导读:本文包含了蛋白分离纯化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,活性,卵白,抗氧化,分离法,白蛋白,吸附剂。
蛋白分离纯化论文文献综述
叶孟亮,张春晖,朱玲玉,贾伟,张鸿儒[1]（2019）在《牦牛骨胶原蛋白促成骨活性肽分离纯化及结构鉴定》一文中研究指出牦牛(Bos grunniens)是我国珍贵的畜种资源,牦牛骨中含有丰富的胶原蛋白(约占21.5%),补充胶原蛋白肽可以增加骨胶原纤维网架的规则性和牢固性。深入开展对牦牛骨精深加工技术的研究探讨,充分利用牦牛骨中丰富的骨胶原蛋白开发功能性食品,对提高牦牛附加值、增加藏区牧民收益、促进牧区社会经济发展和稳固边疆具有重要意义。本研究以前期实验室制备得到的牦牛骨胶原蛋白肽为研究对象,利用超滤、体积排阻色谱、反向液相色谱和液相色谱串联质谱联合Mascot 2.4 search engine技术对牦牛骨胶原蛋白肽进行了进一步分离、纯化和结构鉴定。结果表明,经超滤后收集得到的组分UF-Ⅳ(Mw <3 kDa)表现出较高的促成骨细胞增殖活性;经SuperdexTM peptide 10/300 GL色谱柱(体积排阻色谱法)分离后,组分SP-Ⅲ表现出较高的促成骨细胞增殖活性,在0.5 mg/mL作用浓度下,促成骨细胞增殖率高达160.6%;经RP-HPLC分离纯化,组分SP-Ⅲ经Innoval C18色谱柱进一步分离后的组分F8表现出较强的促成骨细胞增殖活性(190.6%)。利用反向液相色谱串联质谱法联合Mascot 2.4 search engine对其氨基酸序列进行测定,共鉴定得到35条肽段。基于相对丰度、分子量、比对标准得分等指标筛选出9条具有较高潜在促成骨细胞增殖活性肽进行化学合成验证其体外生物活性,GPAGPPGPIGNV(GP-12)肽相较其它8条肽段具有更高的促成骨细胞增殖活性(142.7%)。综上,牦牛骨胶原蛋白肽在未来工业生产功能性和促进营养健康的食品中具有很大的应用潜力,可用于介导治疗骨质疏松症。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集》期刊2019-11-13）
魏光强,黄琳茹,林诗洋,黄艾祥[2]（2019）在《奶渣蛋白肽的分离纯化及其抗氧化活性研究》一文中研究指出以牦牛奶渣为原料,采用贯筋藤蛋白酶酶解制备奶渣蛋白肽,通过超滤、Q-Sepharose FF凝胶层析进行分离纯化,并分别测定各分离组分的体外抗氧化活性值。结果表明:奶渣蛋白肽Q-Sepharose FF凝胶层析分离的最优工艺条件为NaCl洗脱浓度0.1 mol/L,上样量40 mg/mL,洗脱流速2.0 mL/min,共分离出A,B,C叁个组分,其中组分A的抗氧化能力最强,对ABTS自由基清除率的IC_(50)为4.379 mg/mL,DPPH自由基的清除率IC_(50)为3.921 mg/mL,还原能力IC_(50)为1.196,羟自由基清除率IC_(50)为5.076 mg/mL。(本文来源于《中国乳品工业》期刊2019年10期）
贺茂芳,张博,苗延青,王春阳,韩禄[3]（2019）在《一种新型硼亲和磁性纳米吸附剂的制备及其对糖蛋白的分离纯化》一文中研究指出通过表面引发-原子转移自由基聚合法,将3-丙烯酰基苯硼酸(AAPBA)原位聚合在Fe_3O_4@SiO_2表面,制备了一种含有苯硼酸聚合物链的磁性纳米吸附剂(Fe_3O_4@SiO_2@-pAAPBA)。通过红外光谱、X射线光电子能谱、热重分析和透射电镜对该吸附剂进行了表征。采用静态吸附法测定了此吸附剂对卵清蛋白和辣根过氧化物酶吸附容量分别为373.9μg·mg~(-1)和471.3μg·mg~(-1),远高于对牛血清白蛋白和溶菌酶的吸附容量,说明此吸附剂对糖蛋白具有较高的吸附容量和吸附选择性。采用磁性分散固相萃取法对糖蛋白和非糖蛋白的混合溶液进行分离,发现此吸附剂仅能对糖蛋白特异性识别。最后,将其应用于鸡蛋清中糖蛋白的分离纯化,获得了良好的效果。(本文来源于《分析科学学报》期刊2019年04期）
