导读:本文包含了慢性低灌注损伤论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:蛋白激酶B,纤维化,肾,缺血再灌注
慢性低灌注损伤论文文献综述
李渭敏,仲吉英,陈奕豪,吕婉娴,王汉兵[1]（2019）在《蛋白激酶B介导的APPL1在肾缺血再灌注损伤致肾脏慢性纤维化的机制研究》一文中研究指出目的观察蛋白激酶B(Akt)介导下pH域磷酸络氨酸结合域和亮氨酸拉链基元1(APPL1)对肾缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)小鼠肾纤维化的保护机制。方法取雄性C57BL/6小鼠24只,随机分为2组:普通小鼠假手术组(WT-C组)、普通小鼠肾缺血再灌注组(WT-I/R组);取APPL1基因敲除小鼠48只,随机分为4组:APPL1基因敲除假手术组(AK-C组)、APPL1基因敲除肾缺血再灌注组(AK-I/R组)、APPL1基因敲除+Akt抑制剂处理组(AK-L组)、APPL1基因敲除+生理盐水处理组(AK-S组)。除WT-C组和AK-C组外,其余组均制备肾IRI模型。AK-L在造模成功后腹腔给予Akt抑制剂(LY294002)6 mg/kg,后每隔24 h再腹腔注射相同剂量LY294002到第7天,AK-S组注射生理盐水。再灌注24 h时每组随机取6只小鼠,检测BUN和Scr浓度,进行肾小管损伤评分,测定肾组织APLL1表达和Akt磷酸化水平。再灌注14 d时每组随机处死6只小鼠,评估肾纤维化程度,测定肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白、α-平滑肌动蛋白、APLL1的表达和Akt磷酸化水平。结果再灌注24 h时血清BUN和Scr的浓度、肾小管损伤评分比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P>0.05);与WT-C组、AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组升高(P<0.05),AK-L组最高(P<0.05)。再灌注14 d时,肾组织胶原蛋白1、纤连蛋白和α-平滑肌动蛋白的表达及和肾纤维化程度比较,WT-C组与AK-C组之间差异无统计学意义(P>0.05);与WT-C组和AK-C组比较,WT-I/R组、AK-I/R组、AK-L组和AK-S组纤维化指标表达升高及肾纤维化程度升高(P<0.05),AK-L组最高(P<0.05)。再灌注24 h和14 d时,与WT-C组比较,WT-I/R组肾组织APPL1表达上调及Akt磷酸化水平升高(P<0.05);再灌注24 h时,与AK-C组比较,AK-I/R组和AK-S组Akt磷酸化水平升高(P<0.05),与AK-I/R组比较,AK-L组Akt磷酸化水平降低(P<0.05)。结论 Akt介导下APPL1对肾IRI小鼠的肾慢性纤维化有保护作用。(本文来源于《临床肾脏病杂志》期刊2019年10期）
张奇龙[2]（2019）在《牡荆素调控Epac通路减轻大鼠慢性低灌注脑缺血损伤的神经保护作用机制》一文中研究指出目的:研究Epac信号通路在大鼠脑缺血低灌注损伤中的作用,探明牡荆素对慢性低灌注脑缺血损伤的保护作用机制,为把牡荆素开发成安全有效的应用于防治脑缺血临床药物提供实验依据。方法:1.将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、2VO组、2VO+Vitexin(2.5mg/kg)组、2VO+Vitexin(5mg/kg)组、2VO+Vitexin(10 mg/kg)、2VO+灯盏花素(5 mg/kg)组。通过永久性结扎大鼠双侧颈总动脉的方法对大鼠进行慢性脑缺血造模。