颈7神经根移位治疗全臂丛根性撕脱伤能够引起成年大鼠对侧运动皮层远期的功能重塑。(本文来源于《立体定向和功能性神经外科杂志》期刊2016年06期）
刘琳琳,王亚琼,袁群芳,周丽华[7]（2016）在《外源性一氧化氮对臂丛根性撕脱伤后脊髓的影响》一文中研究指出目的探究在根性撕脱伤早、中期应用外源性一氧化氧(NO)供体硝普钠补充NO能否改变撕脱伤诱导运动神经元的凋亡进程及其相关机制。方法成年SD大鼠,右侧全臂丛神经根撕脱后于4 d和13 d分别在蛛网膜下腔受损脊髓节段局部给予NS或5 mmol/L SNP各4μL,存活2d后处死。取C7节段脊髓应用免疫组织化学以及酶组织化学、中性红染色、Western blot等方法,定量存活运动神经元数以及nNOS蛋白在运动神经元的表达情况;同时检测i NOS、GFAP、0X-42在胶质细胞的表达情况。结果 SNP 40 mmol/L以上剂量局部应用会导致动物立刻死亡,我们选择了5 mmol/L做为最终SNP浓度;SNP会降低撕脱伤脊髓运动神经元的存活率(%)6 d时间点SNP组与NS组无显着差异;15 d时间点,SNP组(57.41±3.96)显着低NS组(81.48±2.53);撕脱伤引起的小胶质细胞和星形胶质细胞反应与NS组相比加剧。结论在早期补充NO使前角运动神经元nNOS表达时间提前;加剧损伤脊髓的胶质反应;使运动神经元死亡时间提前,死亡程度增加。(本文来源于《解剖学研究》期刊2016年03期）
唐颖[8]（2016）在《miR-137-3p调控臂丛根性撕脱伤的机制》一文中研究指出臂丛根性撕脱伤会引起运动神经元的大量死亡,前期的研究表明运动神经元的凋亡涉及一系列分子事件。撕脱伤后m RNA芯片筛查发现促神经元存活和轴突再生的基因表达下降,而与凋亡和DNA损伤相关的基因表达上升;但是调控这些基因变化的分子机制、以及这些变化的基因在运动神经元凋亡进程中的作用并未完全明了。微小RNA(micro RNA)是一类非编码RNA,通过翻译后抑制靶蛋白的表达水平而发挥作用。目前越来越多的研究证明:在脊髓损伤后mi RNAs的表达发生了变化。但是对于臂丛撕脱伤和运动神经元凋亡进程中mi RNAs表达变化的研究十分有限,本课题组长期开展臂丛根性撕脱伤的基础研究,发现撕脱伤后凋亡和再生基因表达变化具有时间特异性,损伤后3天内检测凋亡和再生基因均显着异常,而损伤后14天则以凋亡相关基因和过氧化反应异常为主,结合撕脱伤导致运动神经元的显着凋亡也从损伤后14d开始,本研究选择撕脱伤后3和14天的节点,研究损伤脊髓内在mi RNA的生物学特性,以期揭示mi RNAs在撕脱伤中的作用和机制。一、臂丛根性撕脱伤引起成年大鼠脊髓mi RNAs表达谱变化规律目的:筛选成年大鼠臂丛撕脱伤引起的脊髓内在差异表达的mi RNAs方法:建立臂丛撕脱伤模型,分别损伤后3天和14天进行mi RNAs基因芯片检验,随后采用PCR实时定量分析的方法验证芯片筛选出来的差异表达mi RNAs,利用生物信息学软件对差异表达的mi RNAs进行靶基因预测分析并对靶基因在撕脱伤中表达的时空特征进行验证。结果:(1)应用mi RNAs表达谱芯片发现总共有3361个mi RNAs在成年大鼠的脊髓中表达,脊髓中表达量最高的前10个mi RNAs有mi R-124-3p,mi R-9a-3p,mi R-34a-5p,mi R-9a-5p,mi R-125b-5p,mi R-let-7c-5p,mi R-29a-3p,mi R-23b-3p,mi R-451-5p,and mi R-30c-5p;(2)对比撕脱伤后3天和14天后脊髓对照侧和损伤侧mi RNAs的表达情况,撕脱伤引起10个mi RNAs表达持续升高,有4个mi RNAs在损伤后3天表达升高,14天表达降低,只有mi R-466c-3p在损伤后表达持续下降。在损伤后3天,有40个mi RNAs表达上升,有23个mi RNAs表达下降,这些mi RNAs在损伤后14天恢复到正常表达水平。