爪蟾卵母细胞论文_胡喆,Kiran,Sapkota,周燕

导读:本文包含了爪蟾卵母细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞,膜片,电压,非洲,受体,电极,通道。

爪蟾卵母细胞论文文献综述

胡喆,Kiran,Sapkota,周燕[1](2018)在《NMDA受体在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞表达体系中的建立》一文中研究指出目的:建立特异性表达NMDA受体(NMDAR)NR2AR、NR2BR亚型的爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞模型,选出合适的表达体系模型,为研究药物对NMDAR介导电流的影响奠定基础。方法:分别采用显微注射法和脂质体转染法将NMDAR表达在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞上,利用全细胞膜片钳技术,记录NMDAR亚型NR2AR、NR2BR介导的电流。结果:在建立的爪蟾卵母表达体系中,NMDAR基因注射成功率为100%,且能检测到NMDAR亚型NR2AR和NR2BR介导的内向电流,而在HEK-293表达体系中,转染成功率为(6.7±1.39)%,未检测到NMDAR介导的电流。结论:成功建立爪蟾卵母细胞NMDAR表达体系,可作为研究药物对爪蟾卵母细胞表达体系上NMDAR电流影响的合适的细胞表达体系模型。在HEK-293表达体系上未检测到相关电流,可能与其转染后细胞活性大大降低、脂质体转染效率低等因素有关。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2018年06期)

史钰芳[2](2017)在《青蒿素对异源性表达于爪蟾卵母细胞的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道的抑制作用》一文中研究指出青蒿素是从中药青篙中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物[10-12],作为一种有效的抗疟药物已被长期并广泛用于临床,其药理及毒理作用亦被广泛研究。鉴于在治疗疟疾患者中观察到的较高的药物安全性,青蒿素亦被用于治疗其他疾病,如感染,肿瘤,炎症,自身免疫性疾病、白血病、局麻剂、心律失常等。青蒿素能阻断豚鼠心室肌细胞外向整流钾电流、增加豚鼠心肌细胞电压依赖性钙内流及改善离子通道活性[13],青蒿素能以浓度及时间依赖方式阻断电压门控钠通道、内向整流钾电流及钙通道[14-16],进而发挥其抑制动作电位复极化和去极化的作用。青蒿素可能通过上述机制发挥抗心律失常作用,但潜在机制尚不十分清楚。HCN通道编码If电流,If电流由Na+(主要)、K+及少量Ca2+(具体分子作用不详)介导。已被证明在多种动物心肌肥厚模型中If和HCN mRNA的表达上调[17-20]。Stillitano等报道[21]在心衰患者的心房和心室中HCN2和HCN4通道的mRNA和蛋白水平均成倍数增长。If密度的增长能明显升高心室肌细胞发生异位的、类似起搏功能的动作电位的发生率,从而导致心律失常[22-24]。因此我们推断,在疾病状态中If的过度表达可能在心律失常发生机制中起关键作用。青蒿素是否对hHCN通道电流有作用尚无临床报道。在本研究中,将人HCN1,2,4异源性表达于爪蟾卵母细胞中,通过双电极电压钳技术观察青蒿素对hHCN通道的作用。研究发现,青蒿素能以浓度和使用依赖性方式减少hHCN通道电流。其电药理学特性与通道的“开放状态”抑制剂一致。青蒿素能有效阻断hHCN通道,其抗心律失常作用机制可能与其能阻滞If电流有关。(本文来源于《武汉大学》期刊2017-09-01)

张弛[3](2016)在《氯胺酮抑制表达在爪蟾卵母细胞上的人类HCN通道电流》一文中研究指出目的:研究氯胺酮对表达在非洲爪蟾卵母细胞上的人类HCN通道电流的电药理学特性。方法:将HCN通道(HCN1,HCN2,HCN4)表达在非洲爪蟾卵母细胞上,利用双电极电压钳技术记录通道电流。结果:临床浓度的氯胺酮可以有效的阻滞异源表达在爪蟾卵母细胞上HCN通道,其对HCN1的阻断作用最强,对HCN2和HCN4抑制没有显着差别。在钳制电压-30 mV,刺激电压-120 mV条件下,氯胺酮125μM使HCN1,HCN2,HCN4电流幅值分别降低(50.8±2.0)%,(33.4±2.9)%和(38.7±4.6)%,冲洗后,HCN电流部分恢复。在1~625μmol/L范围内氯胺酮呈浓度依赖性抑制叁种HCN电流,其半数抑制浓度(inhibitory concentration 50%,IC50)分别为67.0μmol/L,89.1μmol/L,84.0μmol/L。氯胺酮使叁种通道的激活曲线均浓度依赖性的左移,激活减慢,激活时间常数增大,但并不改变其电流激活的电压依赖性及反转电位且阻断没有使用依赖性和电压依赖性。结论:氯胺酮可浓度依赖性地阻滞表达在非洲爪蟾卵母细胞上的人类HCN通道电流,阻断具有强直性阻断特性,类似一个关闭态阻断剂。本研究可以为氯胺酮进一步的生物活性作用机制研究和应用以及HCN通道抑制剂结构功能类似物开发提供新的思路。(本文来源于《武汉科技大学》期刊2016-05-23)