大鼠学习记忆能力利用Morris水迷宫实验方法检测,脑组织病理学变化分别用HE,Tunel染色法检测,蛋白免疫印记法检测大鼠脑海马组织中Epac1、Epac2、Rap1、p-ERK/ERK1/2、NLRP3、Caspase1、IL-1?、IL-6、Cleaved caspase3蛋白表达的变化。2.OGD模型建立:首先将HT22细胞接种在培养瓶中,长至约80%后,加入无氧无糖培养基,放入叁气培养箱中在37℃含1%O_2,5%CO_2条件下进行缺氧5h,然后后将无氧无糖培养基换成正常培养基再放入普通培养箱中复氧24h建立氧糖剥夺模型。将实验分为Control组、OGD组、OGD+Vitexin组。MTT法检测HT22细胞活力,LDH试剂盒检测HT22细胞损伤,ELISA试剂盒检测HT22细胞IL-6表达,ROS试剂盒检测HT22细胞内活性氧,Western Blot检测HT22细胞中Epac1、Epac2、NLRP3、Caspase1、IL-6和Cleaved Caspase3蛋白的表达量。结果:1.水迷宫结果发现:与假手术对照组比较,模型组大鼠的游泳速度没有明显变化,但是模型组的潜伏期、游泳距离、目标象限停留的时间以及穿越目标象限的次数显着降低;与模型组比较,尽管牡荆素中、高剂量组和阳性药对照组没能改变的大鼠的游泳速度,但是其降低了潜伏期和游泳距离,增加了大鼠的目标象限停留的时间和穿越目标象限的次数,说明牡荆素对大鼠的空间学习和记忆能力有明显的改善。2.HE染色结果显示:与假手术组比较,模型组海马和皮层神经元明显减少,细胞间隙增大,排列紊乱,细胞核固缩深染明显。与模型组相比,牡荆素中、高剂量组和阳性药对照组明显减轻大鼠的海马和皮层的病理损伤。在TUNEL染色结果中,与假手术组相比,模型组大鼠的海马和皮层被染色阳性的细胞数目明显增加。与模型组相比,在牡荆素中、高剂量组和阳性对照组海马和皮层观察到TUNEL染色阳性的细胞数显着减少,提示牡荆素保护慢性低灌脑缺血后的神经元损伤。3.在动物实验结果中,WB结果显示,与假手术组相比,模型组的Epac1,Epac2,Rap1,P62和p-ERK/ERK1/2的蛋白表达明显下降,NLRP3,Caspase1,IL1-?,IL-6,Cleaved caspase3蛋白表达明显升高。与模型组比较,牡荆素中、高剂量组和阳性对照组可上调Epac1,Epac2,Rap1,P62,p-ERK蛋白表达,下调NLRP3,Caspase1,IL-1?,IL-6,Cleaved caspase3蛋白的表达?4.在细胞实验结果中,HT22细胞缺氧复氧后,模型组细胞活力下降,细胞损伤增加,ROS产生增多,IL-6释放量增加,Epac1,Epac2蛋白表达减少,NLRP3,Caspase1,Cleaved Caspase3和IL-6蛋白表达增加。与OGD组相比,牡荆素组能够提升细胞活力,减轻细胞损伤,减少炎症因子IL-6和活性氧ROS的释放,可促使Epac激活,上调Epac1,Epac2蛋白表达,下调NLRP3,Caspase1,Cleaved Caspase3,IL-6蛋白表达,减轻炎症反应,抑制细胞凋亡,保护神经元功能?结论:牡荆素能够改善慢性低灌注脑缺血大鼠的学习记忆能力,保护受损伤的神经元细胞,减轻脑缺血导致的氧化应激,炎症反应和细胞凋亡,其机制可能与调控EPAC及下游相关蛋白紧密相关,提示EPAC可能是牡荆素改善慢性脑缺血损伤发生的重要分子机制,为牡荆素治疗慢性低灌注脑缺血所致的神经系统疾病提供了新的实验依据。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-01）
