基于牛呼吸道合胞体病毒融合前F蛋白的间接ELISA方法的建立与应用

论文摘要

为确定牛呼吸道合胞体病毒（BRSV）在我国的流行情况,本研究以BRSV融合前F蛋白作为包被抗原,经各项条件优化后建立了检测BRSV抗体的间接ELISA方法:确定抗原最佳包被浓度为2 mg/L、待检血清的最佳稀释度为1∶100、最佳封闭液为3%明胶、羊抗牛Ig G-HRP的稀释度为1:8 000,抗体阴阳性临界值为0.204。特异性试验结果显示,该ELISA方法与阿卡斑病毒（AKAV）、牛轮状病毒（BRV）、蓝舌病病毒（BTV）、口蹄疫病毒（FMDV）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、牛病毒性腹泻病毒（BVDV）以及牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）的阳性血清无交叉反应。敏感性试验结果显示,当BRSV阳性血清稀释倍数达1∶6 400时仍为阳性结果,表明该方法具有较高的敏感性。重复性试验结果显示,ELISA组内、组间最大变异系数分别为6.80%和8.80%,表明该方法的重复性良好。对195份临床牛血清样品检测结果显示,BRSV抗体阳性率为61.0%;对其中的143份血清同时进行病毒中和试验检测,结果显示二者符合率为89.5%。上述结果表明本研究建立的间接ELISA方法可以用于牛群中BRSV抗体的检测,为BRSV的血清流行病学调查提供可靠的技术手段。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 血清
•   1.2 主要试剂
•   1.3 融合前F蛋白的纯化与鉴定
•   1.4 ELIS A反应条件的优化
•   1.5 临界值的确定
•   1.6 特异性试验
•   1.7 敏感性试验
•   1.8 重复性试验
•   1.9 符合率试验
•   1.1 0 临床样品检测
• 2 结果
•   2.1 融合前F蛋白的纯化与鉴定
•   2.2 间接ELIS A最佳反应条件的确定
•   2.3 临界值的确定
•   2.4 特异性试验结果
•   2.5 敏感性试验结果
•   2.6 重复性试验结果
•   2.7 符合率试验结果
•   2.8 间接ELIS A抗体检测方法的应用
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王磊,常继涛,于力

关键词: 牛呼吸道合胞体病毒,融合前的蛋白,间接,抗体检测

来源: 中国预防兽医学报 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊传染病研究创新团队

基金: 国家重点研发计划绵羊主要细菌病综合防控技术集成与示范(2018YFD0502106)

分类号: S852.653

页码: 1126-1130+1158

总页数: 6

文件大小: 1464K

下载量: 59