杜卫华,范宗兴,王皓宇,郝海生,刘岩[4](2015)在《爪蟾卵母细胞抽提物可诱导牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程》一文中研究指出应用非洲爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞(Japanese Black cattle fetal fibroblasts,JBCFF),观察处理前后细胞的形态学变化,同时用免疫荧光染色法检测组蛋白的乙酰化状态和OCT4蛋白的表达,并对其多能性标志基因的mRNA表达水平进行定量分析。结果表明,与未处理细胞相比,经抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞组蛋白H3K9乙酰化程度与未处理组无显着差异;培养5~6d后细胞聚集形成"克隆簇"中碱性磷酸酶和Oct4蛋白染色阳性;同时也检测到Oct4和Nanog基因在其中的表达,而Sox2基因未见表达;且Oct4、Nanog基因表达量随处理后细胞培养时间的延长(4、5、6d)而呈依次上升趋势。可见,爪蟾卵母细胞抽提物能诱导和牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程,恢复其发育全能性,这对牛诱导性干细胞制备方法的探索和体细胞克隆及转基因克隆牛效率的提高具有一定的借鉴意义。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2015年09期)

孙燕,张树卓,卓仁恭,刘晓燕,马晓芸[5](2015)在《HCN通道在爪蟾卵母细胞中的功能表达》一文中研究指出目的:建立爪蟾卵母细胞表达的HCN通道的细胞模型,研究其生物学特性,并为药物评价建立细胞模型。方法:将HCN1及HCN2的互补DNA(c DNA)体外转录为互补RNA(c RNA)后,分别注射至去除滤泡膜的非洲爪蟾卵母细胞中,表达1~3 d后采用双电极电压钳技术记录其电流。结果:在爪蟾卵母细胞表达的HCN1及HCN2通道的同聚体细胞模型上,记录到了超极化激活的内向阳离子电流,此电流被称为Ih电流,可被HCN通道特异性阻断剂Cs Cl所阻断;在1 mmol/L的Cs Cl作用下,HCN通道产生的电流幅度显着减小,在-140 m V水平,HCN1电流幅度减少率为83.4%±9.5%(n=5,P<0.001),HCN2产生的电流幅度减少率为99.7%±0.6%(n=4,P<0.001)。结论:建立了表达HCN1及HCN2通道的爪蟾卵母细胞模型,为研究HCN通道生物学特点以及药物评价奠定了基础。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年04期)

叶炎生,刘晓黎,刘买利,李从刚[6](2014)在《非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的~(19)F NMR研究》一文中研究指出细胞内蛋白质的核磁共振技术(Protein In-cell NMR)能在原子分辨水平提供细胞内蛋白质的构象和功能信息,并已应用到非洲爪蟾卵母细胞系[1-3]。该细胞系是大量生物学研究常用到的动物细胞模型。然而因为细胞内环境极为复杂以及常规核磁方法本身存在的局限性,爪蟾卵母细胞内蛋白质的研究依然很少被报道。在此,我们将19F NMR应用于非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质(包括GB1,泛素,钙调蛋白以及无结构蛋白α突出核蛋白)的研究。我们发现卵母细胞内蛋白质的19F信号线宽与相应蛋白在大肠杆菌细胞内的线宽相比较为接近或窄化(图1)[4,5]。与此同时,我们观测到钙调蛋白在细胞内发生了构象变化(从Ca2+结合到Apo态的改变,图2)。因此,我们认为19F NMR将是个很有应用前景的研究技术以用于非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的研究。(本文来源于《第十八届全国波谱学学术年会论文集》期刊2014-10-10)