在损伤后14天,有25个mi RNAs表达上升,有18个mi RNAs表达下降,对比损伤后14天和3天的损伤侧,5个mi RNAs表达上升,5个mi RNAs表达下降。(3)荧光实时定量逆转录PCR(quantitative real-time reverse transcription PCR,q RT-PCR)对其中6个差异表达的mi RNAs进行了验证:包括在损伤后14天表达上升的mi R-146-5p和mi R-31a-3p;在损伤后3天和14天表达持续下降的mi R-466c-3p;以及对比损伤后14天比损伤后3天表达上升的mi R-144-3p和表达下降的mi R-137-3p,mi R-376b-3p。结果显示:RT-q PCR与mi RNAs基因芯片的结果相符合。(4)靶基因预测结果显示:在撕脱伤后3天表达下降的mi R-324-5p和mi R-484的靶基因预测是转录激活因子-3(activating transcription factor 3;ATF-3)和c-jun;而撕脱伤14天表达下降的mi R-137-3p和mi R-335的靶基因分别预测为中性蛋白酶-2(calcium-activated neutral protease-2,Calpain-2)和胶质纤维胶质蛋白(glial fibrillary acidic protein;GFAP)。免疫荧光检测发现撕脱伤脊髓运动神经元内,ATF-3蛋白和c-jun蛋白的表达水平在撕脱伤3天后上升,calpain-2蛋白和GFAP蛋白的表达水平在撕脱伤14天上升。值得注意的是撕脱伤后14天,除了生物学分析表明表达下降的mi R-137-3p和表达上升的calpain-2蛋白呈靶向调控的关系,同时calpain-2阳性细胞也表达在脊髓前角神经元胞浆中,提示我们mi R-137-3p与calpain-2的靶向关系可能与神经元的凋亡密切相关。小结:mi RNA基因芯片、q RT-PCR,以及靶基因免疫荧光实验结果揭示了成熟大鼠脊髓组织mi RNAs在臂丛根性撕脱伤中表达变化的时间特异性,表明差异表达的mi RNAs参与了撕脱伤脊髓的病理过程,提示mi R-137-3p通过调控靶基因Capn2调控运动神经元凋亡的进程。二、mi R-137-3p调控Capn2蛋白表达水平的靶基因验证实验目的:在分化的PC12细胞上验证Capn2是mi R-137-3p的靶基因方法:体外培养分化的PC12细胞,转染GFP标记的过表达mi R-137-3p慢病毒,倒置荧光显微镜检测慢病毒的转染效率,CCK-8检测转染慢病毒的细胞活力,确定转染慢病毒的最佳MOI值为100后,设立正常PC12细胞、转染mi R-137-3p慢病毒PC12细胞实验组、以及转染空载病毒PC12细胞对照组,分别处理分化的PC12细胞,荧光定量PCR检测mi R-137-3p和calpain-2 m RNA的水平,Western-blot检测calpain-2和n NOS蛋白的水平。免疫荧光细胞化学检测calpain-2和n NOS蛋白在正常PC12细胞的表达特征。同时设立正常PC12细胞组,转染calpain-2 si RNA组,转染random-sequence RNA对照组,分别处理分化的PC12细胞,荧光定量PCR和Western-blot分别检测calpain-2和n NOS的m RNA和蛋白水平。结果:(1)转染36小时和60小时后,可检测到GFP标记的慢病毒转染的分化PC12细胞,转染细胞胞体饱满,胞浆丰富,突起清晰可见,绿色荧光均匀分布于胞体和突起内。其中MOI值为100和100+polybrene的荧光强度和阳性细胞数目明显高于MOI值为50和50+polybrene,最终确定慢病毒转染PC12细胞的最佳MOI值为100+polybrene。