姬中伟,毛健,刘双平[4]（2019）在《小米蛋白肽制备、分离纯化及生物活性研究进展》一文中研究指出该文综述了国内外有关小米蛋白肽的制备、分离纯化、结构鉴定及生物活性评价等研究进展,国内外相关研究表明,小米蛋白经酶解或生物发酵制备的活性肽,具有抗氧化、抑菌、调节免疫、降血压等多种生理功效,在功能食品等领域具有较好的应用前景。同时,该文指出了目前有关小米蛋白肽的研究存在以下不足:微生物发酵法制备小米活性肽研究不够深入,如利用多菌种共同发酵制备小米活性肽等方面有待开展;小米活性肽在动物机体内的活性评价及作用机理研究不足;小米活性肽的稳定性以及风味特征等需要进一步明确。(本文来源于《食品与发酵工业》期刊2019年20期）
刘芳,卢婷,蔡梦迪,吴芳草,陈相好[5]（2019）在《Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备》一文中研究指出目的:获得高纯度Cas9蛋白,制备Cas9蛋白特异性抗体。方法:以Cas9基因序列为模板,设计特异性引物,PCR扩增获得Cas9基因全长序列,利用无缝拼接技术构建pET28a-Cas9重组表达载体;转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达Cas9蛋白,并利用His-Tag技术分离纯化Cas9蛋白;将纯化获得的Cas9蛋白免疫新西兰大白兔,制备Cas9蛋白多克隆抗体。结果:pET28a-Cas9重组表达载体转化的E.coli BL21(DE3)可表达Cas9蛋白,纯化的Cas9蛋白免疫家兔得到的多克隆抗体效价>1∶256 K。结论:本研究获得了高质量Cas9蛋白及多克隆抗体,为后续CRISPR-Cas9基因编辑的应用奠定了良好的基础。(本文来源于《贵州医科大学学报》期刊2019年07期）
姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰[6]（2019）在《菜籽蛋白水解物的分离纯化及抗肿瘤活性研究》一文中研究指出本研究将菜籽蛋白通过碱性蛋白酶-风味蛋白酶分步酶解制备得到菜籽蛋白水解物(RPH),在经过超滤、葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-15)以及半制备液相(RP-HPLC)分离纯化得到各级分离组分。采用MTT比色法分析菜籽蛋白水解物各组分RPHs(MW<1 ku)对人体肝癌细胞HepG2、乳腺癌细胞MBA-MD-231及人体结肠癌细胞Caco-2的体外抗增殖活性。当RPHs质量浓度为50～1 000μg/mL时,RPHs对HepG2细胞、MBA-MD-231细胞及Caco-2细胞均有一定的抑制作用,且抑制效果与样品浓度之间呈现出剂量依赖性;其中,HepG2细胞对RPHs的作用最为敏感。经Sephadex G-15凝胶柱分离后得到2个洗脱峰,收集并测定其活性,发现组分RPHs-F2具有更强的抗肿瘤细胞增殖活性;再进一步对其经半制备液相分离得到的组分进行体外抗增殖活性分析发现,除组分RPHs-F2-4外,其他3个分离组分都具有显着的抑制作用,而组分RPHs-F2-3对HepG2细胞具有最高的体外增殖抑制率,当作用质量浓度为1 000μg/mL时,抑制率为(51.53±5.59)%。因此认为菜籽蛋白酶解物分离组分RPHs-F2-3具有较好的抗肿瘤活性,可以作为功能性成分用于抗肿瘤相关的功能食品及保健品的开发。(本文来源于《中国粮油学报》期刊2019年07期）
夏潇潇,付岩,王飞,孙季,张鹏[7]（2019）在《花生中致敏蛋白Ara h6的分离纯化实验研究》一文中研究指出以天然花生为原料,冷榨去油并粉碎之后,通过浸提获得Ara h6粗蛋白液,再采用阴离子交换柱层析和分子筛凝胶过滤法进一步纯化,使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和飞行时间串联质谱对Ara h6蛋白进行鉴定。结果表明:分离纯化出的Ara h6蛋白纯度达到95%以上。(本文来源于《粮食与油脂》期刊2019年06期）
蒋雨晴,迟玉杰[8]（2019）在《卵白蛋白源抗菌肽的分离纯化与结构鉴定》一文中研究指出以卵白蛋白为原料,采用胃蛋白酶水解制备具有抑菌活性的蛋白肽。通过超滤和Superdex peptide 10/300凝胶色谱分离技术获得高抑菌性组分,以抗菌肽对大肠杆菌和沙门氏菌的抑菌性为试验指标,筛选最佳抑菌性组分,再进行反相高效液相色谱分离,测定分离得到的9个组分抑菌活性,发现C3组分的抑菌活性和得率最高,其中大肠杆菌及沙门氏菌抑菌圈直径分别为(19.32±1.45),(18.74±1.27)mm。最后采用高效液相色谱—电喷雾—质谱鉴定抗菌肽的结构,显示氨基酸序列为GlyLeu-Glu-Pro-Ile-Asn-Phe-Gln(GLESINFQ)。该肽经固相合成纯度为95.84%,其抑菌活性与C3组分无显着性差异(P>0.05),从而证明卵白蛋白源抗菌肽发挥抑菌活性的成分主要是肽段GLESINFQ。(本文来源于《食品与机械》期刊2019年07期）