曹闪,楼钦钦,魏无际,秦占芬[7](2014)在《孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查》一文中研究指出非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)是生物学上研究卵细胞成熟过程及其机制的良好模型。由于GVBD受激素的调控,曾有研究将孕酮诱导的非洲爪蟾GVBD试验用于内分泌干扰物的筛查。通过预注射人体绒毛膜促性腺激素(HCG)提高非洲爪蟾卵母细胞对孕酮的敏感性、缩小个体差异,缩短试验时间等优化GVBD试验方法;并选用甲氧氯作为阳性参照物对优化的方法进行验证,最后用此方法研究了米非司酮、来曲唑、咪鲜胺3种化学物质对孕酮诱导GVBD的影响。结果发现,甲氧氯对GVBD的发生具有明显抑制作用,随着剂量的增加抑制作用增强,显示优化方法的可靠性。米非司酮作为孕酮受体拮抗剂,没有表现出抑制GVBD的效应,证明孕酮诱导爪蟾GVBD并非完全由孕酮受体(PR)介导。同时,来曲唑和咪鲜胺对孕酮诱导爪蟾GVBD没有影响,显示此两种物质在孕酮诱导GVBD过程中不具有内分泌干扰作用。(本文来源于《生态毒理学报》期刊2014年01期)

于津鹏,朱晓鹏,邴晖,长孙东亭,罗素兰[8](2013)在《α7乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达》一文中研究指出α7烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)是脑胆碱能神经系统中的一个重要部分,并且它与副交感神经系统末端的胆碱能抗炎通路相互联系。脑中的α7 nAChRs的作用涉及中枢神经系统的认知功能,故其激动剂和拮抗剂可用于多个认知功能障碍和炎症相关疾病的治疗,以及疾病机理的研究。其小分子激动剂能穿过血脑屏障且适用于多种认知功能障碍的治疗,如阿尔兹海默病和精神分裂症;其拮抗剂是激动剂的一个异构物家族,以芋螺毒素和金环蛇毒素为主要代表。因而,α7nAChRs已成为筛选与之相关的疾病治疗药物的重要靶点。虽然α7 nAChRs的特异性药物还没有进行临床试验,但近期的研究数据已显示出这一类药物具有很好的应用前景。实验采取体外转录的方法,将α7 nAChRs的基因在体外转录合成cRNA,并通过显微注射法注入非洲爪蟾卵母细胞(蛙卵),诱导培养使α7受体在细胞膜上表达,并运用双电极电压钳技术对表达的受体进行检测。结果显示,α7 nAChRs在蛙卵体内成功表达,并记录到了与ACh浓度呈正相关的内向电流,而且在蛙卵细胞内表达的α7受体模型与天然受体具有相同的结构和功能,可以用于筛选特异性作用于α7 nAChRs的药物或先导化合物。成功地建立了用于药物筛选的α7 nAChRs表达模型。(本文来源于《第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会论文摘要集》期刊2013-10-17)

沈立姿,于津鹏,房立丛,朱晓鹏,胡远艳[9](2013)在《肌肉型乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达》一文中研究指出建立肌肉型乙酰胆碱受体(胎儿型α1β1δγ和成年型α1β1δε)在非洲爪蟾卵母细胞中的表达模型,用于以这两种受体为靶点的药物筛选。将肌肉型乙酰胆碱受体的各个亚基基因在体外转录获得各自的cRNA,显微注射到非洲爪蟾卵母细胞中,利用双电极电压钳技术检测其表达情况,并确定不同浓度的乙酰胆碱对胎儿型α1β1δγ和成年型α1β1δε受体电流表达情况的影响。在卵母细胞中成功表达两种肌肉型乙酰胆碱受体;当乙酰胆碱浓度为1μmol/L时,α1β1δγ和α1β1δε受体电流很小,不能用于后续的检测试验,当浓度为5μmol/L时,完全激活α1β1δγ受体的开放电流达到最大6025 nA,当浓度为20μmol/L时,完全激活α1β1δε受体的开放电流达到最大2 742 nA,只注射ddH2O的对照组细胞则没有任何电流产生。该受体模型的成功建立,为筛选作用于肌肉型乙酰胆碱受体的药物提供了实验模型。(本文来源于《药物生物技术》期刊2013年04期)

张伦,高舒,彭志晴,侯丽颖,吴坤[10](2013)在《芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制》一文中研究指出目的:探讨不同浓度的芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及作用机制。方法:将健康的非洲爪蟾卵母细胞移入含不同浓度(0、20、80、160和500μmol/L)的芹菜素培养液中培养,另设阳性对照(孕酮5μg/mL)组。每隔1h观察生发泡破裂(germinal vesicle breakdown,GVBD)发生情况、并记录发生GVBD的细胞数目;同时用10%的叁氯乙酸固定,观察细胞核的变化;采用荧光染色法在激光共聚焦显微镜下观察细胞染色体的变化。收集上述各浓度芹菜素处理8h后的卵母细胞,采用Western blot法检测卵母细胞成熟相关蛋白p-Erk1、Mos和CyclinB2的表达。结果:与阴性对照组相比,当芹菜素浓度为80~500μmol/L且作用时间在4~8h时,卵母细胞GVBD发生率均明显升高(P均<0.05)。在80~500μmol/L芹菜素处理细胞8h后,p-Erk1、Mos和CyclinB2蛋白表达量明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论:芹菜素在卵母细胞体外培养过程中促进了第1次减数分裂的开启,其机制可能与MPF和MAPK信号通路的活化有关。(本文来源于《癌变·畸变·突变》期刊2013年04期)