(2)CCK-8检测结果细胞活力,以正常PC12细胞组表达量作为100%,mi R-137-3p慢病毒组以及空载病毒组相对表达量分别为99.66%和99.83%,表明慢病毒对分化的PC12细胞无毒性作用。(3)荧光定量PCR结果显示,将正常PC12组设为1,各实验组mi R-137-3p m RNA的相对表达量:mi R-137-3p慢病毒组为757.51±73.23,空载病毒组为1.20±0.22,表明慢病毒转染mi R-137-3p基因成功;Calpain-2 m RNA的相对表达量:mi R-137-3p慢病毒组为0.28±0.09,空载病毒组为1.23±0.32,两组之间的差异有统计学意义(P<0.05),表明上调mi R-137-3p可以抑制Calpain-2 m RNA的表达水平。(4)Western结果显示将正常PC12组设为1,mi R-137-3p慢病毒组calpain-2/GAPDH比值仅为0.51±0.07,而空载病毒组calpain-2/GAPDH比值为1.03±0.12;两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。我们同时检测了n NOS蛋白的水平,将正常PC12组设为1,发现mi R-137-3p慢病毒组n NOS/GAPDH比值仅为0.53±0.03,而空载病毒组n NOS/GAPDH比值为1.14±0.15,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)双荧光素酶实验结果表明,与单独转染p MIR-REPORT-calpain-2-wt载体、单独转染p MIR-REPORT-calpain-2-mut载体、或者共转染mi R-137-3p的mimic与p MIR-REPORT-calpain-2-mut载体的叁组比较,共转染mi R-137-3p mimic与p MIR-REPORT-calpain-2-wt载体组中,相对荧光素酶表达值明显降低(P<0.05)。表明Capn2是mi R-137-3p的靶基因。(6)转染Calpain-2的si RNA和random-sequence si RNA后,在荧光显微镜下未见细胞明显死亡,行荧光定量PCR和western-blot检测calpain-2 m RNA和蛋白水平,将正常PC12组设为1,结果calpain m RNA相对表达量为:Calpain-2 si RNA组为0.64±0.08,random-sequence si RNA组为1.02±0.24;蛋白水平calpain-2 si RNA组calpain-2/GAPDH比值仅为0.48±0.07,而random-sequence si RNA组calpain-2/GAPDH比值为1.15±0.16;统计学分析表明:calpain-2 si RNA组与正常PC12细胞组相比差异均有统计学意义(P均<0.05)。random-sequence si RNA组和正常PC12细胞组之间的差异无统计学意义(P均>0.05),表明si RNAs下调了PC12细胞中Calpain-2基因的表达水平。(7)免疫荧光细胞方法检测发现大部分PC12细胞表达calpain-2和n NOS蛋白,且calpain-2和n NOS蛋白可以共标于同一个PC12细胞胞浆中。转染Calpain-2的si RNA和random-sequence si RNA后,行荧光定量PCR和western-blot检测n NOS m RNA和蛋白水平,将正常PC12组设为1,发现各实验组n NOS m RNA的相对表达量:calpain-2 si RNA组为0.43±0.002,random-sequence si RNA组为1.04±0.12;各实验组n NOS蛋白的相对表达量:calpain-2 si RNA组n NOS/GAPDH比值仅为0.25±0.09,而random-sequence si RNA组n NOS/GAPDH比值为1.09±0.16。