保卫细胞特异性启动子论文_董雯

导读:本文包含了保卫细胞特异性启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:特异性,细胞,拟南芥,烟草,狗尾草,气孔,叶脉。

保卫细胞特异性启动子论文文献综述

董雯[1](2013)在《狗尾草突变体的初筛及保卫细胞特异性启动子的克隆鉴定》一文中研究指出C_4光合作用是很多重要的粮食及能源作物固定碳的方式。研究发现,C_4植物的光能利用率比C_3植物高50%。将C_4光合途径引入水稻中,可以使水稻的光能利用率和产量提高50%,并且能够潜在的提高氮素和水分利用效率。狗尾草(Setaria viridis),是典型的C_4植物,禾本科,一年生草本。狗尾草是二倍体植物,2n=36,基因组很小,约为510M;植株矮小,所需生长条件易于控制;生长周期短,其光合途径是NADP-ME途径,是一种典型的C_4光合途径。基于以上优点,狗尾草成为研究C_4光合作用的模式植物。保卫细胞是植物叶片中水分和气体的进入通道,能够保持植物自身蒸腾作用和光合作用的平衡。经研究发现,在拟南芥保卫细胞中过量表达碳酸酐酶基因,转基因植株出现了以下变化:气孔导度下降;瞬时水分利用效率上升;CO2固定速率未发生改变;离体叶片鲜重损失较少;气孔密度和气孔指数减小。这就为我们增加了一种提高植物水分利用效率的方法。在本论文中,主要做了以下两方面的工作:1.筛选狗尾草突变体:采用物理和化学方法诱变狗尾草种子,观察狗尾草的突变表型,重点寻找C_4相关的突变表型。在这部分的实验中,我们采取了EMS诱变和γ射线诱变的方法,对狗尾草种子进行诱变处理,单株收取M2代种子。其中,EMS诱变处理浓度是0.4%和0.2%;γ射线诱变剂量为300、200、150Gy。收取到M2代种子后,采取田间种植的方法,筛选M2代突变体。目前为止,我们已经进行了两次大规模的筛选,共筛选了EMS诱变突变体6000份,γ射线诱变突变体3700份,已经获得了大量的突变体。其中,共筛选到了叶脉形态突变体60个,叶脉数目突变的突变体32个。叶脉形态突变主要有叶脉分支,次级脉明显,偏脉等;同时,我们将叶脉数目发生变化的植株叶片固定,制作石蜡切片,观察其叶脉的花环结构。结果显示,尽管植株叶脉数目发生了变化,它们的花环结构并没有发生明显的变化。这也说明叶脉数目变化是其他原因造成的,比如细胞体积增大。2.克隆鉴定保卫细胞特异性表达启动子:根据Nelson在2009年所发布的水稻植株中各基因表达的基因芯片的结果,找出能够在保卫细胞中特异性表达的基因,根据基因的表达丰度等因素从中选择了几个基因分别是:Os05g47630,Os09g15720,Os10g31320,Os04g57030,Os09g15670,Os08g02210,Os08g31810,Os04g57020,根据现有的基因序列,找到各基因的调控区域,对调控区域进行分析,重点分析保卫细胞特异性基序的出现次数和位置,克隆所选基因的启动子。将克隆的启动子连接到载体pCAMBIA1301上,构建表达载体。利用农杆菌介导的转化方法将构建好的表达载体转入水稻愈伤组织中,经过抗性筛选,再生,生根几个阶段,获得了pCAMBIA1301-pOs08g31810::GUS、pCAMBIA1301-pOs08g02210:: GUS、 pCAMBIA1301-pOs04g57020::GUS、pCAMBIA1301-pOs09g15670::GUS、pCAMBIA1301-pOs10g31320::GUS的转基因植株各15、11、12、11、10棵。对转基因植株进行PCR鉴定,共得到阳性转基因植株28棵,对转基因植株进行GUS染色,没有检测到GUS基因表达。(本文来源于《山东师范大学》期刊2013-05-21)