张棋,舒佳惠,欧阳梦琪,王庆松[3]（2018）在《慢性脑低灌注致大鼠肠黏膜损伤及claudin-3表达变化的研究》一文中研究指出目的观察慢性脑低灌注(CCH)大鼠回肠黏膜形态学及紧密连接蛋白claudin-3表达变化,并探讨两者的相关性。方法将80只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)和慢性脑低灌注组(CCH组),采用永久性双侧颈总动脉结扎法建立CCH大鼠模型,Sham组只分离双侧颈总动脉而不结扎。两组分别于造模成功后1、4、12及24 w取回肠末段组织制成石蜡切片,伊红-苏木素(HE)染色,观察肠黏膜组织形态学变化;免疫荧光标记claudin-3检测其表达量的变化;对肠黏膜损伤程度与claudin-3表达量进行相关性分析。结果 CCH组较同时间Sham组回肠黏膜损伤明显(P <0.01);CCH组4 w、12 w及24 w与1 w比较损伤显着加重(P <0.01)。CCH组上皮细胞间claudin-3明显缺失(P <0.01),1 w时最显着,4、12、24 w后逐渐回升,但均较同时间Sham组显着减少。肠黏膜损伤程度与claudin-3表达水平呈负相关(P <0.05)。结论 CCH可致大鼠回肠黏膜持续性损伤及claudin-3表达减少,引发相关肠功能异常。(本文来源于《西南国防医药》期刊2018年12期）
曹丹丹,孙静,白云飞,王苗,郭晨佳[4]（2018）在《周细胞在慢性脑血流低灌注血-脑脊液屏障损伤中的作用》一文中研究指出目的探讨慢性脑血流低灌注损伤对大脑皮质血-脑脊液屏障及周细胞的影响及可能机制。方法采用大鼠双侧颈总动脉结扎(two-vessel occlusion,2-VO)模型,手术后3、14和30 d检测脑血流量变化。采用荧光免疫组织化学法染色检测周细胞以及纤维蛋白原表达,原代培养周细胞进行细胞增生实验,透射电镜观察血-脑脊液屏障超微结构。结果各模型组均出现脑血流下降,30 d时脑血流仍显着低于对照组。各模型组均有不同程度的纤维蛋白原的血管外渗漏;电镜结果可见基底膜增厚、血管外周围间隙致密物质沉积、星形胶质细胞突起水肿和红细胞血管外渗漏。周细胞数量在术后3、14和30 d均增多;体外实验低浓度纤维蛋白原可促进周细胞增生,而高浓度(20 g/L)纤维蛋白原对周细胞有毒性作用。结论慢性脑血流低灌注破坏大脑皮质血-脑脊液屏障,刺激周细胞增生,纤维蛋白原的渗出可能是引起周细胞增生的主要原因。(本文来源于《首都医科大学学报》期刊2018年04期）
徐扬[5]（2018）在《川芎嗪对慢性低灌注脑损伤小鼠的神经保护作用及机制研究》一文中研究指出目的:本研究采用单侧颈总动脉永久性结扎方法建立慢性低灌注脑损伤(chronic cerebral hypoperfusion,CCH)动物模型,观察川芎嗪对慢性低灌注脑损伤的改善效果,并寻找川芎嗪改善慢性低灌注脑损伤的机制,旨在为川芎及其提取物川芎嗪临床治疗脑缺血疾病提供理论及实验依据。方法:将健康的C57BL/6雄性小鼠60只,随机分为四组,即假手术组、模型组、川芎嗪组、阳性药组,每组15只。采用单侧颈总动脉永久性结扎复制慢性低灌注脑损伤小鼠模型。走横木实验检测小鼠运动能力;Morris水迷宫实验检测小鼠认知功能;HE染色及尼氏小体染色法观察小鼠皮质区神经元基本病理形态学变化;免疫组化法检测小鼠皮质区HIF-1α、VEGF、VEGFR-2的表达。结果:1.小鼠行为学测试结果(1)走横木实验结果显示,模型组小鼠与假手术组相比,滑足次数增加、潜伏期、整体运动时间延长(均为P<0.01)。与模型组相比,川芎嗪组小鼠滑足次数显着减少(P<0.01),潜伏期、整体运动时间缩短,两组之间比较差异有统计学意义(均为P<0.05)。说明慢性低灌注脑损伤造成了小鼠精细运动障碍,经川芎嗪治疗后,相对改善了小鼠的运动障碍,提高了小鼠的运动能力。(2)Morris水迷宫实验结果显示,模型组小鼠与假手术组相比,逃避潜伏期明显变长,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.01),说明模型组小鼠认知功能明显下降。川芎嗪组与模型组相比,逃避潜伏期缩短,两组之间比较差异有统计学意义(P<0.01),提示川芎嗪组可显着提高小鼠学习记忆能力,改善认知功能障碍。