赵静[9]（2019）在《林蛙胶原蛋白多肽的分离纯化、功能性研究及其微胶囊的制备》一文中研究指出本论文课题来源于吉林省科技厅攻关项目(20160204022NY):《林蛙残体胶原蛋白多肽的结构修饰及稳定性关键技术研究》。本研究以酶解过滤得到的具有高生物活性的林蛙胶原蛋白多肽(分子量小于3500Da)为原料,对其进行分离纯化及其功能性等研究。首先优化凝胶层析分离条件得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ叁个组分,利用高分辨液质联用仪(LC-MS)鉴定其氨基酸序列,筛选出各组分的优势序列。其次,对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分的抗氧化和ACE抑制活性进行研究,结合所得氨基酸序列探究抗氧化和ACE抑制活性的构效关系。最后,以林蛙胶原蛋白肽为芯材,制备林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊,考察其在体外模拟胃肠液中的缓释效果。本文的研究内容及对应结果如下:1.利用葡聚糖凝胶层析分离技术分离纯化林蛙胶原蛋白多肽,对层析介质规格、上样量和洗脱流速叁个主要条件进行优化,得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分,再对各组分多肽形貌进行扫描电镜分析,最后将叁个组分进行LC-MS检测得到各组分的优势氨基酸序列。结果如下:(1)层析分离条件为:层析介质SephadexG25、上样量1500μg、洗脱流速60mL/h时分离效果最好,得到叁个组分。(2)混合肽及Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的扫描电镜分析结果表明:原混合肽表面形貌呈圆球状,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分表面形貌相似,均是絮状,片状和棒状的混合,彼此间差异不明显。(3)从LC-MS检测所得氨基酸序列中,筛选出Ⅰ组分中的优势氨基酸序列有NMDMPPNK、LDAQVSALEGAR、LEVLEIIMAIFK,分别命名为Ⅰ_1、Ⅰ_2、Ⅰ_3;Ⅱ组分中的优势氨基酸序列有NALSPLK、MLDEVPK、MNAQNVGK,分别命名为Ⅱ_1、Ⅱ_2、Ⅱ_3;Ⅲ组分中的优势氨基酸序列有GGLVGIK、EISSLK、MAAISPK、MANSQLK,分别命名为Ⅲ_1、Ⅲ_2、Ⅲ_3、Ⅲ_4。2.对分离所得的多肽组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ进行抗氧化活性研究,考察了其对DPPH的清除能力、超氧阴离子的清除能力和还原力,并进一步探索其抗氧化构效关系。结果表明:(1)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分对DPPH清除率分别为74.3%、50.8%、59.0%;还原力分别为0.68、0.32、0.33;超氧阴离子清除率分别为33.4%、12.4%、11.5%,总体来讲,I的抗氧化活性最高。(2)LC-MS检测结果表明叁个组分氨基酸序列都含有Leu,Pro,Lys、Arg,这可能是叁个组分均有抗氧化活性的主要原因。(3)Ⅰ中优势序列的N端为Leu和酸性氨基酸的酰胺残基天冬酰胺Asn,而Ⅱ、Ⅲ中优势序列的N端多为中性氨基酸Met,这可能是Ⅰ组分抗氧化活性略高于Ⅱ、Ⅲ组分的原因。3.利用高效液相测定Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分多肽的ACE抑制活性,并探索其ACE抑制构效关系。结果表明:抑制剂浓度在0~10 mg/mL之间时,随着抑制剂浓度增大,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分ACE抑制率均逐渐增高,且Ⅲ组分的ACE抑制活性始终大于I、Ⅱ组分。