爪蟾卵母细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

青蒿素是从中药青篙中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物[10-12],作为一种有效的抗疟药物已被长期并广泛用于临床,其药理及毒理作用亦被广泛研究。鉴于在治疗疟疾患者中观察到的较高的药物安全性,青蒿素亦被用于治疗其他疾病,如感染,肿瘤,炎症,自身免疫性疾病、白血病、局麻剂、心律失常等。青蒿素能阻断豚鼠心室肌细胞外向整流钾电流、增加豚鼠心肌细胞电压依赖性钙内流及改善离子通道活性[13],青蒿素能以浓度及时间依赖方式阻断电压门控钠通道、内向整流钾电流及钙通道[14-16],进而发挥其抑制动作电位复极化和去极化的作用。青蒿素可能通过上述机制发挥抗心律失常作用,但潜在机制尚不十分清楚。HCN通道编码If电流,If电流由Na+(主要)、K+及少量Ca2+(具体分子作用不详)介导。已被证明在多种动物心肌肥厚模型中If和HCN mRNA的表达上调[17-20]。Stillitano等报道[21]在心衰患者的心房和心室中HCN2和HCN4通道的mRNA和蛋白水平均成倍数增长。If密度的增长能明显升高心室肌细胞发生异位的、类似起搏功能的动作电位的发生率,从而导致心律失常[22-24]。因此我们推断,在疾病状态中If的过度表达可能在心律失常发生机制中起关键作用。青蒿素是否对hHCN通道电流有作用尚无临床报道。在本研究中,将人HCN1,2,4异源性表达于爪蟾卵母细胞中,通过双电极电压钳技术观察青蒿素对hHCN通道的作用。研究发现,青蒿素能以浓度和使用依赖性方式减少hHCN通道电流。其电药理学特性与通道的“开放状态”抑制剂一致。青蒿素能有效阻断hHCN通道,其抗心律失常作用机制可能与其能阻滞If电流有关。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

爪蟾卵母细胞论文参考文献

[1].胡喆,Kiran,Sapkota,周燕.NMDA受体在爪蟾卵母细胞和HEK-293细胞表达体系中的建立[J].广西医科大学学报.2018

[2].史钰芳.青蒿素对异源性表达于爪蟾卵母细胞的人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道的抑制作用[D].武汉大学.2017

[3].张弛.氯胺酮抑制表达在爪蟾卵母细胞上的人类HCN通道电流[D].武汉科技大学.2016

[4].杜卫华,范宗兴,王皓宇,郝海生,刘岩.爪蟾卵母细胞抽提物可诱导牛胎儿成纤维细胞发生部分重编程[J].畜牧兽医学报.2015

[5].孙燕,张树卓,卓仁恭,刘晓燕,马晓芸.HCN通道在爪蟾卵母细胞中的功能表达[J].生物技术通讯.2015

[6].叶炎生,刘晓黎,刘买利,李从刚.非洲爪蟾卵母细胞内蛋白质的~(19)FNMR研究[C].第十八届全国波谱学学术年会论文集.2014

[7].曹闪,楼钦钦,魏无际,秦占芬.孕酮诱导非洲爪蟾卵母细胞生发泡破裂(GVBD)试验方法的优化及干扰物质筛查[J].生态毒理学报.2014

[8].于津鹏,朱晓鹏,邴晖,长孙东亭,罗素兰.α7乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞上的表达[C].第十一届中国生物毒素研究及医药应用年会论文摘要集.2013

[9].沈立姿,于津鹏,房立丛,朱晓鹏,胡远艳.肌肉型乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达[J].药物生物技术.2013

[10].张伦,高舒,彭志晴,侯丽颖,吴坤.芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成熟的影响及其作用机制[J].癌变·畸变·突变.2013

论文知识图

爪蟾卵母细胞减数分裂过程中的3...TGA对爪蟾卵母细胞MI/ MII转变百...芹菜素对非洲爪蟾卵母细胞体外成...TGA对爪蟾卵母细胞GVBD50的影响...爪蟾卵母细胞异源表达各通道蛋...爪蟾卵母细胞成熟过程中细胞动物...

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