甲状腺转录因子-1单克隆抗体的制备及其应用价值分析

论文摘要

目的制备甲状腺转录因子-1（TTF-1）单克隆抗体,为临床工作及后续研究奠定基础。方法以聚合酶链反应扩增目的基因,并构建TTF-1/p ET32a重组质粒,诱导表达融合蛋白,经镍琼脂糖亲和层析柱洗脱目的蛋白,并将洗脱液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白纯度,经过免疫学评价合格后,进行小鼠体内免疫,效价评价后通过细胞融合筛选阳性细胞株,制备分泌TTF-1单克隆抗体,并对得到的抗体进行免疫组化验证。结果获得能稳定分泌TTF-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,且其产生的抗体与TTF-1抗原具有良好的免疫学反应。结论成功制备出TTF-1单克隆抗体,为进一步提高相关肿瘤的诊断率提供了新的试剂。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 实验动物与细胞株
•     1.1.2 主要试剂
•   1.2 方法
•     1.2.1 TTF-1载体构建
•     1.2.2 诱导表达融合蛋白
•     1.2.3 目的蛋白表达纯化
•     1.2.4 TTF-1重组蛋白的免疫学评价
•     1.2.5 杂交瘤细胞株的构建
•     1.2.6 单克隆抗体的鉴定
• 2 结果
•   2.1 重组表达载体的构建与鉴定
•     2.1.1 重组表达载体的构建
•     2.1.2 重组质粒的鉴定
•   2.2 重组蛋白的诱导表达和纯化
•   2.3 融合蛋白的鉴定
•   2.4 小鼠免疫评价结果
•   2.5 杂交瘤细胞株的筛选
•   2.6 抗体鉴定
• 3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈旭,张路遥,刘玲玲,翟晋豫,张会娟

关键词: 甲状腺转录因子,单克隆抗体,酶联免疫吸附实验,免疫组化

来源: 肿瘤基础与临床 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 郑州大学第一附属医院病理科,郑州大学基础医学院病理学与病理生理学系,郑州大学第一附属医院内分泌科

分类号: R392-33

页码: 369-374

总页数: 6

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