2.HE及尼氏染色结果(1)HE染色结果显示,假手术组小鼠脑皮质区神经细胞排列整齐,胞体较大,胞膜完整。模型组小鼠神经元排列紊乱,出现较多核固缩。与模型组相比,川芎嗪组神经元缺失及神经元排列紊乱情况均减轻。(2)尼氏染色结果显示,假手术组小鼠皮质区神经元尼氏小体丰富,模型组小鼠神经元尼氏小体明显减少(P<0.01)。川芎嗪组与模型组相比,神经元内尼氏小体明显增多(P>0.01)。3.免疫组化结果免疫组化结果显示,与假手术组相比,模型组小鼠HIF-1α、VEGF、VEGFR-2蛋白表达均有明显增加(均为P<0.01)。与模型组相比,川芎嗪组可显着上调HIF-1α、VEGF、VEGFR-2 蛋白的表达(P<0.01)。结论:1.川芎嗪具有改善慢性低灌注脑损伤小鼠运动功能的作用。2.川芎嗪具有改善慢性低灌注脑损伤小鼠认知功能的作用。3.川芎嗪可减轻慢性低灌注脑损伤小鼠缺血后的神经损伤。4.川芎嗪可激活HIF-1α-VEGF-VEGFR-2通路,促进血管新生,改善缺血区血流供应,对神经元起保护作用。综上所述,川芎嗪通过上调HIF-1α、VEGF、VEGFR-2蛋白的表达,激活HIF-1α-VEGF-VEGFR-2通路,改善因缺血造成的神经细胞损伤,进而改善慢性低灌注脑损伤小鼠学习记忆功能。(本文来源于《黑龙江中医药大学》期刊2018-06-01）
李哲,靳玮,李娜,高俊淑,杨蕊[6]（2018）在《紫草素对慢性脑低灌注损伤大鼠认知功能的保护作用》一文中研究指出目的观察紫草素对慢性脑低灌注损伤大鼠所致认知损害的保护作用。方法雄性SD大鼠经双侧颈动脉结扎建立慢性脑低灌注损伤大鼠模型,将SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组和紫草素(SK)治疗组。以Morris水迷宫检测其空间学习记忆能力;取大鼠海马组织测定其丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、乙酰胆碱酯酶(AChE)的活力、乙酰胆碱转移酶(ChAT)含量。结果 SK高剂量组0.7mg·100g~(-1)·d~(-1))、低剂量组0.35mg·100g~(-1)·d~(-1)均可明显改善慢性脑低灌注损伤大鼠学习记忆障碍,可增加海马组织中SOD活性、抑制MDA的形成(P<0.01);降低TChE含量、提高ChAT活性(P<0.01)。结论 SK可明显改善慢性脑低灌注损伤大鼠模型的学习记忆能力,减轻氧化应激损伤、增强中枢胆碱能系统功能。(本文来源于《脑与神经疾病杂志》期刊2018年05期）
杜宇[7]（2018）在《糖尿病对慢性脑低灌注脑白质损伤的影响及炎性机制》一文中研究指出目的本实验拟探究2型糖尿病对慢性脑低灌注导致的认知功能障碍和脑白质损伤的影响和机制。方法利用双侧颈总动脉狭窄(Bilateral common carotid artery stenosis,BCAS)4周的方法在2型糖尿病模型db/db小鼠和对照组小鼠体内构建慢性脑低灌注模型,利用脑血流仪检测小鼠脑血流的改变,利用行为学检测小鼠认知功能变化,利用卢卡斯快蓝染色检测小鼠脑白质损伤,利用免疫荧光染色检测小鼠脑白质胶质细胞和髓鞘的变化,利用荧光定量PCR检测小鼠脑白质炎症因子的改变。结果对照组和db/db小鼠在BCAS术后脑血流均有所降低。对照组小鼠在BCAS处理后工作记忆明显下降,脑白质损伤,小胶质细胞和星型胶质细胞激活,少突胶质细胞数目减少,髓鞘碱性蛋白表达降低,小鼠脑内促炎因子TNF-α和IL-1β表达含量升高。而db/db小鼠在BCAS术后工作记忆无明显变化,脑白质无进一步损伤,小胶质细胞和星形胶质细胞未见明显激活,小鼠脑内促炎因子TNF-α和IL-1β升高幅度明显低于对照组,抗炎因子IL-10和IL-4表达明显增高,IL-1Ra表达量增高。结论2型糖尿病小鼠通过抑制胶质细胞激活,抑制促炎因子的表达,促进抗炎因子分泌,并通过增加IL-1Ra拮抗促炎因子的作用,从而减轻慢性低灌注对小鼠认知功能和脑白质产生的损伤。(本文来源于《上海交通大学》期刊2018-05-01）