统计分析显示:calpain-2 si RNA组与正常PC12细胞组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),而random-sequence si RNA组和正常PC12细胞组比较无明显差异(P>0.05)。表明下调calpain-2基因会抑制n NOS蛋白的表达。小结:本实验所用的过表达mi R-137-3p慢病毒能够稳定地导入分化的PC12细胞中并能有效上调mi R-137-3p的表达,双荧光素酶实验确定calpain-2是mi R-137-3p的靶基因,且下调calpain-2基因会抑制n NOS基因的表达。叁、mi R-137-3p在神经细胞氧化应激损伤中的地位和作用机制目的:研究mi R-137-3p对于氧化应激损伤的PC12神经细胞的影响。方法:建立过氧化氢诱导PC12细胞凋亡的细胞模型,设空白对照组,正常对照组,H2O2损伤组,转染过表达mi R-137-3p慢病毒+H2O2损伤组,和转染空载病毒+H2O2损伤组。用RT-q PCR和western-blot方法检测mi R-137-3p、calpain-2和n NOS基因在损伤的PC12细胞的表达水平,用calpain活性试剂盒检测Calpain-2的酶活性,用CCK-8实验定量PC12细胞的凋亡水平。结果:(1)PC12细胞氧化损伤后RT-q PCR结果显示:将PC12组设为1,PC12+氧化损伤组中mi R-137-3p的表达下降,calpain-2的表达上升(p均<0.05)。(2)细胞活力实验:过氧化氢诱导PC12细胞氧化损伤后,结果显示:以正常对照组表达量作为100%,H2O2损伤组86.32±0.32%,转染过表达mi R-137-3p慢病毒+H2O2损伤组91.38±0.27%,转染空载病毒+H2O2损伤组86.94±1.82%;统计学分析表明:氧化损伤的叁组细胞的存活率均低于正常细胞对照(p均<0.05),但是mi R-137-3p慢病毒+H2O2损伤组的细胞存活率高于H2O2损伤组和转染空载病毒+H2O2损伤组(p均<0.05),H2O2损伤组和转染空载病毒+H2O2损伤组并无显着差异(p>0.05)。(3)Calpain酶活性:与PC12细胞组(3.54±0.17 fu/mg)比,mi R-137-3p组的calpain活性明显降低(1.58±0.69 fu/mg)(p<0.05),而NC组(3.57±0.76 fu/mg)与正常PC12细胞组之间无明显差异。氧化损伤后,与正常PC细胞组相比,PC12+氧化损伤组中calpain活性明显上升(9.58±0.62 fu/mg)(p<0.05),NC+氧化损伤组同样表现出calpain活性明显上升(9.68±0.23 fu/mg)(p<0.05),且PC12+氧化损伤组与NC+氧化损伤组之间并无明显差异,然而,在mi R-137-3p+氧化损伤组中,calpain活性较mi R-137-3p组明显升高(3.30±0.64fu/mg),与PC12细胞组无明显差异,且明显低于PC12+氧化损伤组与NC+氧化损伤组(p<0.05)。(4)蛋白表达水平:将PC12组设为1,calpain-2:mi R-137-3p+氧化损伤组calpain-2/GAPDH比值仅为1.34±0.11,而PC12+氧化损伤组calpain-2/GAPDH比值为4.31±0.76,NC+氧化损伤组calpain-2/GAPDH比值为3.85±0.65。n NOS:mi R-137-3p+氧化损伤组n NOS/GAPDH比值仅为1.24±0.42,而PC12+氧化损伤组n NOS/GAPDH比值为2.80±0.69,NC+氧化损伤组n NOS/GAPDH比值为2.65±0.29。mi R-137-3p+氧化损伤组与PC12+氧化损伤组和NC+氧化损伤组相比,calpain-2和n NOS蛋白表达明显降低(P均<0.05),而PC12+氧化损伤组和NC+氧化损伤组比较无明显差异(P>0.05)。