LC-MS检测得出的I、Ⅱ、Ⅲ的优势氨基酸序列中,每个组分的优势序列C末端均为Lys或Arg,并且每个序列其C末端叁肽位置至少含有一个疏水性氨基酸,这可能是叁个组分均具有ACE抑制活性的主要原因。而Ⅲ组分的ACE抑制活性最高,可能是因为其分子量小,具有活性位点暴露多、分子移动快等特点。4.为提高林蛙胶原蛋白多肽在胃肠液内的生物利用率,增强其缓释效果,以海藻酸钠为壁材,微孔淀粉作吸附芯材的载体,利用锐孔凝固浴法制备了微胶囊,在体外模拟胃肠液的实验结果显示:林蛙肽/微孔淀粉-海藻酸钠微胶囊与林蛙肽-海藻酸钠微胶囊在模拟胃液中4h时,累积释放量分别为32%和41%,在模拟肠液中8h时,累积释放量分别为88%和83.6%。有载体的微胶囊在胃液中释放少,在肠液中释放量增加缓慢,说明有载体的微胶囊能起到一定的缓释作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
余谦,王勇,钱小红,秦伟捷,张普民[10]（2019）在《一种转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化新方法》一文中研究指出基因工程技术已经成为研究和生产重组人血清白蛋白(rHSA)替代人血清白蛋白(HSA)的重点技术,而白蛋白的纯化则是该技术的关键。本文主要介绍了从转基因猪血中纯化rHSA的一种新方法,即热乙醇沉淀与多级色谱分离相结合的rHSA纯化方法。热乙醇沉淀法可从猪血浆中获得rHSA粗提取液,此时rHSA的纯度可达69.5%,回收率达51.3%。进一步采用多级色谱分离法,即阴离子交换色谱和反相色谱法进一步纯化,得到rHSA的最终纯度约为100.0%,总回收率为41.1%。该方法为从转基因猪血浆中大规模纯化用于临床和生化研究的高纯度rHSA提供可能,同时也为rHSA替代HSA奠定了基础。(本文来源于《分析测试学报》期刊2019年05期）
蛋白分离纯化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
以牦牛奶渣为原料,采用贯筋藤蛋白酶酶解制备奶渣蛋白肽,通过超滤、Q-Sepharose FF凝胶层析进行分离纯化,并分别测定各分离组分的体外抗氧化活性值。结果表明:奶渣蛋白肽Q-Sepharose FF凝胶层析分离的最优工艺条件为NaCl洗脱浓度0.1 mol/L,上样量40 mg/mL,洗脱流速2.0 mL/min,共分离出A,B,C叁个组分,其中组分A的抗氧化能力最强,对ABTS自由基清除率的IC_(50)为4.379 mg/mL,DPPH自由基的清除率IC_(50)为3.921 mg/mL,还原能力IC_(50)为1.196,羟自由基清除率IC_(50)为5.076 mg/mL。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
蛋白分离纯化论文参考文献
[1].叶孟亮,张春晖,朱玲玉,贾伟,张鸿儒.牦牛骨胶原蛋白促成骨活性肽分离纯化及结构鉴定[C].中国食品科学技术学会第十六届年会暨第十届中美食品业高层论坛论文摘要集.2019
[2].魏光强,黄琳茹,林诗洋,黄艾祥.奶渣蛋白肽的分离纯化及其抗氧化活性研究[J].中国乳品工业.2019
[3].贺茂芳,张博,苗延青,王春阳,韩禄.一种新型硼亲和磁性纳米吸附剂的制备及其对糖蛋白的分离纯化[J].分析科学学报.2019
[4].姬中伟,毛健,刘双平.小米蛋白肽制备、分离纯化及生物活性研究进展[J].食品与发酵工业.2019
[5].刘芳,卢婷,蔡梦迪,吴芳草,陈相好.Cas9蛋白的克隆表达、分离纯化及多克隆抗体制备[J].贵州医科大学学报.2019
[6].姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰.菜籽蛋白水解物的分离纯化及抗肿瘤活性研究[J].中国粮油学报.2019
[7].夏潇潇,付岩,王飞,孙季,张鹏.花生中致敏蛋白Arah6的分离纯化实验研究[J].粮食与油脂.2019
[8].蒋雨晴,迟玉杰.卵白蛋白源抗菌肽的分离纯化与结构鉴定[J].食品与机械.2019
[9].赵静.林蛙胶原蛋白多肽的分离纯化、功能性研究及其微胶囊的制备[D].吉林大学.2019
[10].余谦,王勇,钱小红,秦伟捷,张普民.一种转基因猪血中重组人血清白蛋白分离纯化新方法[J].分析测试学报.2019
论文知识图