赵娜娜[8]（2018）在《家族性高胆固醇血症加重慢性低灌注后脑白质损伤及认知功能障碍》一文中研究指出第一部分LDLR基因敲除高胆固醇血症大鼠的脑白质改变目的探究低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)基因敲除高胆固醇血症大鼠与野生型大鼠脑白质的组织学差异。方法选取LDLR-/-大鼠(30只)及LDLR+/+大鼠(28只),在15周,18周,26周龄时,采用酶联免疫法测定两组大鼠的血清胆固醇水平,通过透射电子显微镜观察脑胼胝体区域轴索结构,通过蛋白印迹法对脑胼胝体区髓鞘碱性蛋白(myelinbasicprotein,MBP)进行定量分析。另外,在大鼠26周龄时,通过快蓝染色法染髓鞘,免疫荧光染色法进一步检测脑白质区MBP表达水平及观察细胞形态学改变。结果与LDLR+/+大鼠相比,LDLR-/-大鼠血浆胆固醇浓度明显升高,26周时可高达3.3倍。电镜结果显示LDLR-/-大鼠自15周出现轴索损伤,且随时间进展轴索损伤逐渐加重。蛋白印迹显示26周LDLR-/-大鼠的肼胝体区域MBP表达水平显着降低,同时快蓝染色结果显示LDLR-/-大鼠胼胝体区神经纤维出现疏松、弥散性空泡形成及有髓神经纤维的缺失(2.23±0.71)显着高于LDLR+/+大鼠(0.43±0.55),并且LDLR-/-大鼠少突胶质细胞数量明显减少,星形胶质细胞及小胶质细胞大量激活。结论本研究发现LDLR-/-大鼠出现自发性高胆固醇血症,在成年早期的脑白质区域即存在轴索损伤、髓鞘脱失、少突胶质细胞减少,以及星形胶质细胞和小胶质细胞异常激活。第二部分高胆固醇血症加重慢性低灌注后脑白质损伤及认知功能障碍目的脑白质病变患者的血管病理学和高胆固醇血症病理学常常共存。本文探究慢性脑低灌注和家族性高胆固醇血症的相互作用对大鼠脑白质损害和认知功能损害的影响。方法通过敲除大鼠低密度脂蛋白受体(LDLR-/-)来模拟家族性高胆固醇血症模型,并通过在双侧颈总动脉上放置酪蛋白制作的缩窄器来模拟脑慢性低灌注模型(GCAS)。将实验大鼠分为 LDLR+/+(+/+)(n=28)、LDLR-/-大鼠(-/-)(n=30)、LDLR+/+大鼠 GCAS(+/+GCAS)(n=30)、LDLR-/-大鼠 GCAS(-/-GCAS)(n=30)4组。利用超高分辨率激光多普勒血流仪(MoorLDI2-IR)记录脑血流(CBF),用7 T小动物磁共振(MRI)扫描仪测量脑血流信号、颅内梗塞灶及脑白质解剖连通性。其余还包括Western blot、Morris水迷宫实验和组织学评价包括免疫荧光染色、透射电镜(EM)。结果假手术组1～12周脑血流基本无变化,但至12周时LDLR-/-组、LDLR+/+GCAS 组及 LDLR-/-GCAS 组脑血流分别下降至 34.3±8.4%、22.9± 12.6%、7.4±5.3%。与LDLR+/+组相比,LDLR-/-组肼胝体区神经纤维束的连接性受损。在LDLR +/+ GCAS组及LDLR-/-GCAS组中,胼胝体区神经纤维不仅连通性受损,且神经纤维束的数量明显减少,而且这种现象在LDLR-/-GCAS组中协同加剧(P = 0.037)。与 LDLR+/+组相比,LDLR-/-组及 LDLR+/+GCAS 组脑白质的瓦解在神经炎症方面以星形胶质细胞及小胶质细胞的激活为主要特征,其次有胼抵体区髓鞘的稀疏及轴索的脱失等,这种损伤在复合损伤组(LDLR-/-GCAS)更加严重。此外,相对 LDLR-/-组及 LDLR+/+ GCAS 组,LDLR-/-GCAS组空间记忆能力受损明显加重。结论家族性高胆固醇血症可能会加重脑慢性低灌注,进而进一步加重大鼠的脑白质损伤及认知功能障碍。(本文来源于《南京大学》期刊2018-05-01）