小结:本实验中先应用H2O2作用于PC12细胞模拟氧化应激状态,制作细胞凋亡模型。发现在H2O2诱导PC12细胞凋亡中,mi R-137-3p表达下降而calpain-2和n NOS表达上升,过表达mi R-137-3p后,通过抑制calpain-2和n NOS的表达可以对凋亡细胞起保护作用。四、mi R-137-3p在臂丛根性撕脱伤运动神经元凋亡进程中的地位和作用机制目的:研究mi R-137-3p在臂丛根性撕脱伤运动神经元凋亡中的作用和机制。方法:建立成年大鼠单侧C7根性撕脱模型,并在损伤后1周微注射GFP标记的mi R-137-3p慢病毒至损伤侧脊髓前角,设立假手术组,单纯撕脱组,撕脱+给予mi R-137-3p慢病毒组和撕脱+给予空载慢病毒对照组。撕脱伤后2周应用calpain-2和n NOS抗体免疫荧光检测成年大鼠脊髓内mi R-137-3p慢病毒对calpain-2和n NOS的调控作用;取损侧C7脊髓和正常大鼠脊髓进行对比,RT-q PCR检测mi R-137-3p m RNA的变化,western检测calpain-2蛋白的表达变化,撕脱伤后2周和4周应用乙酰胆碱转移酶(Ch AT)检测成年大鼠脊髓前角运动神经元对慢病毒的摄取以及慢病毒在运动神经元内的分布特征;应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸黄递酶(NADPH-d)组织化学反应加中性红复染检测损伤侧脊髓前角n NOS阳性神经元和存活运动神经元数目的变化。结果:(1)mi R-137-3p慢病毒注射脊髓后,撕脱伤2周和4周后免疫荧光检测发现大部分损伤脊髓前角运动神经元的胞浆内转染了GFP绿色荧光标记的mi R-137-3p慢病毒,且撕脱伤后4周仍可在运动神经元的胞浆内检测到这些GFP阳性的mi R-137-3p慢病毒。而且这些GFP阳性的运动神经元与红色荧光标记的Ch AT共标。另外,在注射部位周围的胶质细胞中也可以发现散在的GFP阳性细胞。(2)损伤后2周取损侧脊髓定量分析mi R-137-3p m RNA水平:以正常脊髓组织作为1,撕脱伤组(Av)0.49±0.05,撕脱伤以及过表达mi R-137-3p慢病毒组(Av+mi R-137-3p)为6.09±0.86,撕脱伤以及空载病毒组(Av+ns NC)为0.34±0.08。统计学分析表明mi R-137-3p慢病毒组mi R-137-3p表达水平明显上升,与Av组相比,差异有显着的统计学意义(p<0.05),而NC组与Av组相比差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Western-blot结果显示:将正常脊髓组Calpain-2/GAPDH比值设为1,mi R-137-3p慢病毒组仅为0.44±0.14,Av组为4.46±0.20,NC组为4.91±1.04。mi R-137-3p慢病毒组与Av组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),而NC组和Av组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)以臂丛根性撕脱伤脊髓C7节段健侧中性红阳性的运动神经元数目为分母,计数损伤侧C7节段前角n NOS阳性运动神经元数:在2周时间点:Av组为47.83%±3.13%,Av+mi R-137-3p慢病毒组为18.78%±6.37%,Av+NC组为44.28%±13.14%;4周时间点:Av组为13.21%±2.60%,Av+mi R-137-3p慢病毒组为19.51%±5.71%,Av+NC组为17.81%±2.92%。统计分析显示:损伤2周时,Av+mi R-137-3p慢病毒组n NOS阳性神经元的数目明显下降,与Av组相比,差异有显着意义(p<0.05),而Av+NC组与Av组差异无统计学意义(P>0.05),损伤4周时,叁组之间无明显差异(p>0.05).