邓荟芬,刘春林,李进,范亚丽,阮颖[2](2007)在《拟南芥保卫细胞中特异性表达基因启动子片段基序分析》一文中研究指出将16个在拟南芥保卫细胞中进行特异性表达和8个非特异表达基因的转录起始密码子ATG上游-500bp的启动子序列在PLACE上进行分析,认为AAAAG基序和TAAAG基序控制某些基因在保卫细胞中进行特异性表达,但分析结果显示有的保卫细胞特异表达启动子的序列中却不含有这两个基序,说明还要其它类型的未知基序控制着保卫细胞中的特异表达,这一理论分析为进一步的实验研究提供了理论依据。(本文来源于《生物技术通报》期刊2007年03期)

李军,龚喜明,林惠琼,宋全波,陈珈[3](2004)在《DGP1,一个受干旱诱导的保卫细胞特异性启动子的构建与功能分析》一文中研究指出植物气孔运动的分子调控离不开高效的基因开关系统, 保卫细胞特异性表达的启动子近几年备受关注. 将保卫细胞特异性表达元件和干旱应答元件进行改造, 构建成一个新的受干旱诱导的保卫细胞特异性的启动子DGP1. 转基因烟草的组织化学定位表明, DGP1驱动的gus基 因在受到干旱诱导的情况下, 在保卫细胞中特异性表达, 而在未经干旱处理植株的保卫细胞和干旱处理的根、茎和花中均不表达. 对GUS活性进行定量测定, 结果显示GUS活性明显地受干旱诱导, 并且随着处理时间的延长而增强, 其中干旱诱导8 h后GUS的活性是诱导前的179倍. 而根、茎和叶肉组织在干旱诱导后GUS活性虽然有所提高, 但变化不大. 这些结果表明, 植物在遭遇干旱胁迫时, DGP1启动子可以驱动目的基因在保卫细胞专一性表达, 这就为通过基因工程的途径调控气孔开关运动奠定了基础.(本文来源于《中国科学(C辑:生命科学)》期刊2004年04期)

李军,陈珈中国农业大学生物学院植物生理生化国家重点实验室,王学臣[4](2004)在《诱导型保卫细胞特异性启动子的构建与功能分析》一文中研究指出气孔是植物与外界环境进行气体交换的门户。全球植物每年约耗掉65%的淡水资源,而这些水分大部分是通过气孔的蒸腾作用丧失掉的。因此有必要对气孔的开关进行调控。气孔运动的分子调控离不开高效的基因开关系统,保卫细胞特异性表达的启动子近几年倍受关注。我们的设想是:当水分供应充足时,气孔尽最大限度开放,吸收CO2,增加光合产量;当干旱来临时,气孔迅速关闭,减少水分丧失,提高作物的水分高效利用率。这一目标的实现,需要诱导型的保卫细胞特异性表达或强表达启动子的创建,使目的基因在特定的条件下特定的部位表达。鉴于此,本文成功地构建了两个启动子,即DGP1和SIGP1。(本文来源于《2004中国植物生理生态学学术研讨会论文摘要汇编》期刊2004-08-01)