尚运之,翟志永[9]（2017）在《舌静脉注射没食子酸的慢性低灌注大鼠学习记忆能力及脑氧化应激损伤相关指标观察》一文中研究指出目的观察舌静脉注射没食子酸(GA)的慢性低灌注大鼠学习记忆能力及脑氧化应激损伤相关指标变化。方法 48只大鼠随机分为4组各12只。A、B组大鼠制备慢性低灌注模型,A组在制模前后各5天舌静脉注射100 mg/kg GA,B组给予等量生理盐水;C、D组参照A组手术方法处理大鼠但不结扎双侧颈总动脉,C组在手术前后各5天舌静脉注射100 mg/kg GA,D组给予等量生理盐水。比较各组大鼠的学习记忆能力(逃避潜伏期、目标象限所用时间百分比、游泳速度)及脑氧化应激损伤相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总硫醇(TT)]。结果与D组比较,B组第1~4天逃避潜伏期增加(P均<0.05);与B组比较,A组第1~4天逃避潜伏期减少(P均<0.05)。与D组比较,B组目标象限所用时间百分比减少(P均<0.05);与B组比较,A、C组目标象限所用时间百分比增加(P均<0.05)。与D组比较,B组SOD、GSH-Px、TT降低,MDA升高(P均<0.05);与B组比较,A组和C组SOD、GSH-Px、TT升高,MDA降低(P均<0.05)。结论 GA能改善慢性低灌注大鼠的学习记忆能力及修复脑氧化应激损伤。(本文来源于《山东医药》期刊2017年47期）
余颖[10]（2017）在《小胶质细胞电压门控质子通道Hv1在慢性低灌注导致的缺血性脑白质损伤中的作用及机制研究》一文中研究指出目的:血管性认知功能障碍(Vascular cognitive impairment,VCI)是认知功能障碍的主要病理原因之一。造成血管性认知功能障碍的一个常见原因就是动脉硬化导致的慢性脑低灌注。在长期慢性缺血的情况下,大脑的原位免疫细胞小胶质细胞会出现活化并产生一系列生物介质。电压门控质子通道Hv1是一种近期被发现的离子通道,它对质子具有高度的选择性,且在中枢神经系统中仅特异的表达于小胶质细胞上。Hv1主要通过对细胞内质子的外排来起到帮助NADPH氧化酶产生活性氧的作用。本研究拟以电压门控能够质子通道Hv1为调控靶点,研究其在慢性低灌注导致的白质损伤中的作用及可能的作用机制。方法:使用双侧颈总动脉狭窄(bilateral common carotid artery stenosis,BCAS)的小鼠模型,模拟长期慢性缺血导致的脑白质损伤。手术期间利用经颅多普勒(transcranial Doppler monitor)检测脑血流的变化。在手术后3、7、14、28天利用免疫荧光染色观察髓鞘碱性蛋白MBP及髓鞘糖蛋白MAG的表达量变化。在造模28后采用LFB染色观察髓鞘排列及脱失的情况,利用透射电镜观察胼胝体区髓鞘形态、厚度及其包绕的神经纤维的变化情况。利用八臂迷宫对术后28天的小鼠进行行为学评估,明确造模后其认知能力的改变。免疫荧光染色观察少突胶质细胞及少突胶质细胞前体细胞的动态变化情况。利用免疫荧光染色及Western blot技术观察小胶质细胞的数量及形态的变化以及电压门控质子通道Hv1和NAPDH氧化酶的主要组分Nox2在胼胝体区的表达量变化。利用选择性基因敲除计数得到的Hv1-/-小鼠,观察同野生型小鼠比较,造模前后小胶质细胞的活化情况及活性氧和炎性因子的产生情况,少突胶质细胞系增殖和分化的情况,胼胝体区白质受损的情况以及行为学检测到的认知功能的变化情况。进一步利用原代培养的野生型和Hv1-/-小胶质细胞与少突胶质细胞前体细胞共培养并OGD处理,分别研究小胶质细胞产生活性氧和促炎因子的情况,以及少突胶质细胞前体细胞分化的情况。结果:在术后28天时LFB染色,透射电镜以及行为学的结果均证实模型制作成功。LFB染色显示髓鞘纤维在长期慢性缺血后出现排列紊乱和缺失的情况,透射电镜发现同假手术组相比,胼胝体区域的髓鞘变薄,部分区域甚至出现髓鞘脱失。