(5)各组动物脊髓C7节段前角运动神经元存活率:术后2周时间点,Av组为66.90%±1.08%,Av+mi R-137-3p慢病毒组为86.07%±3.56%,Av+NC组为65.67%±6.63%;术后4周时间点,Av组为49.13%±16.26%,Av+mi R-137-3p慢病毒组为78.04%±7.14%,Av+NC组为56.12%±3.33%。统计学分析显示:术后2周和4周的变化一致,Av+mi R-137-3p慢病毒组存活神经元数量均高于Av组(p<0.05),而Av组和Av+NC组的差异无统计学意义(p>0.05)。小结:在臂丛根性撕脱伤成年大鼠模型中,验证了脊髓微注射给予慢病毒能成功被损伤运动神经元摄取至胞体,并且可以持续表达;慢病毒能成功上调损伤运动神经元的mi R-137-3p表达水平,且mi R-137-3p上调导致其靶基因calpain-2蛋白水平的降低,一致损伤运动神经元内n NOS蛋白的异位表达减少,运动神经元存活数目增多。结论1.成年大鼠臂丛根性撕脱伤诱导脊髓内在mi RNAs出现差异表达的mi RNAs,且这些差异表达的mi RNAs表达具有时空特异性。其中mi R-137-3p在撕脱伤后2周表达下降-。预测靶基因calpain2在撕脱伤运动神经元中表达增加。2.体外培养的神经细胞模型中验证了mi R-137-3p的靶基因Capn2,且下调Calpain-2基因的表达能抑制神经细胞中n NOS蛋白的表达水平。3.确定了mi R-137-3p-calpain-2-n NOS通路在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用机制,上调mi R-137-3p能减少神经细胞的过氧化损伤。4.确定了脊髓内定位微注射mi R-137-3p慢病毒载体,能转染外源性mi R-137-3p入活体动物损伤的运动神经元胞体且持续作用3周,达到上调mi R-137-3p表达水平的效果。5.确定了mi R-137-3p-calpain-2-n NOS通路在臂丛根性撕脱伤运动神经元凋亡中的作用机制,上调mi R-137-3p能减少撕脱伤运动神经元的凋亡。为以mi R-137-3p-calpain-2-n NOS为分子靶标,治疗运动神经元疾病提供了新的研究思路。(本文来源于《中山大学》期刊2016-05-01）
方心俞[9]（2016）在《氯化锂对大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元再生与再髓鞘化的作用及机制研究》一文中研究指出第一部分:氯化锂对大鼠臂丛神经根性撕脱再植后神经元轴突再生及再髓鞘化的影响目的:研究氯化锂对大鼠臂丛根性撕脱再植模型神经再生与再髓鞘化的影响方法:制造成年大鼠C5-7臂丛撕脱、C6神经根回植模型,腹腔注射氯化锂或生理盐水,在术后6周、12周采用TGT评分(terzis grooming test,TGT)、电生理(electromyography,EMG)评估大鼠运动功能恢复;免疫荧光染色、荧光金(fluorogold,FG)逆标检测运动神经元存活、轴突再生情况;电镜检测肌皮神经(Musculocutaneous nerve,MCN)内再生神经轴突的数量、再髓鞘化程度;免疫荧光染色检测肌肉再支配情况。在术后2周、4周、6周、12周采用荧光实时定量聚合酶链式反应(Quantitative-Polymerase Chain Reaction,Q-PCR)分别检测脊髓前角和肌皮神经内神经营养因子和髓鞘蛋白基因的表达情况。结果:氯化锂在早期加速了实验动物运动功能的恢复;12周时,两组功能恢复到相当水平。