Marc-145细胞微载体悬浮培养消化放大技术研究

论文摘要

为了建立Marc-145细胞微载体培养放大技术,使其用于猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）疫苗的规模化生产,试验在7 L生物反应器内微载体培养Marc-145种子细胞,再用胰蛋白酶消化,然后进行逐级放大培养,并通过细胞最佳消化状态试验、保留胰蛋白酶消化液的影响试验、测试回收微载体试验等方法摸索胰蛋白酶消化放大技术参数。结果表明:Marc-145细胞在初级生物反应器内培养时,微载体使用量为5 g/L,细胞密度达3.18×106个/mL,并且在状态饱满时进行消化放大;在14 L生物反应器内培养时,Marc-145细胞均匀分布在微载体上并且代谢旺盛,在细胞密度为2.91×106个/mL时进行14 L消化放大;在14 L生物反应器内培养Marc-145细胞时,采用批培养方式,细胞比生长速率最大达0.031/h,在培养96小时时细胞密度达2.37×106个/mL。说明试验成功建立了生物反应器微载体培养Marc-145细胞的胰蛋白酶消化放大技术,并实现了逐级放大。

论文目录

• 1 材料
•   1.1 细胞及微载体
•   1.2 主要试剂
•   1.3 主要仪器
• 2 方法
•   2.1 细胞培养与扩增
•   2.2 7 L生物反应器内初级培养种子细胞
•   2.3 细胞最佳消化状态试验
•   2.4 保留胰蛋白酶消化液的影响试验
•   2.5 测试回收微载体试验
•   2.6 三级消化放大培养
• 3 结果与分析
•   3.1 7 L生物反应器内初级培养种子细胞
•   3.2 细胞最佳消化状态试验
•   3.3 保留胰蛋白酶消化液的影响试验
•   3.4 测试回收微载体试验
•   3.5 三级消化放大培养
• 4 讨论与结论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 尹茉莉,张爽,王振军,冯二凯,冷雪,王会岩,李艳,孙美艳

关键词: 细胞,生物反应器,微载体,胰蛋白酶,放大技术,猪繁殖与呼吸综合征病毒

来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年13期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 吉林医药学院抗体工程科技协同创新中心,吉林市园林管理中心,中国农业科学院特产研究所,吉林农业大学,吉林医药学院检验学院

基金: 吉林省教育厅“十三五”科学技术项目(JJKH20180822KJ)

分类号: S852.651

DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2018.07.0155

页码: 16-20+172

总页数: 6

文件大小: 368K

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