行为学结果证实手术后小鼠的工作记忆受到损害,而参考记忆基本被豁免,提示前额叶-皮质下神经环路的破坏。而电镜结果显示髓鞘包绕的神经纤维直径无明显变化,且皮层和海马区的尼氏染色也未发现明显的神经元数目缺失,说明模型造成的损害主要集中在髓鞘,而对神经元损伤并不严重。对少突胶质细胞细胞系进行免疫荧光染色观察发现,成熟的少突胶质细胞在慢性缺血的影响下数量逐渐减少,而少突胶质细胞前体细胞代偿性增加。小胶质细胞出现活化并且数量增多,Hv1及Nox2的表达量上调。而选择性敲除Hv1的小鼠同野生型小鼠相比,在造模28天后小胶的活化和数量增多受到了明显的抑制,ROS,Nox2和促炎因子TNF-α以及IL-1β的表达量也显著下调。对少突胶质细胞系进行与Brd U的免疫荧光双标染色发现,同野生型小鼠相比,Hv1-/-小鼠在慢性低灌注损伤后少突胶质细胞前体细胞代偿增生更为明显,且能够更加有效的分化形成成熟的少突胶质细胞。LFB染色,MAG、MBP免疫荧光染色以及透射电镜的结果均显示Hv1-/-小鼠的髓鞘损伤情况较野生型小鼠有明显缓解,行为学的结果也证实Hv1-/-小鼠认知功能损害较野生型小鼠轻。分别由野生型和Hv1-/-小鼠进行原代培养得到的小胶质细胞和少突胶质细胞前体细胞共培养的实验结果显示,OGD处理后Hv1-/-小鼠小胶质细胞产生活性氧以及促炎因子TNF-α、IL-1β较野生型明显减少。同野生型相比,与Hv1-/-小胶质细胞共培养的少突胶质细胞前体细胞更明显的分化。Western blot结果显示Hv1对小胶质细胞功能的影响可能是通过Akt信号通路实现的。结论:慢性低灌注可以造成脑白质的脱髓鞘改变以及认知功能缺损,期间伴随着小胶质细胞的活化和少突胶质细胞系的损伤和分化障碍。选择性敲除Hv1可以减轻白质损伤和认知功能的降低,这可能是通过抑制小胶质细胞产生活性氧以及促炎因子,进而促进了少突胶质细胞系的存活和分化成熟实现的。提示Hv1有望成为低灌注导致的脑白质缺血性损伤的治疗靶点。(本文来源于《华中科技大学》期刊2017-05-01）
慢性低灌注损伤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:研究Epac信号通路在大鼠脑缺血低灌注损伤中的作用,探明牡荆素对慢性低灌注脑缺血损伤的保护作用机制,为把牡荆素开发成安全有效的应用于防治脑缺血临床药物提供实验依据。方法:1.将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、2VO组、2VO+Vitexin(2.5mg/kg)组、2VO+Vitexin(5mg/kg)组、2VO+Vitexin(10 mg/kg)、2VO+灯盏花素(5 mg/kg)组。通过永久性结扎大鼠双侧颈总动脉的方法对大鼠进行慢性脑缺血造模。大鼠学习记忆能力利用Morris水迷宫实验方法检测,脑组织病理学变化分别用HE,Tunel染色法检测,蛋白免疫印记法检测大鼠脑海马组织中Epac1、Epac2、Rap1、p-ERK/ERK1/2、NLRP3、Caspase1、IL-1?、IL-6、Cleaved caspase3蛋白表达的变化。2.OGD模型建立:首先将HT22细胞接种在培养瓶中,长至约80%后,加入无氧无糖培养基,放入叁气培养箱中在37℃含1%O_2,5%CO_2条件下进行缺氧5h,然后后将无氧无糖培养基换成正常培养基再放入普通培养箱中复氧24h建立氧糖剥夺模型。将实验分为Control组、OGD组、OGD+Vitexin组。MTT法检测HT22细胞活力,LDH试剂盒检测HT22细胞损伤,ELISA试剂盒检测HT22细胞IL-6表达,ROS试剂盒检测HT22细胞内活性氧,Western Blot检测HT22细胞中Epac1、Epac2、NLRP3、Caspase1、IL-6和Cleaved Caspase3蛋白的表达量。结果:1.