毛皮动物源肺炎克雷伯菌部分毒力基因、耐药基因检测及药敏试验

论文摘要

为了了解河北秦皇岛毛皮动物（狐、貉、貂）源肺炎克雷伯菌毒力基因、耐药基因分布及药物敏感性等情况,采用常规分离纯化、生化鉴定及分子生物学的方法对病原菌进行鉴定,动物致病性试验检测其致病性,PCR方法检测其主要K血清型、毒力基因和耐药基因,K-B法对常用西药进行药物敏感性检测,琼脂平板打孔法对中药药物敏感性进行检测,试管二倍稀释法检测中药最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示:此次共分离到48株肺炎克雷伯菌;48株肺炎克雷伯菌均能够使小鼠发病死亡;48株肺炎克雷伯菌均检测到fimH、wabG毒力基因,检出率为100%;mrkD毒力基因检出率为87.5%;blaTEM、aadA1、gyrB、gyrA、blaSHV-1、sul1、sul2、sul3、blaROB-1、tetA和tetD耐药基因的检出率分别为100.0%、100.0%、89.6%、4.2%、39.6%、18.8%、27.1%、16.7%、12.5%、60.4%和37.5%,未检出ermF耐药基因。西药药敏试验结果显示,48株肺炎克雷伯菌临床分离菌株均对头孢拉定、复方新诺明、林可霉素、替米考星、磺胺间甲氧嘧啶耐药。中药药敏试验结果显示,48株肺炎克雷伯菌临床分离菌株对乌梅、五味子极度敏感,抑菌圈直径在20～25 mm之间,MIC和MBC为15.63～62.50 g/L。本试验调查了河北秦皇岛地区毛皮动物源肺炎克雷伯菌的流行情况,对毛皮动物源出血性肺炎的防治具有重要的指导意义,更具公共卫生学意义。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 菌株来源
•   1.2 主要试剂及仪器
•   1.3 西药药敏纸片
•   1.4 中药
•   1.5 引物合成
•   1.6 试验动物
•   1.7 毛皮动物源肺炎克雷伯菌的分离、纯化
•   1.8 毛皮动物源肺炎克雷伯菌的鉴定
•     1.8.1 生化鉴定
•     1.8.2 PCR鉴定
•   1.9 K血清型PCR检测
•   1.10 动物致病性试验
•   1.11 毒力基因检测
•   1.12 耐药基因检测
•   1.13 西药药敏试验
•   1.14 中药药敏试验
•     1.14.1 菌株复苏及菌落计数
•     1.14.2 中药体外抑菌圈的测定
•     1.14.3 中药最小抑菌浓度（MIC）的测定
•     1.14.4 中药最小杀菌浓度（MBC）的测定
• 2 结果
•   2.1 肺炎克雷伯菌生化鉴定和16S rRNA鉴定
•   2.2 肺炎克雷伯菌特异性检测
•   2.3 肺炎克雷伯菌主要K血清型检测结果
•   2.4 动物致病性试验结果
•   2.5 毒力基因检测结果
•   2.6 耐药基因检测结果
•   2.7 西药药敏试验结果
•   2.8 中药体外抑菌试验
•   2.9 中药MIC和MBC测定结果
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 朱利霞,王洪彬,赵希艳,高桂生,史秋梅,高光平

关键词: 毛皮动物,肺炎克雷伯菌,毒力基因,耐药基因,药敏试验

来源: 中国兽医学报 2019年09期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室

基金: 河北省现代农业产业体系肉牛产业创新团队疫病防控岗项目(HBCT2018130203),河北省教育厅资助项目(SLRC2017037),河北省高层次人才资助项目(A2016005046),河北科技师范学院科学研究基金项目

分类号: S852.61

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.09.14

页码: 1744-1752

总页数: 9

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