拟南芥中一个锌指蛋白AT 5 g 47610的基因克隆及表达分析

论文摘要

逆境胁迫是植物正常生长发育与作物产量提高的重要限制因素,具有锌指结构的E 3泛素连接酶作为一个重要的蛋白家族,在植物逆境胁迫应激中起着重要的调控作用。本文从一个含有锌指结构的蛋白AT 5 g 47610出发,通过PCR对其基因进行克隆,然后连接到PET 32 a原核表达载体,37℃通过0.2 mM IPTG诱导出了目标蛋白,为后续的蛋白功能鉴定研究奠定了基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 实验材料
•     1.1.1 植物材料
•     1.1.2 菌株、载体
•     1.1.3 化学及分子生物学试剂
•   1.2 实验方法
•     1.2.1 引物设计
•     1.2.2 RNA提取及反转录为cDNA
•     1.2.3 AT 5 G 47610基因的扩增和纯化
•     1.2.4 载体片段连接体系的构建
•     1.2.5 连接产物的转化
•     1.2.6 表达菌株的制备及目标蛋白的诱导表达与检测
• 2 结果与分析
•   2.1 拟南芥RNA的提取
•   2.2 目标基因AT5G47610的PCR扩增
•   2.3 载体片段连接体系检测
•   2.4 目标基因蛋白的诱导表达
• 3 讨 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈存,高志宏,冯媛媛,伍勇,祁伟亮,陈成,陈洁,伍林涛,奉斌,蔡菁

关键词: 连接酶,基因克隆,诱导表达

来源: 种子 2019年04期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 成都师范学院化学与生命科学学院,贵州省农业科学院油菜研究所,贵州省农业科学院油料研究所,四川大学华西药学院

基金: 四川省科技厅应用基础项目(2017 JY 0178),四川省教育厅科研项目(17 ZB 0071),国家自然科学基金(31560402,31760398)

分类号: Q943.2

DOI: 10.16590/j.cnki.1001-4705.2019.04.081

页码: 81-84

总页数: 4

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