块菌菌根土壤产酸性几丁质酶放线菌Streptomyces omiyaensis SCPW03的筛选及其几丁质酶酶学性质研究

论文摘要

【目的】开展具有优良酶学性质的酸性几丁质酶放线菌研究为几丁质原料的高效转化提供重要的微生物资源。【方法】以四川攀枝花地区偏酸性块菌菌根土壤为材料,采用稀释平板法分离筛选、16S rDNA基因鉴定产酸性几丁质酶放线菌,并分析高产菌株的酶学性质。【结果】从分离到的17株降解几丁质放线菌中筛选到8株产酸性几丁质酶菌株,经16S rDNA序列测序分析表明均为链霉菌属（Streptomyces）。对其中的高产菌株Streptomyces omiyaensis SCPW03（30.2 U/mL）进行酶学性质表明,该菌所产酶分子大小约为54 kDa,最适反应温度和pH分别为35℃和4.0;该酶在温度25～35℃、pH 6.0的条件下保温60 min较稳定,酶活力保持在90%以上;酶活性受化学抑制剂EDTA、SDS及β-巯基乙醇和金属离子Cu2+、Zn2+、Ca2+、K+、Na+的影响较小,而Fe2+、Mn2+则能够显著促进几丁质酶活性。【结论】研究表明四川攀枝花地区偏酸性块菌菌根土壤中含丰富的产酸性几丁质酶放线菌,菌株S.omiyaensis SCPW03具有高产酸性几丁质酶能力且所产酶具有较多的优良特性。

论文目录

• 1 材料与方法
•   1.1 材料
•     1.1.1 样品来源
•     1.1.2 培养基
•     1.1.3 主要试剂及仪器
•   1.2 产酸性几丁质酶放线菌的分离和鉴定
•     1.2.1 产几丁质酶放线菌的分离
•     1.2.2 产酸性几丁质酶放线菌的筛选
•     1.2.3 产酸性酶菌株的16S rDNA鉴定
•   1.3 酶学性质研究
•     1.3.1 几丁质酶的SDS-PAGE检测
•     1.3.2 初始pH和温度对酶活力的影响
•     1.3.3 金属离子对酶活力的影响
•     1.3.4 蛋白抑制剂对酶活力影响
•     1.3.5 pH和热稳定性试验
• 2 结果与分析
•   2.1 产酶菌株分离
•   2.2 产酸性几丁质酶菌株筛选
•   2.3 产酸性几丁质酶菌株的鉴定
•   2.4 S. omiyaensis SCPW03酶学性质
•     2.4.1 SDS-PAG及酶谱分析
•     2.4.2 pH和温度对酶活力的影响
•     2.4.3 金属离子和化学抑制剂对酶活力的影响
•     2.4.4 酶的pH和热稳定性
• 3 讨 论
• 4 结 论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王田田,马沁沁,苗玉志,周霞

关键词: 块菌,放线菌,酸性几丁质酶,隔离与鉴定,酶学性质

来源: 西南农业学报 2019年10期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 四川师范大学生命科学学院

基金: 四川省应用基础项目(2017JY0147),四川省教育厅重点项目(15ZA0036)

分类号: Q939.9

DOI: 10.16213/j.cnki.scjas.2019.10.014

页码: 2342-2349

总页数: 8

文件大小: 1268K

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