（四川大学华西第二医院；四川成都610000）
【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2018）08-0235-01
快速冰冻诊断报告用于术中确定病变的良恶性，手术方式和手术范围等，快速冰冻切片是手术中病理诊断的一种重要方法。手术病人可以通过冰冻结果来确定是否需要由腹腔镜转为开腹手术，或者开腹手术是否需要扩大手术范围或者清扫淋巴结，免去病人受到二次手术的痛苦，因此为病理医生提供一张高质量的冰冻切片十分重要。我院近来的术中冰冻标本量都在每年3万例-4万例左右，并且逐年递增，通过长时间的冰冻切片工作，我对快速冰冻切片有一些自己的经验总结。
一、冰冻取材
1、经过福尔马林浸泡的组织标本不能用于冰冻切片。
2、室温下，切片组织冰晶融化，将出现许多孔状空隙，导致结构破坏甚至酶和蛋白等微细结构移动，以致影响诊断，我们在取材过程中应尽量减少冰晶[1]的产生。
⑴在取材前应将所有器械的水擦拭干净，减少取材标本冰晶的产生；
⑵与临床医生沟通，不要用浸泡过生理盐水、酒精、碘伏的纱布包裹标本；
3、取材组织大小最好为1.5cm×1.5cm×0.2cm，如果组织过大过厚，冻后组织块脱水不好，影响冻后诊断。
4、在工作中，经常会遇到针尖样大小的标本组织送检，如宫内膜，各种小结节等，我们可以先滴加一定量的包埋剂于标本台上，突出于支撑面0.5cm左右，将极少量的标本立即放置于包埋剂表面，在包埋剂下沉以前迅速将标本台放置于冷室冷冻。最后冻好的标本凝固于包埋剂表面，并突出支撑面，利于切片。
5、医生在取完材后，一定要对取材台、取材器械进行清洁消毒，避免交叉污染。
6、通过长期的工作实践，我们可以使用胶水替代OTC包埋剂，以节约成本。注意在组织脱水前，应将胶水冲洗干净，避免组织与纸质标签粘连，影响组织包埋。
二、冰冻切片
1、温度[2]是保证冰冻切片质量的重要因素：细胞致密且较硬的组织冷冻温度较高（-16～-20℃），且冷冻时间较短；细胞疏松且较软的组织温度稍低（-20～-22℃），冷冻时间较长；脂肪组织所需温度更低（-22～-24℃），冷冻组织更长。
2、切片厚度：细胞密集且细胞体积较小的组织薄切；纤维多细胞稀少且细胞体积较大的组织厚切。
3、保证切片质量的关键：
⑴在上标本台夹时选好角度，保证组织切面完整；
⑵切片厚薄均匀，遇到较硬的组织（如宫颈、肌瘤等），可以利用大拇指的体温将组织进行软化后再进行切片；
⑶在HE染色时应勤换染色试剂，不要节约，保证核浆对比清晰，染色漂亮。
三、冰冻收块
1、及时收块
一旦病理诊断结束，应将剩余组织及时固定。
2、4℃冰箱甲醛固定
低温组织迅速复温至室温，极有可能破坏组织生物膜系统，直接影响冻后石蜡切片质量及后续的病理诊断，可将收好的组织块放置于4℃冰箱的福尔马林中固定。
四、冰冻切片机的维护与保养
随着冰冻切片技术和临床外科手术的发展，要求送检冰冻切片的病例越来越多，冰冻切片机的使用频率就越来越高，我们应该正确的使用低温恒冷冰冻切片机，对其进行日常保养，尽量预防和减少故障的发生率。
1、及时清洁冷室内组织碎屑，保证设备内外清洁，特别注意清扫碎屑的方式，往废物槽清扫，尽量不要扫入装有标本台夹头的转轮缝隙里，如果组织碎屑长期积累，会影响右侧转轮的使用，转动转轮会非常费力，影响冰冻切片的速度和质量。
2、定期清洁切片机的主要功能部件，特别是刀架和标本台。
3、定期消毒，特别是切过携带传染病标本后，可采用喷雾式84消毒液。
4、定期给机械系统加润滑剂，请工程师进行专业维护保养。
5、每次切完切片要及时关闭照明开关，按下锁机开关，保证人机安全。
作为一名合格的病理技术员，不仅仅是要干好自己的本职工作，更需要从日常工作中总结经验、发现问题、解决问题，时刻严格要求自己，能够为诊断医生提供一张完美的切片。
参考文献：
[1]包翠芬,刘霞,穆长征,李淑玲.比较三种防冰晶法对切片保存效果的影响[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2007(01)
[2]陈芳,李海.提高病理冰冻切片质量的探讨[J].中国医药指南.2013(06)