氯化锂改善了运动神经元的存活率;在短时间内加速了运动神经元的再生速度(6周),但并没有增加最终长入再植神经的轴突数量(12周);氯化锂处理的再生神经髓鞘化程度更高,电生理潜伏期更短;氯化锂并没有增加肌肉的再支配率,但是氯化锂组动物的肌肉萎缩程度较轻;氯化锂组治疗动物在手术后早期脊髓前角内脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)的m RNA表达量即上升,并持续整个恢复期,而肌皮神经内神经营养因子m RNA的表达无明显变化;氯化锂刺激肌皮神经内髓鞘蛋白零(Myelin protein zero,MPZ)和周围髓鞘蛋白22(Peripheral myelin protein 22,PMP22)两个髓鞘基因m RNA的表达在术后早期即上升,并持续整个恢复期。结论:氯化锂在大鼠臂丛撕脱再植模型中,可以加快轴突再生和再髓鞘化的过程,促进运动功能的恢复。而这个效应可能是通过增加神经元内BDNF基因的表达量以及刺激外周神经髓鞘基因的表达来实现的。第二部分:氯化锂对雪旺细胞神经营养因子和髓鞘相关蛋白表达的影响目的:研究氯化锂对体外培养的雪旺细胞(Schwann cell,SCs)神经营养因子和髓鞘相关蛋白在基因和蛋白水平表达的影响方法:采用组织块种植法和酶消化法结合从预变性2周臂丛神经中分离、培养雪旺细胞。检测不同浓度氯化锂对雪旺细胞活力和增殖的影响。Q-PCR检测氯化锂对雪旺细胞内神经营养因子和髓鞘相关蛋白m RNA表达的影响。Western-blot检测氯化锂对雪旺细胞内神经营养因子和髓鞘相关蛋白在蛋白水平表达的影响。结果:1-3m M浓度的氯化锂对雪旺细胞的增殖无明显作用,高于3m M浓度的氯化锂抑制雪旺细胞的活力。氯化锂增加雪旺细胞髓鞘蛋白MPZ和PMP22的m RNA表达量。氯化锂增加雪旺细胞MPZ蛋白的表达量,但对PMP22蛋白的表达量无影响。氯化锂对雪旺细胞的神经营养因子表达无明显影响。结论:氯化锂可增强雪旺细胞髓鞘相关蛋白在m RNA和蛋白水平的表达。第叁部分:氯化锂对背根神经节神经元轴突再生和神经营养因子表达的影响目的:研究氯化锂对背根神经节(Drosal root ganglion,DRG)神经元轴突再生和神经营养因子在基因和蛋白水平上表达的影响。方法:从孕15天大鼠胚胎脊髓DRG中分离神经元。采用酶消化和机械分离法获得DRG神经元单细胞悬液并培养、纯化后,检测不同浓度氯化锂对DRG神经元活力的影响。采用组织块种植法研究氯化锂对DRG神经元轴突再生的影响。Q-PCR和Western-blot检测氯化锂对DRG神经元内神经营养因子m RNA和蛋白表达情况的影响,酶联免疫吸附法(enzyme linked immuno sorbent assay,ELISA)检测氯化锂对DRG神经元培养基内BDNF蛋白浓度的影响。结果:浓度为1m M的氯化锂对DRG神经元的生长无影响,更高浓度则有明显抑制作用。氯化锂促进了DRG组织块(explant)的轴突再生速度;氯化锂提升DRG神经元中BDNF的m RNA和蛋白的表达量,对其他神经营养因子的表达无明显改变;氯化锂提升了DRG神经元培养基内BDNF蛋白的含量。结论:氯化锂可促进DRG神经元BDNF的表达和分泌。第四部分:氯化锂对体外共培养的背根神经节神经元与雪旺细胞的影响目的:研究氯化锂对体外共培养的DRG神经元和雪旺细胞的成髓鞘作用及机制方法:采用第二、叁部分方法分离、培养、纯化雪旺细胞和DRG神经元。将纯化后的雪旺细胞加入DRG神经元培养基共培养。免疫荧光染色检测氯化锂、BDNF、BDNF中和抗体对共培养体系中髓鞘形成的影响。采用Western-blot定量氯化锂、BDNF、BDNF中和抗体对共培养体系内髓鞘蛋白量的影响。结果:氯化锂促进了雪旺细胞与DRG神经元共培养时的髓鞘形成,其作用与BDNF的促髓鞘形成作用相当。而加入BDNF中和抗体至含氯化锂的共培养体系后,这种促进作用被抑制。结论:氯化锂促进雪旺细胞与DRG神经元共培养体系内的髓鞘形成,这个效应可能是通过增加DRG神经元和雪旺细胞共培养中的BDNF表达实现的。(本文来源于《福建医科大学》期刊2016-05-01）
