大肠杆菌ptsG基因缺陷菌株的构建及其发酵混合糖产L-丙氨酸

论文摘要

为了增强大肠杆菌（Escherichia coli）JH-B2利用混合糖产L-丙氨酸的能力,通过Red同源重组技术敲除了转运葡萄糖的关键基因ptsG,构建新菌株JH-B3。结果表明,以10%混合糖（5%葡萄糖和5%木糖）为碳源,ptsG基因缺陷菌株JH-B3同时利用葡萄糖和木糖,且在32 h时利用完葡萄糖,表明了ptsG基因的敲除大幅减弱了葡萄糖效应;而菌株JH-B2在发酵24 h时利用完葡萄糖,在28 h时才开始利用木糖,表现出葡萄糖效应。发酵至98 h,ptsG基因缺陷菌株JH-B3已经利用完木糖,其丙氨酸产量为94.1 g/L,生产强度为0.96 g/（L·h）,而菌株JH-B2在同等时间内还剩18.10 g/L木糖未利用,其丙氨酸产量为77.6 g/L,生产强度为0.79 g/（L·h）。ptsG基因缺陷菌株JH-B3的丙氨酸生产强度较JH-B2提高了21.5%,能够同时利用混合糖发酵产丙氨酸,为利用木质纤维素糖源生产丙氨酸提供了工业应用基础。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料与试剂
•     1.1.1 材料
•     1.1.2 化学试剂
•     1.1.3 培养基
•   1.2 仪器与设备
•   1.3 方法
•     1.3.1 大肠杆菌工程菌E.coli JH-B3菌株构建
•     1.3.2 重组菌株JH-B3的验证
•     1.3.3 发酵实验
•     1.3.4 分析检测
• 2 结果与分析
•   2.1 pts G基因缺陷菌株JH-B3验证
•   2.2 两种菌株利用葡萄糖的能力对比
•   2.3 两种菌株利用木糖能力对比
•   2.4 两种菌株利用混合糖能力对比
• 3 结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 潘海亮,王灿,赵筱,王永泽,王金华

关键词: 大肠杆菌,同源重组,混合糖,丙氨酸,葡萄糖效应

来源: 中国酿造 2019年11期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 湖北工业大学生物工程与食品学院发酵工程教育部重点实验室

基金: 国家“十二五”支撑计划(2012BAD27B03),湖北工业大学博士科研启动基金项目(BSQD12143)

分类号: Q78

页码: 160-164

总页数: 5

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