不同因素对银杏茎段定芽增殖的影响及增殖过程生理生化分析

论文摘要

银杏是第四纪冰川运动后遗留下来的裸子植物中最古老的孑遗植物,集药用、食用、观赏、材用于一体。银杏是落叶大乔木,具有很高的利用价值,银杏的果实可以延缓衰老,预防心脑血管疾病,美容养颜等有很高的食用价值、银杏的外表高大,树干笔直,有着很高的观赏价值、同时也有着很高的绿化价值和用材价值等都非常高。本试验以银杏的胚和茎段为实验材料,通过组织培养、对银杏定芽增殖影响因子的研究、对银杏定芽增殖过程中生理生化指标的测定,揭示银杏定芽增殖机理,探究影响银杏定芽增殖的因素,得出影响银杏组培增殖的因素,主要研究结果如下:1.消毒处理中升汞的处理时长是影响外植体的重要因素,处理时间过长容易导致外植体褐化,时间过短则消毒不彻底容易出现滋生细菌污染。通过对银杏胚和茎段两种不同外植体的消毒处理方法进行了筛选,发现银杏胚外植体用70%乙醇消毒30s、0.1%升汞溶液消毒6 min的效果最好;银杏茎段外植体用70%乙醇消毒30s、0.1%升汞溶液消毒10min的效果最好。2.初代培养中,银杏的成熟胚为外植体比茎段为外植体能更好更快的成苗,且污染率明显低于茎段外植体25%以上,适宜成熟胚诱导成为无菌苗的培养基为MS培养基,诱导率达到89.32%。用于组织培养的银杏种胚完成后熟的最佳贮藏时间为2-3个月。3.通过正交实验筛选出银杏茎段初代培养的最适培养基为MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L+AC0.2%;筛选出银杏定芽增殖的最适定培养基为MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.5mg/L+AC0.2%,增殖系数最大,增殖系数为3.89,增殖周期为40d左右。4.在银杏定芽增殖过程中,随着芽的形成与生长,需要大量营养物质的消耗,可溶性糖与可溶性蛋白含量随着定芽增殖过程表现出一定的规律,可溶性糖先先缓慢升高后快速升高的趋势;可溶性蛋白含量呈现先降低后升高再降低的趋势。在定芽增殖过程中,POD、SOD活性呈现出相同的变化规律,POD活性呈现先升高后降低的趋势;SOD活性呈现先升高后降低的趋势。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 1.前言
•   1.1 银杏及其应用价值
•     1.1.1 银杏的生物学特征
•     1.1.2 银杏的产地及生境
•     1.1.3 银杏的应用价值
•       1.1.3.1 银杏的观赏价值
•       1.1.3.2 银杏的食用价值
•       1.1.3.3 银杏的药用价值
•       1.1.3.4 银杏的木材利用及生态价值
•       1.1.3.5 银杏的其他价值
•   1.2 银杏组织及定芽培养的研究进展
•     1.2.1 银杏胚培养的研究进展
•     1.2.2 银杏茎段培养的研究进展
•     1.2.3 银杏定芽或直接再生不定芽快繁的研究进展
•   1.3 植物离体再生过程中生理指标变化的研究进展
•     1.3.1 可溶性糖的变化
•     1.3.2 可溶性蛋白的变化
•     1.3.3 酶活性的变化
•       1.3.3.1 过氧化物酶
•       1.3.3.2 超氧化物歧化酶
•   1.4 本研究的目的与意义
• 2.材料与方法
•   2.1 试验材料
•   2.2 主要仪器设备和试剂
•     2.2.1 主要仪器设备
•     2.2.2 主要药品及试剂
•   2.3 实验方法
•     2.3.1 银杏种子的贮藏与沙藏
•     2.3.2 培养基的制备
•     2.3.3 不同贮藏时间对银杏种胚萌发的探究
•     2.3.4 银杏外植体表面消毒处理
•       2.3.4.1 银杏胚的消毒处理
•       2.3.4.2 银杏茎段的消毒处理
•     2.3.5 银杏茎段的初代培养
•     2.3.6 银杏的定芽增殖
•     2.3.7 银杏定芽增殖的生理生化测定
•       2.3.7.1 可溶性糖含量的测定
•       2.3.7.2 可溶性蛋白质含量的测定
•       2.3.7.3 过氧化物酶POD活性测定
•       2.3.7.4 超氧化物歧化酶SOD活性测定
•   2.4 观察指标和统计分析方法
• 3.结果分析
•   3.1 银杏离体胚的萌发
•     3.1.1 不同贮藏时间处理对银杏胚萌发率的影响
•     3.1.2 不同消毒时间处理对银杏胚外植体消毒的影响
•   3.2 银杏茎段定芽的诱导与增殖
•     3.2.1 不同消毒时间处理对银杏茎段外植体消毒的影响
•     3.2.2 基本培养基对银杏茎段生长的影响
•     3.2.3 不同激素配比对银杏茎段生长的影响
•     3.2.4 银杏定芽增殖过程中可溶性糖含量的变化
•     3.2.5 银杏定芽增殖过程中可溶性蛋白含量的变化
•     3.2.6 银杏定芽增殖过程中过氧化物酶POD活性的变化
•     3.2.7 银杏定芽增殖过程中超氧化物歧化酶SOD活性的变化
• 4.讨论
•   4.1 培养中的玻璃化及褐化问题
•   4.2 银杏的定芽增殖
•   4.3 定芽增殖过程中生理生化的变化
•     4.3.1 定芽增殖过程中可溶性糖含量的变化
•     4.3.2 银杏定芽增殖过程中可溶性蛋白含量的变化
•     4.3.3 银杏定芽增殖过程中酶活性的变化
• 5.结论
• 参考文献
• 致谢

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 单超

导师: 邢世岩

关键词: 银杏,组织培养,定芽诱导,增殖培养,生理生化

来源: 山东农业大学

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 山东农业大学

分类号: Q945

总页数: 55

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