论文摘要
目的 SOX7基因在多种肿瘤中发挥抑癌作用,而对膀胱癌是否发挥作用报道较少。文中旨在探讨SOX7基因在膀胱癌中的表达情况,研究SOX7启动子甲基化对膀胱癌的调控及意义。方法采用GEPIA,Oncomine,MethHC和cBioPortal数据库预测SOX7在膀胱癌组织中的表达、启动子甲基化等。收集2017年1月至10月在上海市第十人民医院泌尿外科40份尿液标本。其中膀胱癌患者标本20份,正常对照者标本20份。通过甲基化特异性PCR检测尿液标本中SOX7基因的甲基化差异。培养膀胱癌细胞系,T24细胞中加入含有甲基化药物5-氮杂-2′脱氧胞苷（5-aza-dc）的培养基为5-aza-dc组,T24细胞加入同体积的DMSO为对照组。膀胱癌细胞系转染SOX7质粒为质粒组,转染空载质粒为空载组。Western blot检测SOX7在膀胱癌细胞系中的表达情况,通过CCK-8实验、平板克隆实验、流式细胞仪检测膀胱癌细胞去甲基化后的增殖,克隆形成及凋亡变化情况。结果数据库中膀胱癌组织甲基化水平明显高于正常组织（P<0.005）。膀胱癌患者尿液中15份（75%）SOX7甲基化水平增高,而正常人尿液中仅7份（35%）,差异有统计学意义（P<0.05）。5-aza-dc组SOX7蛋白的表达量较对照组上调,当浓度达到20μmol/L时,SOX7蛋白表达量相对较高。质粒组SOX7蛋白表达量较空载组上调明显。CCK-8结果显示,第5天,5-aza-dc组的A值较对照组显著降低（P<0.05）,质粒组T24细胞A值较空载组明显降低。克隆形成实验发现,5-aza-dc组每孔克隆形成数[（167.33±13.65）个]较对照组[（328.00±20.81）个]明显下降（P<0.05）。质粒组每孔克隆形成数[（136.00±15.00）个]较空载组[（280.67±13.43）个]明显下降（P<0.05）。5-aza-dc组T24细胞的凋亡率（27.89%）较对照组（3.79%）明显升高（P<0.05）,质粒组细胞凋亡率（21.28%）较空载组（9.90%）亦明显增高（P<0.05）。结论 SOX7在膀胱癌低表达,其表达受启动子甲基化调控,是膀胱癌的潜在生物学标志,在膀胱癌的发生、发展中发挥重要作用。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 吴元,张文涛,马文超,王瑞良,郭亚东,刘济,毛士玉,张俊峰,姚旭东
关键词: 膀胱癌,甲基化,凋亡
来源: 医学研究生学报 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 泌尿科学,肿瘤学
单位: 安徽医科大学上海临床学院泌尿外科,上海市第十人民医院泌尿外科
基金: 国家自然科学基金(81472389),上海市科研计划项目(19411967700)
分类号: R737.14
DOI: 10.16571/j.cnki.1008-8199.2019.12.011
页码: 1285-1290
总页数: 6
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