水迷宫结果发现:与假手术对照组比较,模型组大鼠的游泳速度没有明显变化,但是模型组的潜伏期、游泳距离、目标象限停留的时间以及穿越目标象限的次数显着降低;与模型组比较,尽管牡荆素中、高剂量组和阳性药对照组没能改变的大鼠的游泳速度,但是其降低了潜伏期和游泳距离,增加了大鼠的目标象限停留的时间和穿越目标象限的次数,说明牡荆素对大鼠的空间学习和记忆能力有明显的改善。2.HE染色结果显示:与假手术组比较,模型组海马和皮层神经元明显减少,细胞间隙增大,排列紊乱,细胞核固缩深染明显。与模型组相比,牡荆素中、高剂量组和阳性药对照组明显减轻大鼠的海马和皮层的病理损伤。在TUNEL染色结果中,与假手术组相比,模型组大鼠的海马和皮层被染色阳性的细胞数目明显增加。与模型组相比,在牡荆素中、高剂量组和阳性对照组海马和皮层观察到TUNEL染色阳性的细胞数显着减少,提示牡荆素保护慢性低灌脑缺血后的神经元损伤。3.在动物实验结果中,WB结果显示,与假手术组相比,模型组的Epac1,Epac2,Rap1,P62和p-ERK/ERK1/2的蛋白表达明显下降,NLRP3,Caspase1,IL1-?,IL-6,Cleaved caspase3蛋白表达明显升高。与模型组比较,牡荆素中、高剂量组和阳性对照组可上调Epac1,Epac2,Rap1,P62,p-ERK蛋白表达,下调NLRP3,Caspase1,IL-1?,IL-6,Cleaved caspase3蛋白的表达?4.在细胞实验结果中,HT22细胞缺氧复氧后,模型组细胞活力下降,细胞损伤增加,ROS产生增多,IL-6释放量增加,Epac1,Epac2蛋白表达减少,NLRP3,Caspase1,Cleaved Caspase3和IL-6蛋白表达增加。与OGD组相比,牡荆素组能够提升细胞活力,减轻细胞损伤,减少炎症因子IL-6和活性氧ROS的释放,可促使Epac激活,上调Epac1,Epac2蛋白表达,下调NLRP3,Caspase1,Cleaved Caspase3,IL-6蛋白表达,减轻炎症反应,抑制细胞凋亡,保护神经元功能?结论:牡荆素能够改善慢性低灌注脑缺血大鼠的学习记忆能力,保护受损伤的神经元细胞,减轻脑缺血导致的氧化应激,炎症反应和细胞凋亡,其机制可能与调控EPAC及下游相关蛋白紧密相关,提示EPAC可能是牡荆素改善慢性脑缺血损伤发生的重要分子机制,为牡荆素治疗慢性低灌注脑缺血所致的神经系统疾病提供了新的实验依据。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
慢性低灌注损伤论文参考文献
[1].李渭敏,仲吉英,陈奕豪,吕婉娴,王汉兵.蛋白激酶B介导的APPL1在肾缺血再灌注损伤致肾脏慢性纤维化的机制研究[J].临床肾脏病杂志.2019
[2].张奇龙.牡荆素调控Epac通路减轻大鼠慢性低灌注脑缺血损伤的神经保护作用机制[D].安徽医科大学.2019
[3].张棋,舒佳惠,欧阳梦琪,王庆松.慢性脑低灌注致大鼠肠黏膜损伤及claudin-3表达变化的研究[J].西南国防医药.2018
[4].曹丹丹,孙静,白云飞,王苗,郭晨佳.周细胞在慢性脑血流低灌注血-脑脊液屏障损伤中的作用[J].首都医科大学学报.2018
[5].徐扬.川芎嗪对慢性低灌注脑损伤小鼠的神经保护作用及机制研究[D].黑龙江中医药大学.2018
[6].李哲,靳玮,李娜,高俊淑,杨蕊.紫草素对慢性脑低灌注损伤大鼠认知功能的保护作用[J].脑与神经疾病杂志.2018
[7].杜宇.糖尿病对慢性脑低灌注脑白质损伤的影响及炎性机制[D].上海交通大学.2018
[8].赵娜娜.家族性高胆固醇血症加重慢性低灌注后脑白质损伤及认知功能障碍[D].南京大学.2018
[9].尚运之,翟志永.舌静脉注射没食子酸的慢性低灌注大鼠学习记忆能力及脑氧化应激损伤相关指标观察[J].山东医药.2017
[10].余颖.小胶质细胞电压门控质子通道Hv1在慢性低灌注导致的缺血性脑白质损伤中的作用及机制研究[D].华中科技大学.2017