李军[5](2004)在《诱导型保卫细胞特异性启动子的构建及Atdof1.7基因超表达对气孔运动的影响》一文中研究指出气孔是植物与外界环境进行气体交换的门户。全球植物每年约耗掉65%的淡水资源,而这些水分大部分是通过气孔的蒸腾作用丧失掉的。因此有必要对气孔的开关进行调控。气孔运动的分子调控离不开高效的基因开关系统,保卫细胞特异性表达的启动子近几年倍受关注。我们的设想是:当水分供应充足时,气孔尽最大限度开放,吸收CO_2,增加光合产量;当干旱来临时,气孔迅速关闭,减少水分丧失,提高作物的水分高效利用率。这一目标的实现,需要诱导型的保卫细胞特异性表达或强表达启动子的创建,使目的基因在特定的条件下特定的部位表达。鉴于此,本文成功地构建了两个启动子,即DGP1和SIGP1。 受干旱诱导的保卫细胞特异性表达启动子(DGP1, drought induced guard cell specific promoter)的构建:利用PCR的方法,扩增出干旱应答元件和保卫细胞特异性元件,然后组装而成。转基因烟草的组织化学定位表明,DGP1驱动的gus基因在受到干旱诱导的情况下,在保卫细胞中特异性表达,而在未经干旱处理植株的保卫细胞和干旱处理的根、茎和花中均不表达;对转基因烟草GUS活性的定量分析表明,GUS活性明显地受干旱诱导,并且随着处理时间的延长而增强,其中干旱诱导8hr后GUS的活性是诱导前的179倍。而根、茎和叶肉组织在干旱诱导后GUS活性虽然有所提高,但变化不大。这些结果证明,在植物遭遇干旱胁迫时,DGP1启动子可以驱动目的基因在保卫细胞中特异性表达。 构建了一个受多种胁迫诱导的保卫细胞强表达启动子(SIGP1, stress induced guard cell promoter)。该启动子全长746bp,包括多个TCGT基序、叁个5′-TAAAG-3′核心序列和一个TATA框。通过对T1代转基因苗的组织化学定位表明,该启动子驱动的gus基因在逆境(如干旱、ABA、高盐和冷)胁迫的叶片中表达,根中不表达,且老叶中的表达量高于幼叶中的表达量,说明其表达受发育阶段的调控。对下表皮的GUS染色发现,胁迫处理前保卫细胞的染色较浅,而处理后染色明显加深,说明SIGP1启动子可以驱动目的基因在处理后的保卫细胞中强表达。GUS活性荧光定量分析表明,SIGP1启动子驱动的GUS活性在干旱、ABA、高盐和冷等逆境处理下,在根的表达很微弱,且随着处理时间的延长变化不大,但在叶片和表皮中的GUS活性都有增加的趋势。 为了深入理解调控气孔运动的分子机制,除了对保卫细胞特异性表达启动子进行研究外,还对与气孔运动相关的转录因子进行了研究。我们利用RT-PCR的方法,从拟南芥中克隆了与在气孔中表达较多的StDOF1基因的同源基因Atdof1.7,构建了该基因的超表达载体,获得了T1代转基因烟草苗。通过对气孔运动的观察发现,该基因的超表达使叶片表面气孔密度降低,并且促进了气孔的开关。为我们将来从调控转录因子的表达入手,人工干预气孔的开关运动提供理论上的依据。(本文来源于《中国农业大学》期刊2004-06-01)

保卫细胞特异性启动子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

将16个在拟南芥保卫细胞中进行特异性表达和8个非特异表达基因的转录起始密码子ATG上游-500bp的启动子序列在PLACE上进行分析,认为AAAAG基序和TAAAG基序控制某些基因在保卫细胞中进行特异性表达,但分析结果显示有的保卫细胞特异表达启动子的序列中却不含有这两个基序,说明还要其它类型的未知基序控制着保卫细胞中的特异表达,这一理论分析为进一步的实验研究提供了理论依据。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

保卫细胞特异性启动子论文参考文献

[1].董雯.狗尾草突变体的初筛及保卫细胞特异性启动子的克隆鉴定[D].山东师范大学.2013

[2].邓荟芬,刘春林,李进,范亚丽,阮颖.拟南芥保卫细胞中特异性表达基因启动子片段基序分析[J].生物技术通报.2007

[3].李军,龚喜明,林惠琼,宋全波,陈珈.DGP1,一个受干旱诱导的保卫细胞特异性启动子的构建与功能分析[J].中国科学(C辑:生命科学).2004

[4].李军,陈珈中国农业大学生物学院植物生理生化国家重点实验室,王学臣.诱导型保卫细胞特异性启动子的构建与功能分析[C].2004中国植物生理生态学学术研讨会论文摘要汇编.2004

[5].李军.诱导型保卫细胞特异性启动子的构建及Atdof1.7基因超表达对气孔运动的影响[D].中国农业大学.2004

论文知识图

一),启动子驱动的GUs活性在干早处理前...一3部分转化烟草植株的pcR检测结果4 转基因烟草 GUS 的组织化学定位(a)干...一4部分转基因烟草的pCR检测阮OLZ000,...一4转基因拟南芥苗的抗性筛选(绿色为阳...一5转基因烟草的pcR鉴定

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