袁群芳,罗浩轩,陈媛,袁鸣洲,程骁[10]（2015）在《电针疗法对臂丛根性撕脱伤脊髓后角及中央管nNOS蛋白表达的影响》一文中研究指出目的采用电针疗法干预大鼠臂丛神经撕脱伤模型,探索电针疗法对臂丛根性撕脱伤脊髓后角及中央管n NOS蛋白表达的影响。方法健康、雌性成年Sprague-Dawley(SD)大鼠共40只,行臂丛神经根性撕脱手术,随机分为撕脱伤组(AV组)和撕脱伤加电针治疗组(AV+EA组),AV+EA组动物隔日接受大椎(DU4)和手叁里(LI10)电针治疗直至处死,每次治疗的输出脉冲波形为非对称双向疏密波,以20 Hz频率不间断治疗15 min。动物存活1周、2周、3周、6周处死,选取C7节段脊髓,行NADPH-d酶组织化学染色和中性红复染。结果脊髓后角,在AV组n NOS的微量表达;在AV+EA组2~3周n NOS在健侧的表达比伤侧增多,至6周脊髓后角n NOS阳性神经元表达AV组损伤侧;AV+EA组n NOS阳性神经元的表达与同时期的AV组。结论电针疗法导致脊髓后角及中央管n NOS阳性神经元的时空表达特异性。(本文来源于《解剖学研究》期刊2015年06期）
臂丛根性撕脱伤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨大鼠臂丛根性撕脱后脊髓基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达变化以及葛根素对其表达的影响。方法成年雄性SD大鼠174只,随机分为正常组、模型组、葛根素低、中、高处理组。模型组和葛根素处理组行右侧C_5～C_7脊神经前根撕脱术,术后腹腔注射给药。Western Blot法检测C_5～C_7节段脊髓MMP-9蛋白的表达。结果与正常组比较,臂丛神经根性撕脱后1 d时MMP-9蛋白表达达高峰,3 d降至接近正常,1周后下降至较低水平。葛根素处理组脊髓组织MMP-9蛋白表达在1 d时比模型组显着降低。结论 MMP-9可能参与臂丛根性撕脱后早期损伤反应,且葛根素可能有助于减轻该种损伤。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
臂丛根性撕脱伤论文参考文献
[1].王雨.葛根素对臂丛根性撕脱伤大鼠脊髓前角GFAP、iNOS、CGRP蛋白表达的影响[D].湖北民族大学.2019
[2].陈传奇,陈龙菊,吴太鼎,谭云霞,李丹.葛根素对臂丛根性撕脱后脊髓MMP-9蛋白表达的影响[J].中国临床解剖学杂志.2019
[3].韦勇,邓丹琼,吴盛龙,林烈宝,黄飞飞.银杏叶提取物对大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元轴突再生及再髓鞘化的影响[J].中国临床药理学杂志.2019
[4].陈传奇.葛根素对臂丛根性撕脱后脊髓前角运动神经元NGF、GAP-43mRNA及蛋白表达的影响[D].湖北民族学院.2017
[5].何琼.新生儿臂丛根性撕脱伤的应用解剖学研究[D].南华大学.2017
[6].周春,李占玉.健侧颈7神经根移位对全臂丛根性撕脱伤术后对侧运动皮层的远期影响[J].立体定向和功能性神经外科杂志.2016
[7].刘琳琳,王亚琼,袁群芳,周丽华.外源性一氧化氮对臂丛根性撕脱伤后脊髓的影响[J].解剖学研究.2016
[8].唐颖.miR-137-3p调控臂丛根性撕脱伤的机制[D].中山大学.2016
[9].方心俞.氯化锂对大鼠臂丛根性撕脱再植后神经元再生与再髓鞘化的作用及机制研究[D].福建医科大学.2016
[10].袁群芳,罗浩轩,陈媛,袁鸣洲,程骁.电针疗法对臂丛根性撕脱伤脊髓后角及中央管nNOS蛋白表达的影响[J].解剖学研究.2015
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